番木瓜环斑病相关基因表达分析

２０１７年第２期　东南园艺　５　番木瓜环斑病相关基因表达分析　丘伟劲　，　刘　静　，　周　平　，。　明瑞光　（　福建农林大学园艺学院，福建福州３５￣２；　福建农林大学海峡联合研究院基因组与生物技术研究中心。　福建福州３５０００２；。福建省农业科学院果树研究所。福建福州３５００１３）　摘　要：番木瓜环斑病毒（ＰＲＳＶ）对全球的番木瓜产业造成了严重的损害，ＰＲＳＶ如何在基因层面影响番木瓜　目前还不是十分清楚。本研究对未感染和感染ＰＲＳＶ的番木瓜叶片中与植物病毒相关基因进行Ｑ—ＰＣＲ分析与比　较，以探究ＰＲＳＶ影响番木瓜的生长发育的原因。结果表明，ＰＲＳＶ通过抑制　船、ＷＲＫＹ、ＥＲＦ等转录因子和　ＣＡ２、ＰＤＲ等转运蛋白的表达，进而影响番木瓜的生长发育。　关键词：番木瓜；环斑病毒；Ｑ—ＰＣＲ；基因　中图分类号：￥６６７．９　文献标识码：Ａ　文章编号：２０９５—５７７４（２０１７）０２—０００５—０４　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｇｅｎｅ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　Ｐａｐａｙａ　Ｒｉｎｇｓｐｏｔ　Ｖｉｒｕｓ　ＱｉＵ　Ｗｅｉ－ｊｉｎｇ　・　ＬＩＵ　Ｊｉｎｇ‘＇　ＺＨＯＵ　Ｐｉｎｇ　・　ＭＩＮＧ　Ｒｕｉ－ｇｕａｎｇ２’　（　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＦｕｊｉａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ　３５０００２，Ｆｕｊｉａｎ　Ｃｈｉｎａ；　Ｇｅｎｏｍｅ　ａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ，ＦｕｊｉａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄＦｏｒｅｓｔｙＵｎｉｒｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ　３５０００２，ＦｕｊｉａｎＣｈｉｎａ；　ＦｒｕｉｔＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＦｕｊｉａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｆｕｚｈｏｕ　３５００１３，ＦｕｊｉａｎＣｈｉａ）　ｎＡｂｓｔｒａｃｔ：Ｐａｐａｙａ　ｒｉｎｇｓｐｏｔ　ｖｉｒｕｓ（ＰＲＳＶ）ｈａｓ　ｃａｕｓｅｄ　ｓｅｒｉｏｕｓ　ｄａｍａｇｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐａｐａｙａ　ｉｎｄｕｓｔｒｙ　ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ．Ｉｔ　ｉｓ　ｎｏｔ　ｃｌｅａｒ　ｈｏｗ　ＰＲＳＶ　ａｆｆｅｃｔｓ　ｐａｐａｙａ　ａｔ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｌｅｖｅ１．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ，ｗｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ａｎｄ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｇｅｎｅｓ　ｂｙ　Ｑ—ＰＣＲ　ｉｎ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　ＳＳ　—ＰＲＳＶ　ａｎｄ　ＳＳ—ＮＰ　ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｒｅａｓｏｎ　ｗｈｙ　ＰＲＳＶ　ａｆｅｃｔｅｄ　ｐａｐａｙａ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ＰＲＳＶ　，ＷＲＫＹ，　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｐａｐａｙａ　ｂｙ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｓｕｃｈ　ａｓ　ＥＲＦ　ａｎｄ　ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｓｕｃｈ　ａ８　ＣＡ２　ａｎｄ　ＰＤＲ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐａｐａｙａ；Ｐａｐａｙａ　ｒｉｎｇｓｐｏｔ　ｖｉｒｕｓ；Ｑ—ＰＣＲ；Ｇｅｎｅ　缩写词：　ＳＳ—ＰＲＳＶ：ＰＲＳＶ—ｐｏｓｉｔｖｅ‘Ｓｕｎｓｅｔ’。经ＲＴ—ＰＣＲ检测，感染番木瓜环斑病毒的番木瓜品种“Ｓｕｎｓｅｔ”；　ｓｓ—ＮＰ：ＰＲＳＶ—ｎｅｇａｔｉｖｅ‘Ｓｕｎｓｅｔ’。经ＲＴ—ＰＣＲ检测，未感染病毒番木瓜品种“Ｓｕｎｓｅｔ”；　Ｑ—ＰＣＲ：实时定量ＰＣＲ；　ＲＮＡ—ｓｅｑ：转录组测序技术；　ＦＰＫＭ：每一百万个的序列中比对到外显子的序列个数，即通过ＲＮＡ—ｓｅｑ技术来衡量基因的表达量的参数。　番木瓜（Ｃａｒ／ｃａ　ｐａｐａｙａ　Ｌ．）作为一种重要的经济果树，广泛分布在热带和亚热带地区。而番木瓜环斑　病毒（Ｐａｐａｙａ　Ｒｉｎｇｓｐｏｔ　Ｖｉｒｕｓ，ＰＲＳＶ）是对全年生产的番木瓜最重要的一种病害，严重制约其产业发展。　ＰＲＳＶ是一种单链正义ＲＮＡ病毒，属于马铃薯Ｙ病毒科马铃薯Ｙ病毒属　。ＰＲＳＶ可以通过蚜虫和机械等　收稿日期：２０１７—０３一Ｏ１　作者简介：丘伟劲（１９９１一），男，硕士研究生，从事番木瓜、菠萝等植物基因组研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｈａｔｔｉｍｅｗｊ＠１２６．ｃｏｍ　通讯作者：明瑞光（１９６５一），男，教授，博士生导师，从事番木瓜、菠萝等植物基因组研究。Ｅ—ｍａｉｌ：ｔｕｒｉｎｇ＠　ｌｉｆｅ．ｉｌｌｉｎｏｉｓ．ｅｄｕ　６　东南园艺　２０１７年第２期　非持久传染方式传播，并且由于番木瓜缺乏天然抗性基因而难以控制［２　］。　本研究前期以ＳＳ—ＰＲＳＶ和ＳＳ—ＮＰ为材料，通过转录组测序，寻找差异表达基因，并进行ＧＯ功能富　集以及Ｐａｔｈｗａｙ功能富集分析。研究发现在受ＰＲＳＶ感染的番木瓜中，体内一些转录因子和转运蛋白表达　下调，预测ＰＲＳＶ的感染影响番木瓜生长发育和防御机制。在此基础上，本研究以相同ＳＳ－ＰＲＳＶ和ＳＳ－ＮＰ　叶片为试材，采用Ｑ—ＰＣＲ技术，检测候选差异基因的表达，并验证前期工作的准确性。研究结果可为揭　示ＰＲＳＶ对番木瓜生长发育的影响在分子生物学层面提供理论依据。　１材料与方法　１．１材料　本研究使用的ＳＳ—ＰＲＳＶ和ｓｓ—ＮＰ材料分别种植于福建省诏安县木瓜基地（东经１１７．６。，北纬　２３．７３。）和福建省福州市福建农林大学大田。每个样品随机选取３株生长健壮、长势一致的番木瓜植株，　提取其健康嫩叶的总ＲＮＡ。所有备选植株都通过反转录ＰＣＲ鉴定证明其是否为感病植株。每个样品设３个　生物学重复。　１．２　ｃＤＮＡ合成与Ｑ—ＰＣＲ方法　根据前期结果，本研究选取了９个与植物生长发育相关基因（表１），用Ｑ—ＰＣＲ验证它们的表达模式　与转录组测序分析结果的一致性。取１　１经ＤＮａｓｅ　Ｉ处理过的ＲＮＡ样品，参照Ｔａｋａｒａ的Ｐｒｉｍｅ　Ｓｃｒｉｐｔ　ＴＭｌｓｔ　Ｓｔｒａｎｄ　ｃＤＮＡ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　Ｋｉｔ操作说明书，将ＲＮＡ反转录合成ｃＤＮＡ第１链，用１．５％琼脂糖凝胶电泳检测质　量。利用在线工具ＩＤＴＳｃｉＴｏｏｌｓ◎Ｗｅｂ　Ｔｏｏｌｓ＿４］设计Ｑ－ＰＣＲ特异性引物，引物序列信息详见附表（表１）。　定量ＰＣＲ反应体系总体积为２０　ｌ，包括１０１ｘｌ　２×ＳＹＢＲ◎Ｇｒｅｅｎ　Ｉ　Ｍａｓｔｅｒ　Ｍｉｘ，各０．４　ｔｘｍｏｌ・Ｌ　的正反向　引物，１　１已稀释十倍的ｃＤＮＡ模板，最后补ｄｄＨ　Ｏ至２０　ｌ。将反应液混匀后，置于ＣＦＸ　Ｃｏｎｎｅｃｔ　Ｒｅａｌ—　Ｔｉｍｅ　Ｓｙｓｔｅｍ实时荧光定量ＰＣＲ仪上进行扩增。设置扩增步骤如下：第１步预变性９５￣Ｃ　３０　ｓ：第２步ＰＣＲ　循环，９５℃５　Ｓ，６０￣Ｃ　３０　Ｓ，共４２个循环；第３步，溶解曲线。选择ＥＩＦ４Ａ（Ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ　ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　４Ａ）　］作为内参基因，用２。△　的方法计算每个基因的相对表达量　。为减少同个品种样品之间的误差．　每个基因各设置３个技术重复。　表１　Ｑ—ＰＣＲ引物列表　２０１７年第２期　东南园艺　７　２结果与分析　本研究选取的９个与植物生长发育的基因。用Ｑ—ＰＣＲ来验证它们在ＳＳ—ＰＲＳＶ和Ｓｓ—ＮＰ间的表达差异　和表达模式是否与转录组测序结果相符。ＲＮＡ—Ｓｅｑ分析结果预测的ＦＰＫＭ值和在Ｑ－ＰＣＲ结果的相对表达　量（表２），可以发现这些与植物防御系统相关的基因都在ＳＳ—ＰＲＳＶ中表达下调。尽管这些基因通过ＲＮＡ　—Ｓｅｑ技术和Ｑ—ＰＣＲ试验得到的样本间表达量差异倍数变化值（Ｆｏｌｄ—ｃｈａｎｇｅｓ）不太一致，但是它们在２种　技术分析中都呈现出一致的表达模式，即基因的上下调趋势一致（图１）。此结果表明，基于Ｑ－ＰＣＲ和　ＲＮＡ—Ｓｅｑ分析的２种表达模式高度一致。　一　＇Ｏ　●　呈　８　：　ｅ　４　２　Ｏ　脚圉　圉　困圉　目　圉　目　目　冒　目圉　７ｒ　ＷＲＫＹ　ＣＡ２　Ｗ掰（ｙ４Ｄ　材’ｒ８１４　Ｅ　２　Ｄ　户ＤＲ’　ＺＦＰ１　图１表达差异基因的Ｑ－ＰＣＲ验证　通过Ｑ—ＰＣＲ检测候选基因的表达水平，每个基因设置３个生物学重复，内参基因为ＥＩＦ。纵坐标为基　因在两个样本间表达量差异的倍数变化值（即ＳＳ—ＮＰ表达量／ＳＳ—ＰＲＳＶ表达量），并做对数化处理。　表２　９个候选差异表达基因ＲＮＡ—ｓｅｑ的ＦＰＫＭ值和Ｑ－ＰＣＲ的相对表达量　３讨论　植物感染病毒，可以通过形成特有的调控机制以１种复杂的方式通过植物激素信号（ＳＡ和ＪＡ等）途　径适应外界的刺激，引起转录因子（ＴＦ）和转运蛋白（ＴＰ）表达模式的转变。本研究从前期工作的转录　组数据中．找出９个与植物生长发育相关的ＴＦｓ、ＴＰｓ，研究ＰＲＳＶ对番木瓜生长发育的影响。试验结果表　明．基于Ｑ－ＰＣＲ和ＲＮＡ－Ｓｅｑ分析的２种表达模式高度一致。　８　东南园艺　２０１７年第２期　本试验所取的９个基因在ＳＳ—ＰＲＳＶ中表达显著下调，表明这些基因表达受到抑制，而这些变动可能在　番木瓜与病原物的互作中起关键性的作用。ＴＦｓ是一类细胞核内蛋白质因子，通过识别和结合特异的顺式　作用元件来调节相邻基因转录的活性，从而调控各种生物学过程＿７　］。由此看来，基因转录水平是上调还　是下调取决于其对应的转录因子的转录活性。在候选的９个差异基因里，目前已知，　、ＷＲＫＹ、ＥＲＦ、　ｚｉｎｃ—ｆｉｎｇｅｒ是转录因子中的抗病调控因子，在植物生长发育和抗病防御反应中起关键调节作用ｌ９　，而这　些转录因子基因都在“ＳＳ—ＰＲＳＶ”中发生极显著下调表达（图１和表２），表明植物正常生长发育受影响。　ＴＰｓ是膜蛋白的一类，介导生物膜内外的化学物质以及信号交换，在营养物质摄取、代谢产物释放以　及信号转导等广泛的细胞活动中起着重要的作用。在信号转导植物防御调控的途径中，钙离子必不可少的　第２信使ｌ１卜　］。在本研究中我们发现，钙ＡＴＰ酶（ＣＡ２）在ｓｓ—ＰＲＳＶ中表达量下调。同时与膜运输相关　的多向耐药性蛋白（ｐ　）和二羧酸载体蛋白（ＤＩＣ２）在ＳＳ—ＰＲＳＶ表达量下调，笔者推测，感染ＰＲＳＶ　使番木瓜自身的钙离子调节系统和膜运输系统受损。笔者还发现多向耐药性蛋白（ＰＤＲ７）在Ｓｓ—ＰＲＳＶ中　表达下调，而ＰＤＲ７与木质素的生物合成相关［１　，这也与笔者以上的推测相符，因为木质素也与植物的信　号调控系统等相关。综上所述，从本试验的这些候选差异基因结果表明，在受ＰＲＳＶ侵染的番木瓜中，很　多参与植物抗病过程、激素信号转导过程以及调控网络的基因在其表达上都发生了或多或少的受到了破坏，　进而影响番木瓜的生长发育。　参考文献：　［１］Ｔｒｉｐａｔｈｉ　Ｓ，Ｓｕｚｕｋｉ　Ｊ　Ｙ，Ｆｅｒｒｅｉｒａ　Ｓ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｐａｐａｙａ　ｉｆｎｇｓｐｏｔ　ｖｉｒｕｓ—Ｐ：ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ，ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｐｌａｎｔ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２００８，９（３）：２６９－２８０．　［２］Ｇｏｎｓａｌｖｅｓ　Ｄ．Ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｐａｐａｙａ　ｒｉｎｇｓｐｏｔ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎ　ｐａｐａｙａ：ａ　ｃａｓｅ　ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ａｎｎｕａｌ　Ｒｅｒｅｗ　ｏｆ　Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，１９９８，３６（１）：４１５．　［３］Ｐｏａｅｒ　Ｂ　Ｗ，Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ　Ｄ　Ａ，Ｚｈｕ　Ｙ　Ｊ．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ　ｏｆ　Ｐａｐａｙａ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ａｎｄ　Ｇｅｎｏｍｉｃｓ　ｏｆ　Ｐａｐａｙａ，２０１４，　１０：２７７—３０７．　［４］Ｏｗｅｚａｒｚｙ　Ｒ，Ｔａｔａｕｒｏｖ　Ａ　Ｖ，Ｗｕ　Ｙ，ｅｔ　１．ＩａＤＴ　ＳｃｉＴｏｏｌｓ：ａ　ｓｕｉｔｅ　ｆｏｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ｄｅｓｉｇｎ　ｏｆ　ｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄ　ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ［Ｊ］．Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００８，３６（Ｗｅｂ　Ｓｅｒｖｅｒ　ｉｓｓｕｅ）：Ｗ１６３一Ｗ１６９．　［５］Ｚｈｕ　Ｘ，Ｌｉ　Ｘ，Ｃｈｅｎ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｎｅｗ　Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　Ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　Ｐａｐａｙａ　ｆｏｒ　Ａｃｃｕｒａｔｅ　Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ　Ｎｏｒｍａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｕｎｄｅｒ　Ｄｉｆｆｅｒ．　ｅｎｔ　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｐｌｏｓ　Ｏｎｅ，２０１２，７（８）：ｅ４４４０５．　［６］Ｓｃｈｍｉｔｔｇｅｎ　Ｔ　Ｄ，Ｌｉｖａｋ　Ｋ　Ｊ．Ａｎａｌｙｚｉｎｇ　ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ　ＰＣＲ　ｄａｔａ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　Ｃ（Ｔ）ｍｅｔｈｏｄ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ　Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，２００８，３　（６）：１１０１．　［７］Ｒａｌｎｉｌ￣ｚ　Ｓ　Ｒ，Ｂａｓｕ　Ｃ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｅｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ｄａｔａｂａｓｅｓ［Ｊ］．Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，２Ｏ０９，１０（１）：１０—１７．　［８］Ｗａｎｇ　Ｙ，Ｔａｏ　Ｘ，Ｔａｎｇ　Ｘ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｏｍａｔｏ（Ｓｏｌａｎｕｍ　ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍ）ｉｎ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｔｏ　ｅｘｏｇｅ—　ｎｏｕｓ　ａｂｓｃｉｓｉｃ　ａｃｉｄ［Ｊ］．ＢＭＣ　Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，２０１３，１４（１）：８４１．　［９］Ｇｕｔｔｅｒｓｏｎ　Ｎ，Ｒｅｕｂｅｒ　Ｔ　Ｌ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｐａｔｈｗａｙｓ　ｂｙ　ＡＰ２／ＥＲＦ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｍ［Ｊ］．Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｏｐｉｎｉｏｎ　ｉｎ　Ｐｌｎｔａ　Ｂｉｏｌｏｙ，２００４，７（４）：４６５—４７１．ｇ　［１０］Ｌｉｕ　Ｙ，Ｓｃｈｉｆ　Ｍ，Ｄｉｎｅｓｈ—Ｋｕｍａｒ　Ｓ　Ｐ．Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ＭＥＫ１　ＭＡＰＫＫ，ＮＴＦ６　ＭＡＰＫ，ＷＲＫＹ／ＭＹＢ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ，　Ｃ０１１，ａｎｄ　ＣＴＲ１，ｉｎ　Ｎ—ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　ｔｏｂａｃｃｏ　ｍｏｓａｉｃ　ｖｉｒｕｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｆｏｒ　Ｃｅｌｌ＆Ｍｏｌｅｃｕｌｒ　ａＢｉｏｌｏｇｙ，２００４，　３８（５）：８００—８０９．　［１１］Ｌｌｏｙｄ　Ｓ　Ｒ，Ｓｃｈｏｏｎｂｅｅｋ　Ｈ　Ｊ，Ｔｒｉｃｋ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ＰＡＭＰ－ｔｉｒｇｇｅｒｅｄ　ｉｍｍｕｎｉｔｙ　ｉｎ　Ｂｒａｓｓｉｃａ　ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｐｌｎｔａ－ｍｉｃｒｏｂｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：ＭＰＭＩ，２０１４，２７（３）：２８６．　［１２］Ｃｌａｙ　Ｎ　Ｋ，Ａｄｉｏ　Ａ　Ｍ，Ｄｅｎｏｕｘ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅ　Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　Ｒｅｑｕｉｒｅｄ　ｏｒｆ　ａｎ　Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　Ｉｎｎａｔｅ　Ｉｍｍｕｎｅ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ［Ｊ］．　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００９，３２３（５９１０）：９５—１０１．　［１３］Ｍｏｈａｍｍｅｄ，Ｎｕｒｕｚｚａｍａｎ，Ｚｈａｎｇ，ｅｔ　ａ１．Ｐｌａｎｔ　ｐｌｅｉｏｔｒｏｐｉｃ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ：Ｔｒａｎｓｐｏ￣ｍｅｃｈａｎｉｓｍ，ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ　Ｐｌａｎｔ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，２０１４，５６（８）：７２９－７４０．　（责任编辑：黄雄峰）