基因生物学功能分析与应用研究进展

综ｏ１．Ｅｘｐｅｒｔ　Ｒ．ｅｖ　Ｍｅｄ　Ｄｅｖｉｃｅｓ，２００８，５（５）：６０５—６１２．　【１５］Ｘｉｎ　Ｘ　述　２０１５年第１期　Ｊ，Ｈｕｓｓａ　ｉｎ　Ｍ，Ｍａｏ　Ｊ　Ｊ，ＢｉｍａｔｅｒｉａｌｓⅡ］Ｉ　［５］陈林松，史宏灿．气管替代物研究的现状与进展．生物医学工程　学杂志，２０１２，２９（３）：５９３—５９６．　［６］Ｓｃｈｕｌｔｚ　Ｐ，Ｖａｕｔｉｅｒ　Ｄ，Ｃｈｌｕｂａ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｓｕｒｖｉｖａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｒａｔｓ　ｉｍｐｌａｎｔｅｄ州ｔｌ１　ｐｏｒｏｕｓ　ｔｉｔａｎｉｕｍ　ｔｒａｃｈｅ￣ｐｒｏｓｔｈｅｓｉｓ　Ｄ］．Ａｎｎ　Ｔｈｏｒａｃ　Ｓｕｒｇ，２００２，７３（６）：１７４７—１７５１．　２００７，２８（２）：３１６～３２５．　［１６】赵莉，何晨光，高永娟，崔磊，曹谊林．ＰＬＧＡ￣不同组成对支架材　料性能的影响研究田．中国生物工程杂志，２００８，２８（５）：２２—２８．　【１７］韩浩，李利伟，秦文贞，等．ＡＣＦ／ＰＬＧＡ骨组织工程复合支架的制　备及其性能．材料学与工程学报，２０１２，３０（５）：７１９—７２３．　【１８】贾骏，段螈螈，陈亚芍，周建学，张少锋．胶原改性ＰＬＧＡ电纺纤维　的制备及其细胞相容性研究Ⅱ］．临床口腔医学杂志，２００７，２３（６）：　３２３－３２５．　［７］Ａｇｒａｗａｌ　Ｃ　Ｍ，Ｒａｙ　Ｒ　ＢＪ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｋｅｓ．，２００１，５５：１４１－１５０．　［８］Ｃｈｅｎ　Ｇ，Ｕｓｈｉｄａ　Ｔ，Ｔａｔ　ｅｉｓｈ　Ｔ，Ｍａｃｒｏｍｏ１．Ｂｉｏｓｃｉ．，２００２，２：６７－７７．　［９］Ｋｕｄｋｏｖ　ＡＢ，Ｓｏｎｇ　Ｊ．Ａｎ　ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ　ｄｅｇｒａｄａｂｌｅ　ｐｏｌｙｍｅｒ／ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ，　ｗｉｔｈ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｈａｎｄｌｉｎｇ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｂｏｎｅ　ｍａｌＴｏｗ　［１９］Ｒ．ｕｉ　Ｃｈｅｎ，Ｓｔｅｐｈｅｎ　Ｊ．ＣｕｒｒａｎＪｕｄｉｈ　ｔＭ．ＣｕｒｒａｎＪｏｈｎ　Ａ．Ｈｕｎｔ．Ｔｈｅ　ｕｓｅ　ｏｆ　ｐｏｌｙ（Ｌ—ｌａｃｔｉｄｅ）ａｎｄ　ＲＧＤ　ｍｏｄｉｉｆｅｄ　ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ　ａｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｒｉｅｒｓ　ｉｎ　ａ　ｆｌｏｗ　ｉｎｔｅｒｍｉｔｔｅｎｃｙ　ｂｉｏｒｅａｃｔｏｒ　ｆｏｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ｓｔ　ｒｏｍａｌ　ｃｅｌｈ；田．Ａｃｔａ　Ｂｉｏｍａｔｅｒ，２０１３，９（９）：８３５４—８３６４．　【１０］Ｌｏｐｅｓ　ＭＳｄａｒｄｉｎｉ　ＡＬ．Ｐｏｌｙ　Ｏａｃｄｃ　ａｃｉｄ）ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃａｒｔｉｌａｇｅⅡ】．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉｌａｓ，２００６，２７（２５）：４４５３—４４５６．　ｅｎｇｉｎｅｅｆｉｎｇ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ叽．Ｐｒｏｃｃｅｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，２０１２，４２：１５３０—１５４２．　【２０］庞龙，胡蕴玉，颜永年，刘利，熊卓，吕荣，王军．杂化改性后快速成　【１１］马永富，刘阳，郭俊唐等，复合材料气管内可降解支架的降解性　型支架对骨缺损修复的实验研究田．创伤外科杂志，２００７，９（３）：　能．中国组织工程研究，２０１３，Ｉ７（２９）：５３７１—５３７８．　２５７－２６０．　［１２】崔玉明，伍骥，胡蕴玉，等．ＰＬＧＡ和胶原海绵复合ＢＭＰ修复兔关　【２１］Ｗａｎｇ　ＳＦ，Ｋｅｍｐｅｎ　ＤＨＲ，Ｙａｓｚｅｍｓｋｉ　ＭＪ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｒｏｌｅｓ　ｏｆ　ｍａｔｒｉｘ　节软骨缺损的对比研究Ⅱ】．　中国修复重建外科杂志，２００８，２２　ｐｏｌｙｍｅｒ　ｃｒｙｓｔａｌｉｌｎｉｔｙ　ａｎｄ　ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ　ｉｎ　ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ　（２）：１４８—１５２．　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆ　ｐｈｏｔｏ——ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｄ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｅｓ　ａｎｄ　ｂｏｎｅ　［１３］Ｓｕｄｈｉｒ　Ｓ．Ｃｈａｋｒａｖａｒｔｈｉ，Ｄｅｎｎｉｓ　Ｈ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ．Ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｃｅＵｕｌａｒ　ｍａｒｒｏｗ　ｓｔｒｏｍａｌ　ｃｅｌ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　Ⅱ】．Ｂｉｏｍａｔｅｉｒａｌｓ，２００９，３０（２Ｏ）：　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐａｃｉｌｔａｘｅｌ　ｄｅｌｉｖｅｒｅｄ　ｉｎ　ｃｈｉｔｏｓａｎ—ＰＬＧＡ　ｐａｒｉｔｃｌｅｓ【Ｉ】．　３３５９－３３７０．　ＩｎｔｅｍａｆｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌ　ｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，２０１１，４０９（１）：１１—１２０．　［２２］Ｗａｎｇ　Ｙ，Ｙａｏ　Ａ，Ｈｕａｎｇ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎ　ｓｉｔｕ￣ｂｒｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｏｌｌｏｗ　【１４］Ｓａｍｂｉｔ　Ｓａｈｏｏ，Ｓｉｅｗ　Ｌｏｋ　ＴｏｈＪａｍｅｓ　Ｃ．Ｈ．Ｇｏｈ．Ａ　ｂＦＧＦ—ｒｅｌｅｓａｉｎｇ　ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｅｔｅ　ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ　ｂｙ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｉｍｍｅｓｒｉｏｎ田Ｊ　ｓｉｌｋ／ＰＬＧＡ－ｂａｓｅｄ　ｂｉｏｈｙｂｒｉｄ　ｓｃａｆｆｏｌｄ　ｆｏｒ　ｌｉｇａｍｅｎｔ／ｔｅｎｄｏｎ　ｔｉｓｓｕｅ　Ｃｒｙｓｔ　Ｇｒｏｗｔｈ，２０１１，３２７（１）：２４５—２５０．　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ｕｓｉｎｇ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ　ｃｅＵｓⅡ】．　【２３】宋晓峰，凌风光，陈学思，等．纳米羟基磷灰石表面接枝聚合左旋　Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ，２０１０，３１（１１）：２９９０－２９９８．　丙交酯Ⅱ】．高分子学报，２０１３　１（１）：９５—１００．　基因生物学功能分析与应用研究进展　婕　（雅安职业技术学院，四川雅安６２５０００）　【摘要】随着社会经济的快速发展，在强大的经济支持下，我国的生物科技技术也获得了突破性进展，尤其是在世界首幅人类基因图　的绘制成功后，基因的相关研究更是进入分子时代，对其的生物学功能的研究也越来越广泛，其为疾病的预防及控制工作作出巨大贡　献。本文将就当前基因生物学功能分析的主要方法进行详细阐述，并就此介绍基因生物学功能分析的具体应用情况。　【关键词】基因；生物学功能；分析；应用　引言　，　要优于前者；二是实验分析方法。采用计算机预测的方法并不不　随着生物科技技术的不断发展，人们对基因的了解也越来越　能实现对所有基因生物学功能的分析，因此必要的实验分析方　广泛，随着世界首幅人类基因图的出现，人们对基因的研究更是　法，对于分析基因的生物学功能意义重大。当前主要的实验分析　深入到分子研究阶段，在对基因生物学功能的研究分析中发现，　方法有以下几种：一种是基因传导方法。该方法的主要原理是将　人类各种疾病都在一定程度上与基因有着直接或间接的联系，因　目标基因，通过特定方法投放到细胞里，根绝其在细胞中的表达　此加大对基因生物学功能的研究，对于人类疾病的预防及控制工　结果来分析其该基因的生物学功能，此过程主要受两个因素影　作，有着深远意义。尤其是基因最新研究成果在医学领域的广泛　响，一是基因表达是否稳定，另一个是基因的投放成功率，当前该　应用，其展示出来的优异特性，使得人们对其的研究更加热切，其　方法主要包括生物学方法：该方法的优点是具有很高的投放成功　研究对于提升人类健康状况及延长人类寿命等，有着重要作用。　率，同时在细胞里也能很稳定的表现出其生物学功能，但相应的　下文将就当前基因生物学功能分析的主要方法进行详细阐述，并　其大小则在很大程度上受细胞容量的影响，同时其毒性也较大，　就此介绍基因生物学功能分析的具体应用情况。　会引发细胞的免疫反应。非生物学方法其优点是其目标基因的大　１　基因生物学功能分析方法　小不受限制，其毒Ｉ生也较低，但其投放成功率却不高，即使通过借　当前在基因生物学功能的分析方法上，主要有以下几种：一　助相关设备提高其投放率，但其花费较高经济代价。Ｄｗｉｖｅｄｉ等人　是通过计算机实现预测的方法。该方法对基因功能预测能力的实　就是采用此方法；另一种实验方法基因诱捕方法。该方法的主要　现，有赖于基因组学等的进步，为其提供了大量的参考数据，计算　原理是让具有外源基因的基因投放到细胞里，使其进行重组整合　机预测方法的原理主要是根据通过判断基因序列是否相同，来判　后，发生突变，并通过相关基因的表达来鉴定其突变，从而实现对　断其蛋白质功能是否存在一定同一性，从而实现对基因生物学功　基因生物学功能的分析。Ｄａｍｍｅ等人就是用老鼠做实验，对其　能的预测，然而此种方法具有较大的缺陷性，当前比较主流的计　Ｍｆｓｄ８基因进行分析，并取得重大成果。此外，实验分析方法还　算机预测方法是Ｒ　ａｄｉｖｏｊａｅ￣：Ｔｒｅｅｃｋ等人的采用结合大量数据信　包括反义技术、基因敲除技术、核酸酶技术及电泳迁移率等实验　息来预测的方法，其主要包括微阵列及蛋白网络分析等，经过大　分析方法。　量的实验结果显示，后者预测方法在准确度及应用广泛性方面都　２基因生物学功能分析的应用情况　Ⅱ一２６３　医学前沿２０１５年１期　对基因生物学功能的分析研究，其主要应用于人类疾病的防控及　临床治疗中，由于人类疾病与基因状况有着紧密的联系，人类疾　病产生其实质是相关基因发生突变，因此疾病的发生和发展，可　以通过对相关基因的变化过程的研究来了解。当前对基因的分析　其主要应用与基因的诊断及治疗方面。基因诊断方面：其原理主　要是通过对基因的主要载体，及ＲＮＡ以及ＤＮＡ等进行分析研究，　对其序列进行观察，看其是否存在变化及缺憾情况，以及是否存　在于正常基因序列不同的表达情况等，由此来确定基因的主人是　否患有某种疾病，该诊断方法具有高效、准确及灵敏等特点，其能　在疾病的早期还没有出现临床症状反应时，就可以对其进行诊　断，这对于疾病的早期治疗意义重大。此外，基因诊断还能对患者　疾病类型及治疗效果，以及预后情况等作出准确判断，因此基因　诊断方法具有非常好的应用前景；基因治疗方面：其治疗的主要　原理对于已经出现异常的基因，将其去除并置入正常基因取代　它，从而实现对疾病的根本治疗，而常规的治疗其目的仅仅是对　异常基因进行修复。当前基因治疗的方法主要有生殖细胞及体细　胞治疗两种，当前的研究和应用的主流是后者，ＭｃＩｎｔｙｒｅ等人通过　对老鼠进行实验，通过基因治疗的方法，有效的改变了其哺乳和　摄食的情况，说明基因治疗在动物中效果显著。　３结语　由上可知，基因生物学功能的研究分析，对于人类疾病的防　控及临床治疗，以及改善人们身体健康状况及延长人类寿命等，　有着重大意义，因此加大对基因生物学功能的分析研究，并合理　将其应用到疾病的诊断及治疗中，有着深远意义。　参考文献：　［１】张媛英．中华蜜蜂谷胱甘肽ｓ一转移酶和小分子热激蛋白基因的　生物学功能分析［Ｄ】．山东农业大学，２０１４．　［２］李竹君．穿心莲ＡｐＣｅＳ基因的生物学功能研究【Ｄ】．广州中医药　大学，２０１３．　作者简介：姚蟪（１９８１－），女，四川雅安人，硕士，雅安职业技　术学院讲师，专业方向：生物学。　分析血清抗Ｇ蛋白ｐ　１￣ｌ：ｉＭ２受体自身抗体￣Ｉ：ＩＣＡ与糖尿病心肌病的关系　吕芳　（湖南食品药品职业学院。湖南长沙）　【摘要】目的分析血清抗Ｇ蛋白１３１和Ｍ２受体自身抗体和ＣＡ与糖尿病心肌病的关系。方法自２０１３年１月一２０１４年１月期间，将合成所　得的Ｂ　１同Ｍ２受体的多肽片段作为研究抗原，选择酶联免疫吸附剂测定作为检测技术，将全部患者分为Ｉ组（糖尿病合并心肌病）共５２　例，Ⅱ组（单纯Ⅱ型糖尿病）共５２例，Ⅲ组（高血压且无靶器官损害）共５９例，对照组（正常人）共４９例；对２１２例研究对象体内血清内含的　抗Ｇ蛋白偶联型Ｂ　１与Ｍ２受体的自身抗体为对象进行检测；选择荧光分析法测定体内血浆的儿茶酚胺含量。结果四组Ｂ　１与Ｍ２受体的　阳性率检测结果分别是６４．７％，５６．９％；１５．６％、１３．７％；１５．５％、１５　５％，且Ｉ组与其他三组的比较差异显著，具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论　利用免疫学相关理论与机制连同神经内分泌激素有助于评价糖尿病心肌病患者的病理以及生理的变化过程。　【关键词】糖尿病；心肌病；血清抗Ｇ蛋白；ｐ　１同Ｍ２受体；儿茶酚胺　Ｇ蛋白偶联型受体它指的是细胞表面某类能够和Ｇ口结合蛋　白三聚体耦联的受体分子，心脏内部含有该类型受体分子内部具　备的８　１同Ｍ２受体是协调心脏正常活动不可或缺的受体。近几十　年来，相关的研究学者先后探索到扩张型的心肌疾病患者其体内　的血清中具备Ｂ　１同Ｍ２受体的自身抗体，并指出这也许同心肌病　的发生存在某种关联。糖尿病性心肌在代谢紊乱及微血管病变之　基础上引发心肌广泛灶性坏死，出现亚临床的心功能异常，最终　进展为心力衰竭、心律失常及心源性休克，重症患者甚至猝死，不　可用高血压性心脏病、冠状动脉粥样硬化性心脏病以及别的心脏　病变来阐释心肌疾病。自２０１３年１月～２０１４年１月期间，本文以对　２１２例研究对象体内血清内含的抗Ｇ蛋白偶联型１３　１与Ｍ２受体的　自身抗体为对象，探究抗心肌Ｂ　１与Ｍ２受体自身抗体同儿茶酚胺　含量在初步检测与诊断糖心病的作用。　１资料与方法　的序列性肽段，即是Ｂ　１同Ｍ２受体自身抗体的多肽序列；并选择　高压液相色谱的方法对合成肽进行检测分析，其纯度高达９５％或　者以上。　１．２．２　ＥＬＩＳＡ的检测　针对自身抗体的检测主要根据成熟的实验室标准方法，对　Ｂ　１同Ｍ２受体的自身抗体进行相应的检测；检测过程中应相应地　成立阳性对照、空白对照和阴性对照，测定ＯＤ值应将空白对照调　至零，以保障结果的准确性。把健康人群体内的血清作为参考对　象，将ＯＤ值大于参照血清两倍标准差的相应的血清标本视作为　阳性对照的血清。对不同血清的吸光度之间的比值（ＯＤ标本值一　空白对照的ＯＤ值）／（阴性对照的ＯＤ值一空白对照的ＯＤ值）进行分　析，当比值大于２倍时则可诊断为抗体的检测结果呈阳性；主要选　择荧光分析的方法对血浆儿茶酚胺（ＣＡ）的含量进行测定。　１．２．３检查方法　选择美国生产型号为ＨＰＳＯＮＯＳ２５００的专门用于心动图检查的超　声仪，将探头频率设置为２．５ＭＨｚ；接受检查的患者需采取平卧或　１．１一般资料　自２０１３年１月～２０１４年１月期间，选取２１２例糖尿病患者作为　此次的研究对象，其中糖尿病合并心肌病共５２例，满足ＷＨＯ关于　糖尿病相关诊断前提喜爱并发心肌病的判断标准，患者心率为　（９０±６）次份，排除因心瓣膜病变、心肌肥大以及其他类型心肌炎　导致的心肌受损，排除外大冠脉发生病变、肾病以及自身免疫类　型糖尿病的可能性；单纯糖尿病共５２例，高血压共５９例，均符合　ＷＨＯ相应的疾病诊断标准要求，另外对照组４９例均来自接受体　检的正常人。全部患者均需接受心肺的Ｘ线检查，超声检查，心脏　及肝肾功能检查，血糖与尿的常规检查以及血清的电解质检查。　按照Ｂ超的检查结果判断患者有无心脏左室的收缩功能出现减退　现象。对全部患者进行标本的采集之前，不可给予免疫抑制剂以　及１３　１受体的阻滞剂进行服用，需清晨时保持空腹状态，取５ｍｌ的　静脉血液，进行分离后取血清并于零下四是摄氏度密封保存。　１．２检测方法　是左侧卧的体位，常规的标准化切面，做好对不同心瓣口血流的　频谱以及检测指标的详细记录；选择便捷的Ｓｉｍｐｓｏｎ法得出左心　室的射血分数（ＬＶＥｒ），按照二尖瓣舒张状态时血流频谱的测量指　标评价左室的舒张功能。　１．５统计学分析　采用ＳＰＳＳ１０．０统计学软件，组间计量资料比较采用ｔ检验，组　间计数资料采用标准差ｘ±ｓ），进行检验，Ｐ＜０．０５表示比较差　异具有统计学意义。　２结果　２．１　四组受体其自身抗体的阳性率与ＣＡ的比较　血清抗Ｂ　１同Ｍ２受体其自身抗体的检出率比较，将明确按照　１：１００、１：２００、１：４００与１：８００的的比例进行稀释的Ｂ　１同Ｍ２　受体阴性血清和抗体阳性作为此次研究的参照血清，其中血清的　１．２．１多肽的合成　稀释比例处在１：１００同１：２００比例时，其阳性检出率趋向稳定，　选择专门用于多肽合成的自动操作仪器，通过固相多肽的合　此次研究选取１：２００比例作为常规的稀释度。经过分析比较显示　成方式合成等同于人体Ｂ　１同Ｍ２受体的细胞外部第二环氨基酸　Ｉ组患者内含的Ｂ　１同Ｍ２受体抗体的阳性检出率以及血浆的ＣＡ　ＩＩ一２６４