几种常见腹泻药对大肠杆菌体外抑菌活性的比较分析

２０１４年第４期　第３２卷　（总第１６５期）　毕节学院学报　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＢＵＩＥ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ　ＮＯ．４，２０１４　Ｖ０１．３２　Ｇｅｎｅｒａｌ　Ｎｏ．１６５　几种常见腹泻药对大肠杆菌体外抑茵活性的比较分析　燕蛟　，杨松　，杨姗　（１．毕节市环境监测站，贵州毕节５５１７００；２．毕节学院化学工程学院，贵州毕节５５１７００）　摘要：用各国临床微生物学实验广泛采用的Ｋ－Ｂ纸片扩散药敏试验方法（美国ＮＣＣＬＳ标准），对阿　莫西林胶囊等８种腹泻药的体外抑菌活性作对比分析，可以得单方制剂在短时间内表现出较好的抑菌　效果，而复方制剂则体现较长时间的持续抑茵作用。基于此，对于普通的肠杆菌感染，施用单方制剂，　不仅足以治疗，也能最大程度减少对人体的毒副作用；对于较为复杂严重的腹泻，则需要选择复方制　剂，既能较为及时的缓解症状，又能持久的治疗病症。　关键词：腹泻药；大肠杆茵；抑茵活性；比较分析　中图分类号：Ｑ９３９　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７３—７０５９（２０１４）０４—００８３—０６　大肠杆菌，１８８５年由德国人埃舍里希（Ｅｓｃｈｅｉｆｃｈ）发现，它分布广泛，在正常情况下，能合成　维生素Ｂ和Ｋ，并产生大肠杆菌素，对人和动物有利。ｎ　但当机体抵抗力下降或大肠杆菌异位时又有　可能成为条件致病菌，对人的健康产生极大危害。通常情况下，人在感染大肠杆菌后的主要症状为　腹泻和发热。感染可能是致命性的，尤其是对孩子及老人而言。１２］　生活中腹泻多是由大肠杆菌引起的，［３１通常的腹泻类药物也主要是通过抑制毒性大肠杆菌繁殖起　作用的。市面上腹泻类药物繁多，非处方（ＯＴＣ）药物居多，这在方便了人们选购药物的同时，无　形中也增加了误选药物的可能。　嗵过调查发现，市面上腹泻类药物，通常为化学制剂和抗生素制剂　两大类单方制剂，或是化学＋抗生素、抗生素＋抗生素组合的复方制剂。　本文选择了阿莫西林等８种使用广泛且具有代表性的腹泻药，采用Ｋ—Ｂ纸片扩散药敏试验方法　（美国ＮＣＣＬＳ标准），测试其体外抑菌活性的特征，以期指导人们生活中正确选择药物。　１材料与方法　１．１供试材料　１．１．１供试菌株　大肠埃希氏菌（以下简称大肠杆菌）菌株，毕节学院化学工程学院应用化学实验室（四）提供。　１．１．２培养基　ＬＢ培养基、牛肉膏蛋白胨培养基。嘲　１．１．３测试药物及其有效成分、化学信息　本研究所选用的测试药物是某药集团制药总厂生产的阿莫西林胶囊、某药集团三精明水药业有　限公司生产的头孢氨苄胶囊、某州百灵企业集团世禧制药有限公司生产的鞣酸苦参碱胶囊、某西同　收稿日期：２０１４—０３—０５　基金项目：贵州省应用化学特色重点实验室项目　作者简介：燕蛟（１９８７一），男，贵州赫章县人，毕节市环境监测站助理工程师。研究方向：环境监测、环境分析。　・８３・　达药业有限公司生产的诺氟沙星胶囊、某化兴华药业有限责任公司生产的小檗碱甲氧苄啶胶囊、某　春大政药业科技有限公司生产的硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊、某南利民制药有限责任公司生产的盐酸　左氧氟沙星胶囊、某州东康药业有限公司生产的头孢氨苄甲氧苄啶胶囊等。这８种测试药物的有效成　分的分子式、结构式、分子量和ＣＡＳ号等化学参数见表１：　衰１　测试药物的有效成分及其化学信息　、ｏ　《　谐　２　这８种测试药物的有效成分结构式如图１所示：　连　学　一盐睃片氧觚沙　帕　濂　碱武碳酸铋　　硫艘厌人繇撩　图１　８种测试药物的有效成分结构式　１．２试验方法　１．２．１大肠杆菌生长曲线的测定　将大肠杆菌菌悬液，接人到盛有加入１００　ｍＬ　ＬＢ培养液的锥形瓶中，在３７￣Ｃ下恒温振荡培养１２　ｈ，　制成大肠杆菌过夜培养液；口　分别于１．５　ｈ、３．０　ｈ、４．０　ｈ、６．０　ｈ、８．０　ｈ、１０．０　ｈ、１２．０　ｈ、１４．０　ｈ、１６．０　ｈ、２０．Ｏｈ时，测量实验组和对照组的吸光度值，由此绘制该供试菌株的生长曲线。　１．２．２几种腹泻药的抑菌活性测定　本实验抑菌活性测试采用Ｋ—Ｂ纸片扩散药敏法，这种由鲍尔（Ｂａｕｅｒ）和科比（Ｋｉｒｂｙ）建立的纸　片琼脂扩散法是各国临床微生物学实验室广泛采用的药敏试验方法。ｒｓ　伽根据单组药敏实验文献，［１１，１２］依　据药物使用说明书，以成人体重为６０　为基准，确定本实验的药物浓度为胶囊药粉浓度１　ｍｇ／ｍＬ。　根据１．２．１测定的大肠杆菌生长曲线，将活跃对数期的大肠杆菌制备成含菌培养基，接着将浸泡　・８４・　在ｌｍｇ／ｍＬ腹泻药溶液中的药敏纸片贴在含菌培养基表面，转移人生化培养箱，在３７＂Ｃ恒温下培养　６．Ｏｈ、１２．０ｈ、２４．Ｏｈ、４８．ｏｈ时，用Ｇ６全自动菌落分析仪拍摄各培养基生长情况，并使用自动菌落分　析仪的抑菌圈测量功能测定抑菌圈大小。　２结果与分析　２．１大肠杆菌生长曲线的测定　根据方法１．２．１，在０　２０　ｈ内测得大肠杆菌的生长曲线如下图２所示：　一一一一一一　一　．，　嚣　ｊｊ／　－／　。。　：　————　———，————，————，————　————　——一　图２大肠杆菌生长曲线　大肠杆菌的对数期在１．５　８．０　ｈ之间嘲，根据图２生长曲线所示，本文选择培养６．０　ｈ的大肠杆菌制　备含菌培养基进行抑菌活性的检测。　２．２几种腹泻药的抑菌活性测定　根据方法１．２．１，分别于６　ｈ、１２　ｈ、２４　ｈ、４８　ｈ观察和测定８种测试药物抑菌圈生长情况，结果见　如表３、图３和图４所示：　表３测试药物不同时刻的抑菌圈的大小　将表３作图如图３所示：　圈　町莫西林　口诺氟沙星　ｉ盐酸左氧氟沙星　一头孢氨苄　－小集碱甲氧苄啶　＿头孢氮苄甲氧苄啶　日鞣酸苦参碱　日硫酸庆大霉素碳酸铋　６　１２　２４　４８　图３测试药物相同时刻抑菌圈大小的比较　・８５・　从图３和图４不难看出，不同药物在４８　ｈ的培养时间范围内，体现出不同的抑菌效果。短时间内　（６　ｈ），单方药物作用的平均水平很高，明显超出复方类别药物，这说明单方药在治疗急性感染上效　果更明显；随着作用时间延长，复方药开始起作用，１２　ｈ内抑菌圈直径居于前四昧的药物中，复方　药占据了３味，这说明复方药在治疗效果上比单方更明显；１２　ｈ后，复方药的优势一直持续到实验　结束，这说明复方药在治疗持续时间上更持久；作为单方的诺氟沙星和阿莫西林，在整个实验期间　抑菌效果一直处于前列，这说明单方药也能有较好的治疗效果和较长的持续时间。　除此之外，不同药物的抑菌圈变化趋势不尽相同，它能反映出药物进入人体后药效变化的大致　情况，具体如下图５所示：　◆・－阿莫西林　　一一一一一头孢氨苄　头孢氨苄甲氧苄啶　十鞣酸苦参碱　一诺氟沙星　一・－小檗碱甲氧苄啶　＿．．一一・一硫酸庆大霉素碳酸铋　＋盐酸左氧氟沙星　４０．００　３５．ｏ０　乓　｛＜　量　３０．００　疆　２５．００　｝翟　辕　２０．ｏ０　１５．ｏｏ　ｌＯ．００　图５测试药物抑菌圈大小的变化情况　图５说明，盐酸左氧氟沙星和诺氟沙星能在短时间内迅速产生效果并持续作用，这说明不论是　化学类还是抗生素类药物，不论是单方制剂还是复方制剂，只要施用得当，都能产生良好的治疗效　果；阿莫西林、头孢氨苄和鞣酸苦参碱都是单方制剂，表现睛况也都很一般，但化学类的鞣酸苦参　碱起效较快，这可能和两种药物的药理不同有关，这说明对于普通的肠杆菌感染，施用单方制剂，　不仅足以治疗，也能最大程度减少对人体的毒副作用；作为抗生素复方的头孢氨苄甲氧苄啶，虽然　在２４　ｈ内和盐酸左氧氟沙星效果相当，但２４　ｈ后作用衰减明显，达１２．４７％，在可预见的时间里，药　效将继续大幅衰减。这对于过度依赖抗生素的用药现状，是一个十分值得思考的提示；作为化学类＋　抗生素的盐酸左氧氟沙星和小檗碱甲氧苄啶表现特别，盐酸左氧氟沙星一直占据抑菌效果第一的位　置，小檗碱甲氧苄啶也不逊色，虽然起效花费时间最长（６　ｈ内基本没有效果），但后劲十足，效果　却十分明显，持久效果也很可观，这说明化学类制剂和抗生素联用的前景是十分客观的，可能会是　今后药品发展的重要方向。　３结论　腹泻是生活中的一种常见疾病，通常的腹泻类药物主要是通过抑制毒性大肠杆菌繁殖起作用　的，市面上腹泻类药物繁多，非处方（ＯＴＣ）药物居多，为避免人们盲目选择腹泻药，根据本文测　定结果，在购买腹泻药时应针对不同的病症情况施用不同的药物。　对于紧急程度一般的普通的肠杆菌感染，施用单方制剂即可有效治疗；对于较为紧急的普通的　・８７・　肠杆菌感染，施用化学类单方制剂可得到及时有效地治疗。对于紧急程度一般的较为复杂的肠杆菌　感染，选用抗生素单方制剂可有效地持久的治疗；对于较为紧急的复杂的肠杆菌感染，施用抗生素　复方制剂可得到及时有效地治疗，但是持续时间有效，紧急症状消除后应加用化学类＋抗生素类复方　巩固效果；对于情况紧急、复杂且严重的肠杆菌感染，应优先选择化学类＋抗生素类复方，既能较为　及时的缓解症状，又能持久的治疗病情。由于抗生素治疗机理的特殊性，在同等条件下，应优先选　择化学类药物，化学类药物毒副作用小，赖药性小，且在体内代谢较快。　参考文献：　【１］杨苏声．细菌分类学［Ｍ］．北京：中国农业大学出版社，１９９７：７９．　【２】上海医科大学《实用内科学》编委会．实用内科学（下册）［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，１９９２：１４０７．　【３】王慧，胡智慧，张洪花，等．一起由产毒性大肠埃希茵引起的腹泻暴发疫情［Ｊ】．中国病原生物学杂志，　２００８：１０．　［４】夏东胜，程刚，周杰明，等．非处方药适应证范围的限定与探讨［Ｊ］．医药导报，２００６，０７．　［５】吕景燕，欧阳桐梅．医院制剂分类浅谈［Ｊ］．海峡药学，１９９６：１１．　［６］钱存柔．微生物学实验教程［Ｍ］．北京：北京大学出版社，１９９９：１７６—１８０．　［７】范秀容，李广武，沈萍，等．微生物学实验（第三版）［Ｍ］．北京：高等教育出版社，１９９９．　［８］倪语星．抗微生物药物敏感性试验规范［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，２００２．　［９】蒋益虹．荷叶抑茵活性成分的研究［Ｄ］．杭州：浙江大学，２００７：１５．　【１０］Ａｎｄｒｅｗｓ　ＪＭ．Ｆｏｒ　ｔｈｅ　ＢＳＡＣ　ｗｏｒｋｉｎｇ　ｐａｒｔｙ　ｏｎ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｔｅｓｔｉｎｇ，ＢＳＡＣ　ｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄ　ｄｉｓｃ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｔｅｓｔｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ［Ｊ］．Ｊ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，２００１，４８（Ｓｕｐｐｌ　１）：４３－５７．　【ｌ１】王辉，徐英春，陈民钧，等．简要介绍美国ＮＣＣＬＳ药敏试验纸片扩散￣华医学检验杂志，１９９５，１８（１）：６０—６２．　￣Ｌ（１９９３年１２月版）［Ｊ】．中　【１２】张彩芳，张爱君．纸片扩散法药敏试验条件的选择［Ｊ】．宁夏医学杂志，２００６，２８（１２）：９４６—９４７．　Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　ｏｆ　Ｓｅｖｅｒａｌ　Ｄｉａｒｒｈｅａ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ｔｏ　Ｅ　ｃｏｌｉ　Ｓｔｒａｉｎｓ　ＹＡＮ　Ｊｉａｏ　，ＹＡＮＧ　Ｓｏｎｇ　，ＹＡＮＧ　Ｓｈａｎ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　Ｓｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｉｊｉｅ，Ｂｉｊｉｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ５５　１　７０Ｏ，Ｃｈｉｎａ；　２．（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｂｉｊｉｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｉｊｉｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ５５　１　７００，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｅｉｇｈｔ　ｔｙｐｉｃａｌ　ｄｉａｒｒｈｅａ　ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ，ｓｕｃｈ　ａｓ　ＡｍｏｘｉｃｉＵｉｎ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ，ｗｅｒｅ　ｃｈｏｏｓｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ｔｅｓｔｅｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｔｏ　Ｅ．ｃｏｌｉ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｕｓｉｎｇ　Ｂａｕｅｒ－Ｋｉｒｂｙ　ｄｉｓｃ　ａｇａｒ　ｄｉｆｕｓｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ（ｔｈｅ　Ｕｎｉｔｅｄ　Ｓｔａｔｅｓ　ＮＣ－　ＣＬＳ　ｓｔａｎｄａｒｄｓ）．Ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｔｈｅ　ｕｎｉｌａｔｅｒａｌ　ｄｒｕｇｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｂｅｔｔｅｒ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ａ　ｓｈｏｒｔ　ｐｅｒｉｏｄ　ｏｆ　ｔｉｍｅ，ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｄｒｕｇｓ　ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ　ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ　ｉｎｈｉｂｉｔ－　ｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｌｏｎｇ　ｔｉｍｅ．Ｓｏ，ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｃｏｍｍｏｎ　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅ　ａｃｅａｅ　ｅｎｔｅｒｉｃ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ　ｕｎｉｌａｔｅｒａｌ　ｄｒｕｇｓ　ｗａｓ　ａｖａｉｌａｂｌｅ　ｎｏｔ　ｏｎｌｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｂｕｔ　ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｔｏｘｉｃ　ｓｉｄｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｂｏｄｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｍａｘｉｍｕｍ　ｅｘｔｅｎｔ；　Ｆｏｒ　ｍｏｒｅ　ｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄ　ｓｅｖｅｒｅ　ｄｉａｒｒｈｅａ，ｔｈｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｄｒｕｇｓ　ｗｅｒｅ　ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ，ｗｈｉｃｈ　ｃｏｕｌｄ　ｍｏｒｅ　ｔｉｍｅｌｙ　ｒｅｌｉｅｖｅ　ｓｙｍｐｔｏｍｓ，ａｎｄ　ｇａｖｅ　ｌａｓｔｉｎｇ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｉｓｅａｓｅ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｄｉａｒｒｈｅａ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ；Ｅ．ｃｏｌｉ　Ｓｔｒａｉｎｓ；Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ；Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　（责编：谭本龙责校：张永光）　・８８・