发表时间:2015-04-09T16:31:00.050Z 来源:《医药前沿》2014年第33期供稿 作者: 姜连瑛[导读] 脑脊液(CSF)是一种细胞外液,主要由各脑室的脉络丛通过血液透析作用而产生。姜连瑛
(黑龙江省齐齐哈尔市甘南县妇幼保健院 162100)
【摘要】探讨脑脊液(CSF)常规检测方法及临床应用。对标本采集、理学检验、化学检查及显微镜检查方法进行分析。为临床提供更多的诊断指标,为中枢神经系统疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及预后观察提供了丰富的信息。 【关键词】脑脊液检验 方法 临床应用
【中图分类号】R445 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)33-0068-02
脑脊液(CSF)是一种细胞外液,主要由各脑室的脉络丛通过血液透析作用而产生,充满脑室系统及脑和脊髓的珠网膜下腔,最后同到血液循环。它的产生和叫流保持着动态平衡,正常成人脑脊液量120~180ml[1]。随着生物化学、免疫学检验技术尤其是分子生物学技术的发展,CSF检验开拓了许多新的研究领域,为临床提供更多的诊断指标,为中枢神经系统疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及预后观察提供了丰富的信息。
1.标本采集
标本采集后应立即送检,化验一般不超过1h。容器要清洁、无菌,容积不应太大。穿刺采集时,尽量避免将血液带入标本。为了不影响细胞汁数,遇高蛋白标本时,可加少量抗凝剂。 2.理学检验标本采集 2.1颜色
正常脑脊液为无色透明。①无色,除正常外,梅毒性神经炎、慢性结核性脑膜炎、脊髓灰白质炎,脑炎等也无色。②红色脑脊液中混入血红细胞所致,由于出血量和出血时间的不同,可呈不同颜色,淡红、红色、红褐色。将脑脊液离心,上层溶液呈黄色,隐血试验阳性多为蛛网膜下腔陈旧性出血,上层液体澄清,无色,红细胞均沉于管底,多为穿刺损伤或病变所致的新鲜出血。③黄色又称黄变症,主要见于珠网膜腔陈旧性出血、椎管梗阻、化脓性脑炎,重症结核性脑膜炎、流行性脑炎、脊髓肿瘤、重症黄疸,某些药物等。④绿色见于绿脓杆菌、肺炎双球菌、甲型链球菌性脑膜炎。⑤乳白色(米汤样)见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎。⑥褐或黑色见于侵犯脑膜黑色素肉瘤。 2.2透明度
正常脑脊液为澄清透明,根据混浊程度可报告为清晰、微混和混浊,脑脊液透明度降低见于乙型脑炎、脊髓灰质炎、脑脓肿等。玻璃样混浊见于结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、霉菌性脑膜炎等。化脓性脑膜炎脑脊液离体后1~2h可凝结,并有沉淀物沉于管底。结核性脑膜炎的脑脊液离体后12~24h可形成薄膜,神经检毒可出现小絮状凝块,但不形成薄膜。 3.显微镜检查 3.1细胞计数
正常情况下,脑脊液中细胞很少,大多为淋巴细胞,粒细胞极少见,不存在红细胞。 3.1.1总细胞计数
如脑脊液清亮,可直接充人细胞计数池内,放置2~3 min,低倍镜下计数,10个大方格内细胞总数即为每微升细胞含量,乘以106即每升脑脊液细胞总数。若标本混浊,可用红细胞稀释液稀释,以后再计数,结果乘以稀释倍数[2]。 3.1.2白细胞计数
如脑脊液清亮,可直接计数,小试管内加冰乙酸2滴,转动试管,使内壁沾有冰乙酸,弃去多余部分,然后滴加混匀脑脊液3~4滴,数分钟后,轻轻转动试管,使其混匀,然后充人计数池内,按总数方法计数白细胞,脑脊液细胞太多或混浊,可用白细胞稀释液稀释后再计数,正常脑脊液白细胞,成人(0~8)×106/L,儿童:(0~15)×106/L。主要是单核细胞,没有中性粒细胞,若超过10×106/L,则有病理意义。
3.1.3白细胞分类计数
直接分类法白细胞计数后,将低倍镜转为高倍镜观察,共计数100个白细胞,分别计算单核与多核细胞,若不足100个,可直接报告单核与多核细胞数。染色分类将脑脊液离心,取沉淀涂片,干燥后瑞氏染色,高倍镜下分类计数。 3.1.4细胞计数临床意义
脑瘤、病毒性脑炎,脑膜炎等白细胞数可正常或稍微增加,脊髓灰质炎、乙型脑炎、神经检毒白细胞可中度增加。结核性脑膜炎白细胞常中度增加或更多,化脓性脑膜炎,脑脓肿等白细胞可高度增加。中性粒细胞增多,见于脑和脑膜的细菌、病毒感染、外伤、出血等。嗜酸性粒细胞增多,见于脑寄生虫病、结核性脑膜炎、病毒性脑炎、异物、淋巴瘤等[3]。淋巴细胞—浆细胞增多,见于中枢神经系统的病毒感染、慢性炎症状、蛛网膜下腔出血、脑瘤等。巨噬细胞增多,见于中枢神经系统的出血,外伤等。 3.2微生物检查
正常情况下,脑脊液中无细菌和真菌。 3.2.1细菌
脑脊液离心沉淀,沉淀物涂片,然后干燥并用火焰固定,革兰染色,油镜下观察,报告时予以描述,如需确诊,需作细菌培养。 3.2.2真菌
离心脑脊液的沉淀涂片,加墨汁1滴,加盖片后镜检,先用低倍镜观察,如发现黑色背景下有圆形透光小点,转高倍镜仔细观察以涂片找到或未找到“隐球菌属”报告之。 4.化学检查
4.1蛋白定性试验
4.1.1潘迪(Pandy)试验
蛋白质可与石碳酸结合成不溶性蛋白盐沉淀,在黑纸上放表面玻皿,盛饱和石碳酸溶液2ml,从边缘加脑脊液1~2滴,然后观察接触部
位的浊度变动,以-、+、++、+++、++++报告之,此法简单易观察,但过于敏感。 4.1.2罗斯-琼斯(Ross-Jones)试验
饱和硫酸铵与球蛋白作用产生沉淀。取饱和硫酸铵溶液0.5ml于小试管内,沿管壁加脑脊液0.5ml,如果出现白色环表示有蛋白质,然后混匀呈半饱和硫酸铵后白色消失,表示无球蛋白,若白色沉淀不消失或更混浊,表示球蛋白阳性,本试验敏感性较Pandy试验弱,但特异性高于后者。 4.2定量试验
参照生物化学的磺基水杨酸-硫酸钠比浊法。
4.2.1正常情况下,腰锥穿刺脑脊液蛋白质为60岁以上老年人,300~600 mg/L;成人150~450mg/L;新生儿200~1 500 mg/L,生后6~12个月达成人水平。
4.2.2脑脊液中蛋白含量增高 ①中枢神经系统炎症如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎等:蛋白质升高明显,病毒性脑炎,蛋白轻度升高;②神经根病变如多发性神经根神经炎,出现蛋白升高,而细胞正常或接近正常的蛋白细胞分离观察;③椎管梗阻如脊髓肿瘤、肉芽肿、硬膜外脓肿、脊椎结核,椎间盘突出等;④颅内显位如脑瘤、脑脓肿、肉芽肿、血肿等;⑤代谢障碍如尿毒症、黏液水肿、糖尿病、艾迪生(Addison)病等;⑥血性脑脊液。 4.3葡萄糖检验
脑脊液葡萄糖正常参考值:成人2.5~4.5 mmol/L;儿童2.8~4.5 mmol/L。脑脊液糖含量降低:多见于化脓性脑膜炎,结核和霉菌性脑膜炎等,脑寄生虫病、肿瘤等也使糖含量降低。脑脊液糖含量增高:见于糖尿病、脑或蛛网膜下腔出血,病毒感染、精神分裂症、下丘脑损害等。
4.4氯化物定量测定
脑脊液中氯化物含量高于血中氯化物。 4.4.1 正常情况下脑脊液中氯化物浓度
成人120~130 mmol/L;儿童111~123 mmol/L;婴儿110~130 mmol/L。 4.4.2脑脊液氯化物定量测定
参照生物化学的硝酸汞滴定法和电极法。 4.4.3脑脊液氯化物升高
见于尿毒症、脱水、心力衰竭、肾炎、脊髓腔肿物等;降低见于结核性脑膜炎、化脓性脑膜炎、霉菌性脑膜炎、严重糖尿病、Addison病、长期饥饿等。 参考文献
[1]丛玉隆.体液学检查进展[J].中华医学检验杂志.1999.22(4):1.
[2]粟秀初,孔繁元.神经系统临床脑脊液细胞学.北京:人民军医出版社,2001.(2)26:32. [3] 杨期东.神经病学.北京:人民卫生出版社,2002.2:82.
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