食管鳞状细胞癌组织中hsa-miRNA-133a的表达变化及意义

山东医药２０１３年第５３卷第１８期　食管鳞状细胞癌组织中ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一１３３ａ的　表达变化及意义　赵一奇　，谢晖　，吴钦良　，鲍子超　，赵亚萍　，杨如松　（１中国人民解放军第８２医院，江苏淮安２２３００１；２东南大学医学院）　摘要：目的观察ｈｓａ．ｍｉＲＮＡ一１３３ａ在食管鳞状细胞癌组织中的表达变化，探讨其与食管鳞状细胞癌临床病理　参数的关系。方法采用ｍｉＲＮＡ流体芯片技术和Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ　ＰＣＲ法检测食管鳞状细胞癌及癌旁组织中的ｈｓａ—ｍｉＲ—　ＮＡ一１３３ａ，分析ｈｓａ．ｍｉＲＮＡ．１３３ａ的表达与食管鳞状细胞癌临床病理参数的关系。结果ｈｓａ－ｍｉＲＮＡ一１３３ａ在食管鳞　状细胞癌组织中的表达显著低于癌旁组织（Ｐ＜０．０５），低分化者肿瘤组织中ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一１３３ａ的表达低于中高分化　者，肿瘤浸润至肌层、外膜者肿瘤组织中ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一１３３ａ的表达低于肿瘤位于黏膜内者（Ｐ均＜０．０５）；ｈｓａ－ｍｉＲＮＡ一　１３３ａ在不同肿瘤直径及有无淋巴结转移者中的表达差异无统计学意义（Ｐ均＞０．０５）。结论ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一１３３ａ在　食管鳞状细胞癌组织中呈低表达，可能与食管鳞状细胞癌的发生发展有关。　关键词：微小ＲＮＡ；ｈｓａ・ｍｉＲＮＡ・１３３ａ；食管肿瘤；食管鳞状细胞癌　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－２６６Ｘ．２０１３．１８．００６　中图分类号：Ｒ７３５．１　文献标志码：Ａ　文章编号：１００２－２６６Ｘ（２０１３）１８－００１９－０３　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｓａ－ｍｉＲＮＡ一１　３３ａ　ｉｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ＺＨＡＯ　Ｙｉ—ｑｉ　，ＸＩＥ　Ｈｕｉ，删Ｑｉｎ－ｌｉａｎｇ，ＢＡＯ　Ｚｉ—ｃｈａｏ，ＺＨＡＯ　Ｙａ－ｐｉｎｇ，ＹＡＮＧ　Ｒｕ—ｓｏｎｇ　（１　８２ｔｈ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｔｈｅ　Ｐｅｏｐｌｅ　ｓ　Ｌｉｂｅｒａｔｉｏｎ　Ａｒｍｙ，Ｈｕａｉ　ａｎ　２２３００１，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｓａ・－ｍｉＲＮＡ－－１３３ａ　ｉｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａｎｄ　ｔｏ　ｉｎ－－　ｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｉｔｓ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏ　ｃａｌ　ｐ￣ａｍｅｔｅｍ．　Ｍｅｔｈｏｄ　ｍｉＲＮＡ　ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ　ｃｈｉｐ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ　ＰＣＲ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｓａ．ｍｉＲＮＡ一１３３ａ　ｉｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌ１　ｃａｒｃｉｎｏｍａ．ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅ－　ｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｓａ－ｍｉＲＮＡ一１３３ａ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ．　Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一１３３ａ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｉｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ　ａｄｊａｃｅｎｔ　ｔｉｓｓｕｅ，ｗｉｔｈ　ｓｔａｔｉｓｔｉ－　ｅｌａｌｙ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）．Ｌｏｗ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一１３３ａ　ｗｅｒｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃａｎｃｅｒ　ｉｎｖａｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｕｍｏｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ（Ｐ＜０．０５），ｂｕｔ　ｎｏｔ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｕｍｏｒ　ｓｉｚｅ　ａｎｄ　ｌｙｍｐｈ　ｎｏｄｅ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ（ａｌｌ　Ｐ＞０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕ—　ｓｉｏｎ　Ｈｓａ－ｍｉＲＮＡ．１３３ａ　ｓｈｏｗｓ　ｌｏｗ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ｗｈｉｃｈ　ｍａｙ　ｂｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃ￣ｃｉｎｏｍａ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｍｉｃｒｏＲＮＡ；ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一１３３ａ；ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｎｅｏｐｌａｓｍｓ；ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　微小ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）是一类长为１９—２５个核苷　１资料和方法　酸的内源性非编码小分子单链ＲＮＡ，调控着体内多　１．１　临床资料行食管癌切除加周围淋巴结清扫　种生理进程，如早期胚胎发育、细胞增殖、细胞凋亡。　术的ＥＳＣＣ患者３４例，男２７例，女７例，年龄４９—　研究发现，ｍｉＲＮＡ兼有类似癌基因及抑癌基因的作　７３岁。病理检查示肿瘤位于黏膜层内３例，浸润至　用，在肿瘤的发生发展中起重要作用　。食管癌　肌层３０例，浸润至外膜１例。其中８例伴有淋巴结　（ＥＣ）是我国常见的恶性肿瘤之一＿２ｊ，而食管鳞状细　转移。患者均未经放化疗。取术中切除的肿瘤组织　胞癌（ＥＳＣＣ）是食管癌的主要病理类型　Ｊ。２０１２年　（ＥＳＣＣ组）以及癌旁正常组织（距肿瘤组织５　ａｍ，对　１～１２月，本研究观察了ＥＳＣＣ组织中ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一　照组），迅速置于液氮中保存，用于后续的检测。　１　３３　ａ的表达变化，现分析结果并探讨其意义。　１．２　ｍｉＲＮＡ微阵列分析采用流体芯片技术检测　基金项目：江苏省自然科学基金面上研究项目（ＢＫ２０１２６６６）。　作者简介：赵一奇（１９７４一），男，主治医师，研究方向为胸部肿瘤。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｏｙｑ１２３１＠１２６．ｃｏｒｎ　通讯作者：杨如松（１９６９一），男，副主任医师，研究方向为胸部肿瘤及胸部疾病的微创手术治疗。Ｅ—ｍａｉｌ：ｎｊｙｒｓ—ｏｒｄ＠１８８．ｃｏｒｎ　１９　３例浸润至深肌层的髓质型ＥＳＣＣ癌组织及癌旁组　织中的ｍｉＲＮＡ。首先提取ＥＳＣＣ癌组织以及癌旁组　织的总ＲＮＡ。紫外分光光度仪测定总ＲＮＡ浓度与　纯度，使Ａ２６０／Ａ２８０值在１．８～２．０。甲醛变性电泳　及Ａｇｉｌｅｎｔ　２１００　Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ芯片分析系统进行ＲＮＡ　完整性分析。取２—５　ｇ总ＲＮＡ样品，通过ＹＭ一　１００超滤管（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司）微离心过滤柱分离得到　小ＲＮＡ（＜３００　ｎｔ）。使用Ｐｏｌｙ（Ａ）聚合酶在分离到　的小ＲＮＡ　３　端加上Ｐｏｌｙ（Ａ）尾，再将１个寡聚核苷　酸标记与此Ｐｏｌｙ（Ａ）尾连接用于后续的荧光标记　Ｃｙ５荧光染料。激光扫描仪（ＧｅｎｅＰｉｘ　４０００Ｂ，Ｍｏ—　ｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｖｉｃｅ）采集杂交图像并用Ａｒｒａｙ．Ｐｒｏ图像分　析软件（Ｍｅｄｉａ　Ｃｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ公司）进行图像数字化转　换。数据分析首先减除背景值，然后使用局部加权　回归分析（ＬＯＷＥＳＳ）进行信号归一化。　１．３　ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ．１３３ａ表达检测　采用Ｔｒｉｚｏｌ法提　取组织总ＲＮＡ，根据试剂盒说明书操作步骤进行逆　转录，采用Ｒｅａ１．ｔｉｍｅ　ＰＣＲ技术检测两组中的ｈｓａ－　ｍｉＲＮＡ－１３３ａ。扩增反应于ＡＢＩ　７５００　ＰＣＲ仪中进　行。反应条件：５０℃，２　ｍｉｎ；９５℃，２　ｍｉｎ，然后９４　℃，１５　ｓ，６０℃，６０　Ｓ，共４０个循环。选择ｕ６为内参　照，用２‘△　方法计算ｈｓａ．ｍｉＲＮＡ．１３３ａ的相对表达　量。　１．４统计学方法采用ＳＰＳＳ１７．０统计软件进行数　据处理。计量数据以　±ｓ表示，数据比较采用ｔ检　验。Ｐ≤Ｏ．０５为差异具有统计学意义。　２　结果　２．１　ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ．１３３ａ的表达流体芯片技术检测　结果表明，３例肿瘤浸润至深肌层的ＥＳＣＣ及其癌　旁组织中，发现共有６２条ｍｉＲＮＡ差异表达于ＥＳＣＣ　癌组织及癌旁组织，其中２９条ｍｉＲＮＡ在ＥＳＣＣ组　织中高表达，３３条ｍｉＲＮＡ低表达。癌组织与癌旁　组织相差４倍以上且信号强度＞５００的ｍｉＲＮＡ共　有１２条；ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一１３３ａ在ＥＳＣＣ组中的表达水平　明显低于对照组，相差２８．８４倍。进一步采用Ｒｅａｌ—　ｔｉｍｅ　ＰＣＲ技术检测两组ｈｓａ．ｍｉＲＮＡ一１３３ａ的表达，　ＥＳＣＣ组ｈｓａ－ｍｉＲＮＡ一１３３ａ的相对表达量为０．２８±　０．４１，对照组为０．９７±１．１５，ＥＳＣＣ组低于对照组（Ｐ　＜０．０１）。　２．２　ｈｓａ－ｍｉＲＮＡ一１３３ａ表达与ＥＳＣＣ临床病理参数　的关系　低分化者肿瘤组织中ｈｓａ．ｍｉＲＮＡ一１３３ａ的　相对表达量低于中高分化者，肿瘤浸润至肌层、外膜　者ＥＳＣＣ组织中ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ．１３３ａ的表达低于肿瘤　位于黏膜内者（Ｐ均＜０．０５）。见表１。　３讨论　２０　山东医药２０１３年第５３卷第１８期　表１　ｈｓａ－ｍｉＲＮＡ－１３３ａ表达与ＥＳＣＣ临床病理参数的关系　ｍｉＲＮＡ作为转录后水平调控基因表达的关键　因子，对肿瘤发生发展具有重要作用　Ｊ。近年来，　研究发现ｈｓａ．ｍｉＲＮＡ．１３３ａ与肿瘤有密切关系，在膀　胱癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、头颈鳞状细胞癌、回　肠类癌、横纹肌肉瘤等肿瘤中的表达均下调　；　日本学者¨　研究该国ＥＳＣＣ患者也发现包括ｍｉＲ—　ＮＡ．１３３ａ在内的１５种ｍｉＲＮＡ表达下调。通过对多　种肿瘤研究发现，ｍｉＲＮＡ一１３３ａ作为一种类似抑癌基　因，可通过调节靶基因ＦＳＣＮ１、ＣＡＶ１、ＣＤ　、ＥＧＦＲ　抑制肿瘤细胞的增殖、浸润从而抑制肿瘤的形成和　进展。其中ＦＳＣＮ１功能损失显著抑制细胞的生长　和侵袭，是ＥＳＣＣ致癌基因；ＣＤ　分子是一种高度糖　基化的自身膜表面抗原分子，与细胞外基质蛋白和　配体相互作用参与调节免疫系统，一些肿瘤细胞表　达ＣＤ　分子，抑制机体吞噬细胞功能、逃逸免疫系　统的免疫监视；ＥＦＧＲ为内皮细胞生长因子受体，与　肿瘤血管的形成有关　。　本研究选取了３例肿瘤浸润至深肌层的髓质型　ＥＳＣＣ组织，采用ｍｉＲＮＡ流体芯片技术进行检测发　现，ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ．１３３ａ在ＥＳＣＣ组织中的表达水平明　显低于癌旁组织，Ｒｅａ１．ｔｉｍｅ　ＰＣＲ检测得出相似的结　果。与传统的Ｎｏｒｔｈｅｎｒ印迹技术和ＰＣＲ相比，本研　究最初采用的高通量芯片能更快、更简便、更多的筛　选出实验需要的ｍｉＲＮＡ，为后续的研究节省时间，　这也成为目前ｍｉＲＮＡ相关研究的一个趋势　Ｍ　。　本研究发现，肿瘤浸润至肌层外膜者ＥＳＣＣ组织中　ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一１３３ａ表达低于肿瘤位于黏膜内者。Ｍａ．　ｓａｙｕｋｉ等¨　在ＥＳＣＣ体外细胞实验也证实ｍｉＲＮＡ．　１３３ａ可通过作用于靶基因ＦＳＣＮ１抑制肿瘤的生长　和浸润，ｈｓａ．ｍｉＲＮＡ．１３３ａ的表达与肿瘤的浸润有　关。ＥＳＣＣ是高度恶性的消化道肿瘤，其转移发生　较早，且淋巴结转移是其转移的重要途径　。ｓｕ－　ｚｕｋｉ等　研究发现ＥＳＣＣ中ｍｉＲＮＡ－１３３ａ的靶基因　ＣＤ　与淋巴节转移有关。而本研究发现，在有淋巴　山东医药２０１３年第５３卷第ｌ８　结转移者中ｈｓａ．ｍｉＲＮＡ一１３３ａ表达略低于无淋巴结　ＦＳＣＮ１　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｂｌａｄｄｅｒ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｂｒ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，２０１０，１０２　（５）：８８３－８９１．　转移者，但差异无统计学意义，究其原因可能是患者　肿瘤组织中微环境较为复杂，影响了ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ－　１３３ａ的表达结果；另一原因可能是有淋巴结转移的　ＥＳＣＣ标本数较少。　综上所述，本研究证实ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ一１３３ａ在ＥＳ—　ＣＣ中表达下调，这种低表达可能与ＥＳＣＣ的发生发　展有关，ｈｓａ—ｍｉＲＮＡ．１３３ａ有望作为ＥＳＣＣ临床诊断　和预后的生物学指标。　［８］Ｎｏｈａｔａ　Ｎ，Ｈａｎａｚａｗａ　Ｔ，Ｋｉｋｋａｗａ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ｃａｖｅｏｌｉｎ一１　ｍｅｄｉａｔｅｓ　ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌｌ　ｍｉｇｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｖａｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｍｉＲＮＡ一　１３３ａ　ｉｎ　ｈｅａｄ　ｎｄ　ｎｅｃｋ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌａｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｏｎｃｏｌ，　２０１１，３８（１）：２０９－２１７．　［９］Ｗｕ　ＺＳ，Ｗａｎｇ　ＣＱ，Ｘｉａｎｇ　Ｒ，ｅｔ　１ａ．Ｌｏｓｓ　ｏｆ　ｍｉＲ一１３３ａ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｐｏｏｒ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｏｆ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ａｎｄ　ｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉＲ－１３３ａ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｉｎｖａ－　ｓｉｏｎ［ｊ］．ＢＭＣ　Ｃａｎｃｅｒ，２０１２，１２：５１．　［１０］Ｒｕｅｂｅｌ　Ｋ，Ｌｅｏｎｔｏｖｉｃｈ　ＡＡ，Ｓｔｉｌｌｉｎｇ　ＧＡ，ｅｔ　ａ１．ＭｉｃｒｏＲＮＡ　ｅｘｐｒｅｓ—　参考文献：　ｓｉｏｎ　ｉｎ　ｉｌｅａｌ　ｅａｒｃｉｎｏｉｄ　ｔｕｍｏｒｓ：ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｅｒｏＲＮＡ一１３３ａ　［１］Ｅｓｑｕｅｌａ－Ｋｅｒｓｃｈｅｒ　Ａ，Ｓｌａｃｋ　ＦＪ．ＯｎｃｏｍｉＲＮＡｓ・ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｗｉｔｈ　ａ　ｗｉｔｈ　ｔｕｍｏｒ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｍｏｄ　Ｐａｔｈｏｌ，２０１０，２３（３）：３６７－３７５．　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｃａｎｃｅｒ，２００６，６（４）：２５９－２６９．　［１１］Ｒａｏ　ＰＫ，Ｍｉｓｓｉａｇｌｉａ　Ｅ，Ｓｈｉｅｌｄｓ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｓｔｉｎｃｔ　ｒｏｌｅｓ　ｆｏｒ　ｍｉＲ一１　［２］Ｐａｒｋｉｎ　ＤＭ，Ｂｒａｙ　Ｆ，Ｆｅｄａｙ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｗｏｒｌｄ　ｃａｎｃｅｒ　ｎａｄ　ｍｉＲ－－１３３ａ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｈａｂｄｏｍｙｏ－・　ｂｕｒｄｅｎ：Ｇｌｏｂｏｃａｎ　２ＯＯＯ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，２００１，９４（２）：１５３・１５６．　ｓａｒｃｏｍａ　ｃａｌｌｓ［Ｊ］．ＦＡＳＥＢ　Ｊ，２０１０，２４（９）：３４２７－３４３７．　［３］Ｚｈａｎｇ　Ｗ，Ｂａｉｌｅｙ・Ｗｉｌｓｏｎ　ＪＥ，Ｌｉ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　［１２］Ｍａｓａｙｕｋｉ　Ｋ，Ｎａｏｈｉｋｏ　Ｓ，Ｎａｏｋｏ　Ｋ．ｍｉＲＮＡ－１４５，ｍｉＲＮＡ一１３３ａ　ｎａｄ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｉｎ　ａ　ｍｏｄｅｒａｔｅｌｙ　ｈｉｇｈ—ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ａｒｅａ　ｏｆ　ｎｏｒｔｈｅｒｎ　ｍｉＲＮＡ一１３３ｂ：ｔｕｍｏｒ—ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ　ｍｉＲＮＡＮＡｓ　ｔａｒｇｅｔ　ＦＳＣＮ１　ｉｎ　ｅ—　Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ａｍ　Ｊ　Ｈｕｍ　Ｇｅｎｅｔ，２０００，６７（１）：１１０—１１９．　ｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃａｎｃｅｒ，２０１０，１２７　［４］Ｖａｌｉｎｉａ　Ｓ，Ｃａｌｉｎ　ＧＡ，Ｌｉｕ　ＣＧ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｍｉｃｒｏＲＮＡ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｓｉｇ—　（１２）：２８０４－２８１４．　ｎａｔｕｒｅ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｓｏｌｉｄ　ｔｕｍｏｒｓ　ｄｅｆｉｎｅｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｇｅｎｅ　ｔａｒｇｅｔｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ　［１３］Ｙｉｎｇｑｉｎｇ　ｓ，Ｓｅｏｎ￣ｏｏｎＫ，ＮｅｉｌｌＷ，ｅｔａ１．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ａｍｉｃｒｏ—　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ，２００６，１０３（７）：２２５７－２２６１．　ａｒｒａｙ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｈｕｍａｎ　ａｎｄ　ｍｏｕｓｅ　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　［５］Ｃｈｅｎ　ＷＳ，Ｌｅｕｎｇ　ＣＭ，Ｐａｎ　ＨＷ，ｅｔ　ａ１．Ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ　ｏｆ　ｍｉＲＮＡ－１—１　ｏｆ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｏｒｇａｎｓ［Ｊ］．Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓ，２００４，３２　ａｎｄ　ｍｉＲＮＡ一１３３ａ－２　ｃｌｕｓｔｅｒ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｂｙ　ＤＮＡ　ｈｙｐｅｒｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　（２２）：２４８６－２４９４．　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒＥＪ］．Ｏｎｅｏｌ　Ｒｅｐ，２０１２，２８（３）：１０６９・１０７６．　［１４］Ｃａｉｆｕ　Ｃ，Ｋｅｌｌｙ　Ｍ，Ａｄａ　ＨＷ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ　ＰＣＲ：Ａｄｖａｎｃｉｎｇ　［６］Ｓｕｚｕｋｉ　Ｓ，Ｙｏｋｏｂｏｒｉ　Ｔ，Ｔａｎａｋａ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．ＣＤ４７　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ＲＮＡ　Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ　ａｎｄ　ＭｉｃｒｏＲＮＡ　Ｓｔｕｄｉｅｓ［Ｊ］．Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓ，　ｂｙ　ｔｈｅ　ｍｉＲＮＡ一１３３ａ　ｔｕｍｏｒ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　ｉｓ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ　ｍａｒｋｅｒ　２００４，３２（２２）：ｅ１８８．　ｉｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．Ｏｎｅｏｌ　Ｒｅｐ，２０１２，２８　［１５］陈传贵，唐鹏，于振涛．ＨＭＧＢ１在食管鳞癌中的表达及其意义　（２）：４６５－４７２．　　．［Ｊ］．中国肿瘤ｌ临床，２０１０，３７（１１）：６１９￣２２．　［７］Ｃｈｉｙｏｍａｍ　Ｔ，Ｅｎｏｋｉｄａ　Ｈ，Ｔａｔａｒａｎｏ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．ｍｉＲＮＡ一１４５　ａｎｄ　（收稿日期：２０１３－０３－２８）　ｍｉＲＮＡ一１３３ａ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｓ　ｔｕｍｏｕｒ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｓ　ａｎｄ　ｄｉｒｅｃｔｌｙ　ｒｅｇｕｌａｔｅ　・告读者・　《山东医药》对医学名词及术语的一般要求　医学名词应使用全国科学技术名词审定委员会公布的名词。中医临床诊疗术语、经穴部位、耳穴名称与　部位等应遵循相应的国家标准。对于没有通用译名的名词术语，在文内第一次出现时应注明原词。中西药　名以最新版《中华人民共和国药典》和《中国药品通用名称》（均由中国药典委员会编写）为准。英文药物名　称则采用国际非专利药名。在题名及正文中药名一般不得使用商品名，确需使用商品名时应先注明其通用　名称。冠以外国人名的体征、病名、试验、综合征等，人名可以用中译文，但人名后不加“氏”（单字名除外，例　如福氏杆菌）；也可以用外文，但人名后不加“　ｓ’。文中尽量少用缩略语。已被公知公认的缩略语可以不加　注释直接使用，例如：ＤＮＡ、ＲＮＡ、ＨＢｓＡｇ、ＰＣＲ、ｃＴ、ＭＲＩ等。不常用的、尚未被公知公认的缩略语与一级原词　过长在文中多次出现者，若为中文可于文中第一次出现时写出全称，在圆括号内写出缩略语；若为外文可于　文中第一次出现时写出中文全称，在圆括号内写出缩略语。不超过４个汉字的名词不宜使用缩略语，以免影　响论文的可读性。西文缩略语不得拆开移行。　２１