一种过硫酸氢钾复合物粉的消毒性能评价

（1.四川省内江市食品药品检验检测中心，四川内江641000；

2.四川恒通动保生物科技有限公司，四川内江641000）

中图分类号：S859.799.1文献标识码：B文章编号：1001-8964（2019）10-0027-04

摘要：本文通过杀菌性能试验、硬水拮抗试验、有机物保护试验和能量试验评价了四川某动保企业生产的过硫酸氢钾复合物粉的消毒性能，并与原研单位生产的同款产品进行对比。结果表明，该国产过硫酸氢钾复合物粉（1∶400）与原研单位生产的过硫酸氢钾复合物粉（1∶400）的消毒性能一致，并且在抗有机物保护方面优于原研单位的产品。

关键词：过硫酸氢钾复合物粉；杀菌试验；硬水拮抗试验；能量试验；有机物保护试验

过硫酸氢钾复合物粉以过硫酸氢钾为主要成分，辅以增效剂、稳定剂、表面活性剂和有机酸等辅料，含有效氯不低于10.0%。该产品具有强酸性，其pH值在2.5左右，可以杀灭多种病原菌，其代谢产物不会对人类和环境带来影响[1]；该产品还具有强氧化性，溶解后产生高能量、高活性的小分子自由基、活性氧等衍生物[2]，通过循环链式反应系统破坏细菌细胞膜的通透性，所产生的自由基等衍生物作用于DNA、RNA的磷酸二酯键，干扰病原体DNA和RNA的合成[3-4]。过硫酸氢钾复合物粉也具有广谱性，既克服了H2O2等普通氧化剂氧化能力不强且具有选择性氧化的缺点，又避免了卤素类消毒剂有毒副产物生成而对人体健康有危害的风险。

“全卫效康”是四川某动保公司联合国内科研机构开发的一种长效过硫酸氢钾复合物粉消毒剂。为观察验证其消毒效果和方便临床使用，

收稿日期：2019-07-31

作者简介：杨俊芸（1982-），女，四川省内江人，硕士，主要从事药品检验工作。

*通讯作者：刘起军（1983-），男，湖南省衡阳人，博士，主要从事兽药制剂研发工作。

笔者开展了本次试验。11.1

材料药品

1.1.1“全卫效康”（过硫酸氢钾复合粉），粉红色10.0%。四川某动保公司生产，批号：20190701。

颗粒状粉末，有柠檬气味，有效氯含量不低于1.1.2“卫可”（过硫酸氢钾复合粉），粉红色颗粒杜邦公司生产，批号：1706BA0210。1.2

菌（ATCC6538）、枯草芽孢杆菌黑色变种（ATCC9372），均由中国普通微生物菌种保藏管理中心提供。1.31.4

养基，参照药典[5]自配。

试剂标准培养基

普通肉汤培养基，普通琼脂培

供试菌株

大肠杆菌（8099）、金黄色葡萄球

状粉末，有柠檬气味，有效氯含量不低于10.0%。

（PBS）、生理盐水、蒸馏水，自制；中和剂：0.5%硫代硫酸钠+1%吐温-80，用生理盐水稀释，121℃高压灭菌15min。1.5

试验菌悬液的制备[7]

开封冻干菌种后，用

稀释液[6]：0.03mol/L磷酸盐缓冲液

普通肉汤溶化悬浮菌体，然后划线接种于适宜的琼脂培养基上，37℃培养18h，选择典型的单个菌

27试验研究落进行传代培养，传至3代后接种到适宜的普通肉汤培养基中，37℃培养24h即得菌悬液。22.1

方法与结果

试验菌中和剂选择试验

2019·10期·总第351期细菌数相差不超过10%，第1组不长菌或长菌数远少于第2组，第2组长菌数超过100CFU/mL，根据中和剂鉴定试验标准判为所选的中和剂浓度。2.1.4

试验结果

0.5%硫代硫酸钠+1%吐温-80

2.1.1

将制备好的菌悬液用平板计数法进行细菌计数，使试验菌含菌量为1×106～1×107CFU/mL。2.1.2

方法步骤

试验共设6个组，第1组：消毒

大肠杆菌与金黄色葡萄球菌。

为所选中和剂浓度，且中和剂及其产物对细菌及培养基无影响。结果见表1。

表1

组别

第1组第2组第3组第4组第5组第6组

消毒剂+菌悬液（消毒剂+菌悬液）+中和剂

中和剂+菌悬液（消毒剂+中和剂）+菌悬液

PBS+菌悬液对照组

中和剂选择试验结果

试验菌（CFU/mL）大肠杆菌2500金黄色葡萄球菌

3410剂+菌悬液；第2组：（消毒剂+菌悬液）+中和剂；第3组：中和剂+菌悬液；第4组：（消毒剂+中和剂）＋菌悬液；第5组：PBS+菌悬液；第6组：未接种菌的培养基对照。按顺序分别在1～5组加入相对应的消毒剂（0.25%）、中和剂、消毒剂与中和剂混合液（1∶9）、PBS各4.5mL，菌悬液均为0.5mL，除第2、4组前二者混合作用10min再加入第三者外，其余各组均混合作用10min，再取出0.5mL，用生理盐水等量稀释后，做细菌培养并计数。试验重复3次。2.1.3

结果判定

当第6组不长菌，其他各组间

2.95×10

6

3.14×1063.02×106

01.72×1061.66×1061.83×106

02.2

2.2.1

细菌定量消毒试验[8-9]

方法步骤

释液稀释成含菌量为5×105～5×106CFU/mL的菌

将菌液进行活菌计数，并用稀

悬液。将消毒剂用灭菌蒸馏水稀释成3个不同浓度，各吸取4.5mL分别加入3个试管内，置于

（上接第26页）2.3

免疫抗体检测结果见图1。

120%100%80%60%40%20%0

二免后11d

二免后48d

50%100%试验组80%对照组70%30%0二免后123d

表3

保育阶段日增重

试验组对照组对比

378g+25g353g

各阶段生产性能对比

育肥阶段日增重894g+13g881g

料肉比2.97∶13.04∶1-0.07662g+15g647g

全期日增重

料肉比2.72∶12.80∶1-0.08料肉比1.58∶11.62∶1-0.04护五个月左右没问题；对照组二免后11d抗体阳性率仅50%，二免后48d达到70%，二免后123d阳性率为0，保护期较短。4

小结

猪呼吸系统疾病是影响猪只健康的重要因

图1两组抗体检测结果对比

3

3.1

结果分析

组跟对照组相比，保育阶段日增重增加了25g，料肉比降低了0.04；育肥阶段日增重增加了13g，料肉比降低了0.07；全期来看，试验组的日增重增加了15g，全期体重增加5.01kg，料肉比降低了0.08，节省饲料8.5kg左右。3.2

免疫抗体水平分析

抗体检测结果显示：试

生产性能测定数据分析从表3可知，试验

素之一，猪的肺炎支原体是猪呼吸系统的门户病，主要寄生于呼吸道的纤毛上皮细胞，破坏细胞并诱发感染动物出现继发感染，疫苗免疫是防控该病的重要手段，有效的疫苗免疫可以减少呼吸道的病原菌数量，降低感染水平，抑制病原菌扩散。通过临床试验数据及抗体检测结果表明，试验组猪支原体肺炎灭活疫苗的免疫效果要优于对照组疫苗。■

验组二免后11d抗体阳性率达100%，二免后48d下降到80%，二免后123d下降到30%，抗体保282019·10期·总第351期试验研究20±2平衡后，℃水浴中。待试管内液体温度与水浴温度在3个试管中分别加入上述配好的0.5mL菌悬液，混匀并开始记时。分别于4个不同间隔时间，各取0.5mL菌液混合液移入4.5mL中和剂中，混匀，中和10min，作适当稀释后进行活菌计数。阳性对照以洗脱液代替消毒液，按上述步骤同时进行。2.2.2

本存活菌数结果判断（CFU/mL按不同稀释度推算出每个样

），按下式计算杀灭率：

NVt＝0－Vt

V0

×100%KVt＝

0′（V0式中，N′1（－1N－t）－NVt′t）

×100%

t为空气中细菌的自然消亡率；V0分别为对照组试验开始前和试验过程中不同时与Vt

间点的空气含菌量；

V0处理前和消毒过程中不同时间点的空气含菌量；′与Vt′分别为试验组消毒Kt为消毒处理对空气中细菌的杀灭率，应达到99.9%2.2.3

以上。10试验结果“全卫效康”（1∶400）能在

杆菌黑色变种芽孢，min内杀灭大肠杆菌、杀菌效果与金黄色葡萄球菌和枯草“卫可”（1∶400）

相同。结果见表2。

表2

两种产品不同浓度下的定量消毒试验结果

产品

名称

测试菌株浓度不同时间点的平均杀菌率/%1∶40099.533min10min99.98100.0099.835min100.00100.0020min大肠杆菌

全卫1效康金黄色葡萄球菌

1∶200

100.001∶∶400200

100.0099.95100.00

99.99100.00100.00100.00枯草杆菌黑色

变种芽孢11∶40080.1998.1095.33100.0099.90100.00100.00大肠杆菌

1∶20099.8299.90卫可

1∶99.99100.0099.93100.00100.00100.00100.00100.00100.00金黄色葡萄球菌1∶4002001∶400100.0099.91枯草杆菌黑色变种芽孢

1∶1∶200∶40020081.19100.0099.99100.0099.99100.00100.0098.2798.3399.99100.0099.86100.00100.002.3

2.3.1

硬水拮抗试验释液稀释成含菌量为方法步骤

将菌液进行活菌计数，5×105

～5×106

CFU/mL并用稀

悬液。将消毒剂用硬水稀释成3个不同浓度，的菌

各吸取4.5mL分别加入3个试管内，置于20±2℃水浴中。待试管内液体温度与水浴温度平衡后，在

3混匀并开始记时。分别于个试管中分别加入上述配好的4个不同间隔时间，0.5mL菌悬液，各取0.5mL菌液混合液移入4.5mL中和剂中，混匀，中和10min，作适当稀释后进行活菌计数。阳性对照以洗脱液代替消毒液，按上述步骤同时进行。

2.3.22.3.3

结果判断结果判断同2.2.2。强的抗硬水能力，试验结果“全卫效康”实验条件下“全卫效康”和“卫可”都有很

和“卫可”的抗硬水能力一致，硬水对两种消毒剂杀菌

能力的影响不显著。结果见表3。

表3

硬水条件下“全卫效康”和“卫可”的杀菌性能

产品不同时间点的平均杀菌率/%名称菌株稀释

倍数全卫大肠杆菌15min效康

1∶40099.613min100.0010min100.0020min金黄色葡萄球菌

1∶∶20040099.98100.0099.7599.5399.99100.00100.00100.00大肠杆菌

11∶200100.00100.00100.00卫可

1∶40099.7799.93100.00100.00100.00金黄色葡萄球菌

1∶20099.99100.00

100.001∶∶40020099.6299.8599.98100.00100.0099.90100.00100.00100.00100.002.4

2.4.1

有机物保护试验[10]

在菌悬液中加入小牛血清，方法

以无菌小牛血清作为有机物代表，

使其浓度为10%。通过定量杀菌试验进行测定，各组试验至少重复3

次，计算不同浓度有机物存在时的杀菌率，并作比较。2.4.2

强的抗有机物能力，试验结果“全卫效康”实验条件下，和““卫可”全卫效康”都有很

（1∶400物对两种消毒剂消毒效果的影响不明显。结果

）的抗有机物能力优于“卫可”（1∶400），有机见表4。

表4

有机物条件下“全卫效康”和“卫可”的杀菌性能

产品

不同时间点的平均杀菌率/%名称

测试菌株稀释倍数大肠杆菌

11∶40099.723min5min1∶20099.9099.90100.0010min20min全卫

效康

100.00100.00100.00金黄色葡萄球菌

1∶99.911∶40099.99100.0099.99100.00100.00100.00100.00大肠杆菌

1∶20040099.61100.00100.001∶20099.9499.86100.00100.00卫可

100.001∶∶400200100.0099.9099.97100.00100.00金黄色葡萄球菌

100.00100.00100.00100.0029试验研究2.5

能量试验[10]

2019·10期·总第351期以上各试验组与对照组的样本试管置于37℃培

将两种消毒剂用标准硬水稀

养48h，观察是否有细菌生长。2.5.2

的5管样本中，有2管或2管以上不长菌的消毒剂浓度作为最低合格浓度[6]。2.5.3

效果接近，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低合格浓度为0.5%。结果见表5。

试验结果“全卫效康”和“卫可”的杀菌结果判定

在第1次和第2次加入菌悬液

2.5.1

释成3个浓度的消毒液，每个浓度分装3mL于无

方法步骤

菌试管内，然后分别于第0、10、20min（第1、2、3次）加入1mL菌悬液，并于第8、18、28min分别取20μL混合液于含中和剂的营养肉汤培养基试管中，一式5份；取2支含5mL中和产物的营养肉汤管，向其中加入5μL试验菌液作为阳性对照。将

表5

消毒剂

浓度0.75%0.25%0.75%金黄色葡萄球菌

0.25%0.05%0.1%0.5%0.5%

\"全卫效康\"和\"卫可\"的能量性能测试对比

不同加菌次数后肉汤管中的细菌生长情况

第1次卫可－－－－－--------------------+++++-----+++++-------------------------+++++-----+++++全卫效康

卫可

第2次

------------+++---------++++++-----+++++-----------++++------+---+++++-----+++++全卫效康

卫可

第3次

-----++-+++++++----+++++++++++-----+++++------+++++++++---+-++++++++++++++++++++（2.3~3.7）×106

全卫效康

对照组菌数（CFU/mL）

菌种

大肠杆菌

（2.2~3.4)×106

注：+表示有菌生长；-表示无菌生长

2.6

2.6.1

过硫酸氢钾复合物粉的临床快速鉴别方法闻气味

或无刺激性气味；加入大量氯化钠，应释放出刺激性气味（氯气）。2.6.23

观颜色

将药品溶于水中，应无氯气释放

[2][3][4][5][6][7][8]

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间不褪色；保持时间越长，说明配方组分越稳定。

小结

过硫酸氢钾复合盐兼顾了氯制剂、氧化剂、

将药品兑水，观察是否能够长时

酸制剂的三重功效，杀菌谱广，持续时间长，副作用小，安全性高[11-12]。该消毒剂成分复杂，主要包括过硫酸氢钾、硫酸氢二钾和硫酸钾等复合物，属于以硫酸根自由基为基础的强氧化活性杀菌成分。过硫酸氢钾复合盐易溶于水，一旦溶于水即产生丰富的活性氧、羟基自由基等高能量、高活性的小分子物质，能对各种微生物进行破坏和杀灭。

本试验表明，“全卫效康”在定量杀菌、抗硬水和抗有机物等方面与原研单位生产的过硫酸氢钾复合物粉（卫可）基本一致，在某些方面（抗有机物等）甚至优于“卫可”。■

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