生化实验思考题

思考题

实验： 糖的颜色反应、蛋白质及氨基酸的呈色反应 P52

1、鉴别蛋白质的方法有哪些？简述其原理。 （1）.灼烧产生烧焦羽毛的气味是蛋白质。

（2.）遇浓HNO3变性产生黄色不溶物是蛋白质。 原理：蛋白质中含有苯环的氨基酸遇硝酸硝化。

（3.）磨浆过滤，取滤液，先加NaOH，再加入双缩脲试剂，出现紫色反应，就为蛋白质。 原理：铜离子在碱性条件下与两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键发生反应，生成紫色络合物。

2、能否利用茚三酮反应可靠鉴定蛋白质的存在？为什么？ 不能，和茚三酮反应的除了蛋白质外还有胺和氨基酸类等，它不是蛋白质的专一试剂。 实验：蛋白质沉淀反应 P54

1、用蛋清作为铅或汞中毒的解毒剂的依据是什么？ 铅和汞是重金属，会使蛋白质变性，而人体组织中蛋白质是必不可少的组成成分，比如胃、食道等组织。误服铅或汞后，吞入大量鸡蛋清（鸡蛋清中含有大量蛋白质），可使铅与汞先与蛋清反应，减少与机体组织的接触，进而减轻毒性。 2、在蛋白质的沉淀反应里，哪些是可逆的，哪些是不可逆的？ 不可逆：重金属盐沉淀蛋白质，乙醇沉淀蛋白质，生物碱试剂沉淀蛋白质。 可逆：蛋白质盐析作用。 实验：卵磷脂的提取和鉴定 P30

1、卵磷脂提取的过程中，加入热95%的乙醇的作用是什么？ 增加溶解度 2、卵磷脂的生物学功能有哪些？ 是生物膜的重要组成成分；促进脂肪代谢，防止出现脂肪肝；促进体内转甲基代谢的顺利进行；具有免疫调节功能；促进神经传达。 实验：酵母RNA的提取与鉴定 P126

1、加热提取RNA后为什么要加乙酸中和至微酸性？乙酸能不能多加？为什么？.

加热后中和至微酸性可以除去蛋白质、多糖等杂质，不能多加，否则RNA会酸水解。 2、加乙酸后进行离心分离，上清液及沉淀物中各主要含什么物质？

上清液主要为RNA，沉淀物中主要含蛋白质、多糖等杂质。 3、除了稀碱法外，还有没有其他提取RNA的方法？他们各有何优缺点？

1、苯酚法；2、去污剂法、3、盐酸胍法。 优缺点不详。

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4、本实验为何选用酵母作为提取原料？在分离纯化的实验选材上应遵循哪些原则？ 从选材上来说，由于微生物生长繁殖速度快、代谢旺盛，且原料较易获得，常被用作提取核酸的原料。本实验选用酵母作为生产材料，基于以下两方面的原因：（1）酵母细胞富含核酸，且RNA含量丰富，为菌体干重的2.67%~10.0%，而DNA含量较少，仅为0.03%~0.516%。（2）材料易获得，成本较低。 实验选材上需把握以下几个原则：（1）材料所含分离纯化的目标物要丰富；（2）材料要容易获得；（3）由该材料所设计出的分离纯化方法要简便可行且适于工业化大规模流水线生产；（4）综合成本要降到最低，以谋求最大利润。

实验：发酵过程中的中间产物鉴定 （百度不到) 1、试管为什么要放于冰浴中冷却？

2、硝普酸钠试验为什么要加硫酸铵？ 3、试验过程中要注意哪些事项？

实验：醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质 P98 没思考题

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