沙利度胺通过下调转化生长因子-β_1肿瘤坏死因子-α抑制大鼠肺纤维化

・１３４６・　中国药物与临床２０１０年ｌ２月第１Ｏ卷第１２期Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ．Ｄｅｃｅｍｂｅｒ　２０１０。Ｖｏ１．１０．Ｎ０．１２　实验Ｘｄｔ＂究・　沙利度胺通过下调转化生长因子一１３１　肿瘤坏死因子一　抑制大鼠肺纤维化　罗　潇刘学军　【摘要】　目的观察沙利度胺对博来霉素所致大鼠肺纤维化的影响，并探讨其可能作用机制。方法选　择健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠４５只，随机分为正常对照组（Ｎ组）、肺纤维化模型组（Ｍ组）和沙利度胺治疗组（Ｔ组）３　组，每组各ｌ５只。Ｍ组于气管内滴注博来霉素（ＢＬＭ）５　ｍｇ／ｋｇ生理盐水诱导肺纤维化，造模次日起每日腹腔内注　射二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）液；Ｔ组同样方法造模，次日起每日腹腔内注射沙利度胺（４　ａｒｇ／只）ＤＭＳＯ溶液；Ｎ组气管内　滴注生理盐水，次日起每日腹腔内注射ＤＭＳＯ液。各组动物均于制模后的第７、１４、２８天分别随机处死５只动物，　取肺组织行病理切片行苏木素一伊红（ＨＥ）染色和Ｍａｓｓｏｎ染色，观察肺泡炎和肺纤维化程度；碱水解法检测肺组　织羟脯氨酸（Ｈｙｐ）含量；双抗夹心酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法测定肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中转化生长因子ｐ　（ＴＧＦ一１３　）及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）一　的含量。结果Ｍ组纤维化程度逐渐加重，于第２８天形成明显的肺纤维化；　其肺泡炎、纤维化评分，Ｈｙｐ、ＴＧＦ—Ｂ　、ＴＮＦ一仅的含量与Ｎ组比较均明显升高（Ｐ＜０．０５）。Ｔ组各时间点肺泡炎程度　显著低于Ｍ组（Ｐ＜０．０５）。第１４、２８天，Ｔ组肺纤维化程度及肺组织Ｈｙｐ含量较Ｍ组均明显降低（Ｐ＜０．０５）。此外，　Ｔ组ＢＡＬＦ中ＴＧＦ一１３１、ＴＮＦ—ｏＬ的含量亦低于Ｍ组，差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论沙利度胺可减轻ＢＬＭ诱　导的大鼠肺纤维化，其作用机制可能是通过下凋ＴＧＦ—Ｇ，及ＴＮＦ＿　在肺内的表达而实现的。　【关键词】转化生长因子Ｂ　；肿瘤坏死因子仅；肺纤维化；沙利度胺　Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ　ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｂｙ　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｏｆ　ＴＧＦ－１３ｌ　ａｎｄ　ＴＮＦ一　ｉｎ　ｒａｔｓ　ＬＵＯ　Ｘｉａｏ，ＬＩＵ　Ｘｕｅ　ｊｕｎ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｇｅｒｉａｔｒｉｃｓ．Ｆｉｒｓｔ　Ａｆｉｆｌｉｔａｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｓｈａｎｘｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｙｕａｎ　０３０００１，Ｃｈｉｎａ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ　ｏｎ　ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ａｎｄ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｆｏｒｔｙ—ｆｉｖｅ　ｈｅａｌｔｈｙ　ｍａｌｅ　ｗｉｓｔａｒ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｈｒｅｅ　ｇｒｏｕｐｓ：ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐ　Ｎ），ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐ　Ｍ）ａｎｄ　ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ　ｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐ　，　ｗｉｔｈ　１５　ｒａｔｓ　ｉｎ　ｅａｃｈ　ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ　ｇｒｏｕｐ　Ｍ　ｒｅｃｅｉｖｅｄ　ｉｎｔｒａ—ｔｒａｃｈｅａｌ　ｉｎｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　５　ｍｇ／ｋｇ　ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ（ＢＬＭ）ｆｏｒ　ｍｏｄｅｌｉｎｇ　ｏｆ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ，ａｎｄ　ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｄａｉｌｙ　ＤＭＳＯ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｎｅｘｔ　ｄａｙ；ｇｒｏｕｐ　Ｔ　ｒｅｃｅｉｖｅｄ　ＢＬＭ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ，ａｎｄ　ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　４　ｍｇ　Ｔｈａｌｉｄｏｎｆｉｄｅ（ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ＤＭＳＯ）；ｇｒｏｕｐ　Ｎ　ｗａｓ　ｉｎｊｅｃｔｅｄ　ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙ　ｗｉｔｈ　ＤＭＳＯ　ａｆｔｅｒ　ｉｎｔｒａｔｒａｃｈｅａｌ　ｉｎｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓａｌｉｎｅ．Ｅｖｅｒｙ　ｆｉｖｅ　ｒａｔｓ　ｉｎ　ｅａｃｈ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅ　ｓａｃｒｉｉｆｃｅｄ　ａｔ　ｒａｎｄｏｍ　ｆｏｒ　ｐａｔｈｏ—　ｌｏｇｉｃａｌ　ｓｅｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｌｕｎｇ　ｏｎ　ｄａｙｓ　７，１４　ａｎｄ　２８　ａｆｔｅｒ　ｍｏｄｅｌｉｎｇ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｄｅｇｒｅｅ　ｏｆ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ａｌｖｅｏｌｉｔｉｓ　ａｎｄ　ｐｕｌ—　ｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｗａｓ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｂｙ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｗｉｔｈ　Ｈ＆Ｅ　ａｎｄ　ｔｒｉｃｈｒｏｍｅ　ｍａｓｓｏｎ　ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅ（Ｈｙｐ）　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｎｇ　ｔｉｓｓｕｅ　ｗａｓ　ｅｘａｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ａｌｋａｌｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＴＧＦ—Ｂ】ａｎｄ　ＴＮＦ—　ｉｎ　ＢＬＡＦ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｏｕｂｌｅ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　ｓａｎｄｗｉｃｈ　ＥＬＩＳＡ．Ｒｅｓｕｌｓｔ　Ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ｍ，ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｇｒａｄｕａｌｌｙ　ａｎｄ　ｂｅｃａｍｅ　ｓｉｇｎｉｉｆ—　．ｃａｎｔ　ｏｎ　ｄａｙ　２８，ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈｅｒ　ｓｅｏｒｅｓ　ｏｆ　ａｌｖｅｏｌｉｔｉｓ　ａｎｄ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ，ａｎｄ　ｈｉ　ｇｂｅｒ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　Ｈｙｐ，ＴＧＦ—ｐｌ　ａｎｄ　ＴＮＦ—　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ｎ（Ｐ＜０．ｏ５）．Ｇｒｏｕｐ　Ｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｌｅｓｓ　ｉｆｂｒｏｓｉｓ　ｔｈａｎ　ｇｒｏｕｐ　Ｍ　ａｔ　ａｌｌ　ｔｉｍｅ　ｐｏｉｎｔｓ（Ｐ＜０．ｏ５），ａｎｄ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｇｒｏｕｐ　Ｍ，ｔｈｅ　ｓｃｏｒｅ　ｏｆ　ｐｕｂｎｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　Ｈｙｐ　ｗｅｒｅ　ａｐｐａｒｅｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒｅｄ　ｏｎ　ｄａｙｓ　１４　ａｎｄ　２８　（Ｐ＜０．０５）．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅ　１ｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＴＧＦ—Ｂ１　ａｎｄ　ＴＮＦ—ｄ　ｉｎ　ＢＡＬＦ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ｔ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ｍ（Ｐ＜０．０５）．　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ　ｍａｙ　ａｌｌｅｖｉａｔｅ　ｔｈｅ　ｄｅｇｒｅｅ　ｏｆ　ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｂｙ　ｄｏｗｎ—ｒｅｇｕｌａｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｏｆ　ＴＧＦ—Ｂ１　ａｎｄ　ＴＮＦ—　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｕｎｇｓ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｂｅｔａｌ；Ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ－ａｌｐｈａ；Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｉｆｂｒｏｓｉｓ；Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ　肺间质纤维化，简称肺纤维化（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｆｉｂｒｏ—　肺部弥漫性疾病。肺纤维化的发病机制尚不十分明　ｓｉｓ，ＰＦ）是一类累及肺间质、肺泡和（或）细支气管的　确。近年来，大量研究证实许多细胞因子在其发生发　基金项目：山西省科技攻关计划项目（２００８０３１１０５９—５）　展中起关键作用。有研究表明［一］沙利度胺是一种有效　作者单位：０３０００１太原，山西医科大学第一医院老年病科　的双向免疫调节剂，可以抑制肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）－ａ　通信作者：刘学军　的产生和抑制胶原合成，对肝纤维化及肝硬化具有一　０１０，Ｖｏ１．１０　０．　中国药物与临床２０１０年１２月第１０卷第１２期Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ　２定疗效。Ａｄａｍｓ和ＬｅｈｍａｎＥｚ］通过实验证明沙利度胺　对风湿病的治疗效果优于皮质激素。Ｍｅｌｏ等［，］发现　沙利度胺可缓解大鼠肠黏膜炎的炎性症状，且抑制　体内多种炎症因子的产生。目前，沙利度胺的抗炎、　调节免疫作用已经得到肯定，并且在许多疑难疾病　维化程度，肿泡炎、肺纤维化均分为４级，分别评为　０　３分。②肺组织Ｈｙｐ含量测定：取冻存肺组织湿质　量３０～１００　ｍｇ。采用样本碱水解法，按照试剂盒说明　书操作测定肺组织Ｈｙｐ含量。（￣）ＢＡＬＦ中ＴＧＦ—Ｂ　及　ＴＮＦ一仅含量的测定：以双抗夹心ＥＬＩＳＡ法。参照试　剂盒说明书测定ＢＡＬＦ中ＴＧＦ—ｐ　的含量。　的治疗方面取得突出疗效［　。本研究利用博来霉素　致大鼠肺纤维化模型观察沙利度胺对肺纤维化的影　响。并探讨其可能的作用机制，为肺间质纤维化的临　床治疗提供新的思路。　１材料与方法　１．５统计学处理：采用ＳＰＳＳ１３．０统计软件．计量资　料采用ｘ一＿＿－ｓ表示，进行单因素方差分析，两两比较采　用ＬＳＤ法分析，Ｐ＜Ｏ．０５为差异有统计学意义。　２结　果　１．１材料：健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠４５只，体质量为　（２００＋２０）ｇ，由山西医科大学生理实验室动物房提　供；沙利度胺及二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）购自美国Ｓｉｇｍａ　公司；注射用盐酸博来霉素，１５　ｍｇ／支，日本化药株　式会社生产；羟脯氨酸（Ｈｙｐ）试剂盒、大鼠转化生长　２．１肺组织病理学改变：Ｎ组大鼠肺组织第７、ｌ４、　２８天各时间点未出现明显的病理变化，偶可见少数　炎细胞或成纤维细胞，肺泡结构完整，肺泡壁无增　厚．肺泡腔大小均匀、完整，腔内无渗出。Ｍ组于造模　后第７天出现明显的肺泡炎表现，可见大面积单核　细胞浸润，肺泡隔增宽，部分肺泡腔内充满单核细胞　并有出血；第１４天肺泡炎有所减轻，仍可见肺泡腔　因子（ＴＧＦ）一ｐ　、ＴＮＦ一　酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）　试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。　１．２模型的建立、分组：４５只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为　正常对照组（Ｎ组）、肺纤维化模型组（Ｍ组）和沙利　内有少量巨噬细胞，中性粒细胞及淋巴细胞渗出，间　质可见成纤维细胞明显增生，肺泡壁增厚，结构有所　破坏；第２８天肺泡炎不明显，纤维化程度加重，特别　是胸膜下、大气道及血管壁周围的基质胶原明显增　度胺治疗组（Ｔ组）３组，每组各１５只。造模前３组大　鼠均腹腔内注射３％水合氯醛（１　ｍｌ／１００　ｇ），麻醉后　Ｍ组按文献『５］所示方法于气管内滴注ＢＬＭ生理盐　水０．３　ｍｌ（ＢＬＭ按５　ｍｇ／ｋｇ），轻揉胸部片刻，使其均　匀分布于肺组织内，以复制肺纤维化动物模型。次日　多，肺泡结构严重破坏，部分肺泡腔消失，由胶原纤　维及成纤维细胞占据，出现许多大小不等的囊气腔。　Ｍ组各时间点肺泡炎及肺纤维化程度与Ｎ组比较，　差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。Ｔ组与Ｍ组比较，肺　起每只腹腔内注射ＤＭＳＯ液０．２４　ｍｌ／ｄ，直至处死：Ｔ　组同样方法复制肺纤维化模型。次日起每只腹腔内　注射沙利度胺溶液０．２４　ｍｌ／ｄ（沙利度胺按４　ｍｇ／只。　泡炎程度有所减轻，第７、ｌ４天差异有统计学意义　Ｐ＜Ｏ．０５）。纤维化程度第７天不明显，第１４、２８天有　所减轻，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。见表１，２。　表１　３组肺泡炎评分Ｇ＋ｓ）　用ＤＭＳＯ溶解至０．２４　ｍ１），直至处死；Ｎ组气管内滴　注生理盐水０－３　ｍ１．次日起每只腹腔内注射ＤＭＳＯ　液０．２４　ｍｌ／ｄ，直至处死。　１＿３标本处理：各组大鼠于造模后的第７、１４、２８天　分别随机抽取５只处死。处死大鼠采用腹主动脉放　血法，剖开胸腔，结扎右肺门，于左肺行支气管肺泡　灌洗术，共５次，每次２　ｍｌ，反复抽注多次，同时轻揉　左肺，收集支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ），１５００　ｒ／ｍｉｎ离　心５　ｍｉｎ，取上清存于一２０℃冰箱保存，待测ＴＧＦ—Ｂ　及ＴＮＦ一　的含量。取右肺上中叶保存于一２０℃冰箱　注：　与Ｎ组比较Ｐ＜０．Ｏ１；　与Ｍ组比较Ｐ＜Ｏ．０５　表２　３组肺纤维化评分Ｇ￣ｓ）　保存，待测Ｈｙｐ含量。取右肺下叶，中性甲醛固定，　石蜡包埋切片，供病理学检测。　注：与Ｎ组比较伙０．０１，ｂＰ＜Ｏ．０５；　与Ｍ组比较Ｐ＜Ｏ．０５　１．４观察指标及方法：①肺组织病理学观察：将右　下肺石蜡包块切片行苏木素一伊红（ＨＥ）及Ｍａｓｓｏｎ　染色，在Ｏｌｙｍｐｕｓ　ＣＸ３　１光学显微镜下观察肺组织病　理学变化。根据Ｓｚａｐｉｅｌ等　６＿方法判断肺泡炎及肺纤　２．２肺组织Ｈｙｐ的含量：第７天３组动物间肺组织　Ｈｙｐ含量比较差异无统计学意义，第１４、２８天３组　间比较有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。见表３。　２．２　ＢＡＬＦ中ＴＧＦ—Ｂ１及ＴＮＦ一０【的含量：Ｍ组ＴＧＦ—　・１３４８・　中国药物与临床２０１０年１２月第１０卷第ｌ２期Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆ＣｌｉｎｉｃｓＤｅｃｅｍｂｅｒ　２０１０，Ｖ０１．１Ｏ，Ｎ０．１２　，表３大鼠肺组织Ｈｙｐ含量比较（　±ｓ）　ｍｇ／ｇ　维细胞内胶原ｍＲＮＡ水平的提高，使胶原蛋白合成　增加；另一方面通过诱导基质金属蛋白酶（ＭＭＰ）合　成，抑制组织金属蛋白酶抑制剂（ＴＩＭＰ）的表达与激　活，从而减少细胞外基质的降解。同时，ＴＧＦ一１３　还可　以促进成纤维细胞增殖和聚集，促使成纤维细胞表　注：与Ｎ组比较ａｐ＜０．０５．ｈｐ＜ｏ．０１；与Ｍ组比较‘　０．０５　８　、ＴＮＦ一０ｃ含量较Ｎ组均显著升高，Ｔ组ＴＧＦ一１３　、　型向成肌纤维细胞表型转化，刺激巨噬细胞分泌其　他促纤维化细胞因子，如ＴＮＦ一０【、ＩＬ一１、血小板源性　ＴＮＦ一　含量较Ｍ组均有所下降，但仍高于Ｎ组，差　异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。见表４，５。　表４　３组ＢＡＬＦ中ＴＧＦ—Ｂ１含量（　±　）ｐｇｌｍｌ　注：　与Ｎ组比较Ｐ＜Ｏ．０１；与Ｍ组比较　ｌ尸＜Ｏ．Ｏ１，　０．０５　表５　３组ＢＡＬＦ中ＴＮＦ～ｄ的含量（　±ｓ）ｐｇ／ｍｌ　注：　与Ｎ组比较Ｐ＜０．０１：与Ｍ组比较　：０．Ｏｌ，　尸＜Ｏ．０５　３讨　论　２０世纪七八十年代，沙利度胺因海豹胎事件而　撤出市场，然而，人们对它的研究并没有停止，近年　来，沙利度胺由于其重要的抗炎、免疫调节及抗血管　生成作用，又重新受到国内外学者的广泛关注。研究　表明，沙利度胺可抑制ＴＮＦ～ｏ【、白细胞介素（ＩＬ）一１　Ｂ、　ＩＬ一６和粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ—ＣＳＦ）　的产生，刺激ＩＬ一１０的分泌，增加ＩＬ一２、ＩＬ一４和干扰　素（ＩＦＮ）一　的合成。而这些众多的细胞因子均参与　肺纤维化的形成，因此认为沙利度胺可能对肺纤维　化具有潜在的治疗作用。目前，利用博来霉素诱导大　鼠肺纤维化模型已被广泛认同并运用。本实验病理　结果显示Ｍ组大鼠第７天肺泡炎最明显，之后炎症　逐渐减轻．纤维化程度逐渐加重，第２８天肺泡结构　破坏，形成明显的肺纤维化，与文献［８］报道一致；同　时，代表胶原含量的肺组织Ｈｙｐ含量随时间逐渐升　高，均提示肺纤维化模型复制成功。Ｔ组与Ｍ组趋势　相同，但肺泡炎、纤维化程度、Ｈｙｐ含量均显著低于　Ｍ组，说明沙利度胺具有一定的抗纤维化作用。　众多学者认为，肺纤维化的形成与细胞因子网　络密切相关，而ＴＧＦ一１３　被认为是迄今发现的最重　要的一种促纤维化因子，在肺纤维化的发生和发展　过程中起着重要的作用。ＴＧＦ—ｐ，可在转录和翻译水　平上对胶原蛋白产生影响［　。一方面通过刺激成纤　生长因子（ＰＤＧＦ）等．１Ｏ］。ＴＮＦ—Ｏｔ是一种参与局部损伤　和炎症反应的细胞因子，可聚集炎细胞、进而刺激成　纤维细胞增殖并分泌大量胶原。研究发现，在病毒转　染ＴＮＦ一　的ｃＤＮＡ后，小鼠肺内的炎症明显增强，　中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞聚集增加。接着成　纤维细胞聚集且细胞外基质沉积．最后导致肺纤维　化…］。此外，．ＴＮＦ一仪与ＴＧＦ一１３　可通过直接或间接的　作用相互诱导产生，共同促进肺纤维化。本实验结果　显示，Ｍ组ＢＡＬＦ中ＴＧＦ一１３．及ＴＮＦ—ｏ【含量明显上　升，于造模后第７天即肺泡炎最重时期达峰值，第　ｌ４天、２８天逐渐降低，但仍高于Ｎ组；经沙利度胺　早期干预后，各时间点ＴＧＦ一１３．及ＴＮＦ一　含量较Ｍ　组均显著降低，提示沙利度胺可通过下调ＴＧＦ—ｐ　及ＴＮＦ一仅的表达减轻肺泡炎程度．并抑制细胞外基　质的沉积和胶原蛋白的合成．从而达到抑制肺纤维　化的作用。本实验为肺问质纤维化的临床治疗提供　了一条新的思路。但是，由于肺纤维化的发病机制较　～一～一　一～一复杂，沙利度胺减轻肺纤维化的发病机制仍有待进　一步的研究。　参考文献　～一　一　一中国药物与临床２０１０年ｌ２月第】０卷第１２期Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ　２０１０，Ｖｏ１．１０，Ｎｏ．１２　Ｈ‰ｚｌ｛．　　～＿　ｑ　　ｒａ詈ｒ　ｒ　Ｔ　ｋ＿　Ⅱ　一０　ｙ　　Ｋ　ｎ　～　　　７　ｎｌｕｎｏｌ，２００６，１７７（５）：３３４４—３３５４．　１０　Ｂｒａｎｔｏｎ　ＭＨ，Ｋｏｐｐ　ＪＢ．ＴＧＦ—Ｂ　ａｎｄ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ．Ｍｉｃｒｏｂｅｓ　Ｉｎｆｅｃｔ，　１９９９，１（１５）：１３４９－１３６５．　８　１ｌ　杨俊玲，尹金植，李青山，等．实验性肺纤维化小鼠ＩＬ—ｌ和　ＴＮＦ—　的动态表达及意义．吉林大学学报（医学版），２００７，３３　（３）：５２２．　９　～㈨　一一ｍ　～一一～一一　　（收稿日期：２０１０—０８—１５）　哆　＿罢　Ｍ　ｍ　・Ｉ临床ｘ０ｔ－究・　丁咯地尔注射液治疗突发性耳聋疗效观察　米延起黄建东　突发性耳聋（突聋）是耳病中的急症。我院用丁咯地尔注　表１　２组治疗后疗效比较　射液治疗突发性耳聋４０例取得较好疗效，现报告如下。　１资料与方法　１．１临床资料：入选２００８年４月至２００９年４月在我科就诊　患者４０例，其中男性２４例，女性ｌ６例，年龄ｌ７～５８岁，病程　注：　与对照组比较Ｐ＜０．０５　１　ｄ至１年。根据１９９７年中华医学会耳鼻咽喉科学会及中华　突发性耳聋目前认为主要有２种原因…：①内耳微循环　耳鼻咽喉科杂志编辑委员会制定突发性聋诊断标准…：轻度　障碍：当人情绪激动或着急之后，肾　腺素分泌增加，使内耳　（１度）：听力损失在１Ｏ～３Ｏ　ｄＢ者；中度（２度）：听力损失在　小动脉血管发生痉挛，小血管内血流缓慢，造成血液中的红　３ｌ～６０　ｄＢ者；重度（３度）：听力损失在６ｌ　ｄＢ　者。本资料　细胞与血小板发生亲和，发生血行障碍，内耳供氧不足导致　４０例患者均符合上述诊断标准，其中轻度ｌ０例．中度２７例，　突聋的发生。一些老年人，特别是合并动脉硬化者．内耳血运　重度３例。随机分为２组，治疗组２０例（２２耳），对照组２０例　极易发生障碍而引起突聋。②病毒感染：病毒对内耳血管中　（２ｌ耳）。２组患者一般资料差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）。　的红细胞和听神经有较强的亲和力，许多病人发病前有感冒　１．２治疗方法：对照组用　磷酸腺苷二钠、辅酶Ａ、低分子右　病史．当病毒侵入内耳后与红细胞、血小板发生亲和．凝集成　旋糖酐、激素等常规治疗。治疗组在对照组所用药物基础上　团，阻塞内耳血管，导致突聋的发生。另外，病毒和听神经亲　加用丁咯地尔注射液０．２　ｇ加入１０％葡萄糖注射液２００　ｍｌ　和，可使听神经充血、水肿，也是引起突发性耳聋的原因。丁　中，静脉滴注，２５～３０滴／ｍｉｎ，每日１次，１０　ｄ为１个疗程．连　咯地尔为Ｏｒ－ｔ肾上腺素能受体抑制剂２１．是一种血管活性药　续治疗２个疗程。　物，具有松弛血管平滑肌、抑制血小板的聚集、释放和与纤维　１－３疗效评定标准：根据伞　梅尼埃病和突发性聋诊断标准　蛋白原的结合、增强红细胞变形能力、非特异性的弱钙拮抗　及疗效评定标准进行疗效评定。临床痊愈：症状全部消失，听　作用、节省组织耗氧等多种药理作用。通过对２组病例的观　力恢复达实用水平。显效：症状基本消失．听力恢复或听力检　察，丁咯地尔注射液治疗本病效果较好且使用期间未发现明　查提高３Ｏ　ｄＢ以上。有效：主要症状消除或减轻，听力检查提　显不良反应，治疗突发性耳聋用药越早，效果越好。因此丁咯　高。无效：与治疗前相比较各方面均无进步。　地尔注射液安全有效，值得临床推广应用。　１．４统计学方法：采用　检验，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　参考文献　２结　果　１　中华医学会耳鼻咽喉科学会，中华耳鼻咽喉科杂志编辑委员　２组所有病例中痊愈的患者均为发病１周内得到治疗　会．突发性聋诊断依据和疗效分级．中华耳鼻咽喉科杂志，１９９７，　者，无效的１０例病例均为发病时间较长的病例，可突发性耳　３２（２）：７２．　聋治疗越早疗效越好。２组疗效比较见表１　２　钟惠菊，壬彦平．盐酸丁咯地尔治疗糖尿病周围神经病变４０例　３讨　论　临床观察．中国糖尿病杂志，２００３，１１（６）：４４５．　作者单位：２６１０４１　１１１东省潍坊市人民医院药剂科　（收稿日期：２０１０—０７—１３）