选修一 专题5课题3《血红蛋白的提取和分离》测试卷
（时间：40分钟 满分：100分）
班级 姓名 学号
一、选择题（每题3分，共60分）
1、凝胶色谱法是根据（ ）分离蛋白质的有效方法。
A．分子的大小 B．相对分子质量的大小 C．带电荷的多少 D．溶解度 2、电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（ ）的电极移动。
A．相同 B．相反 C．相对 D．相向 3、血液由血浆和各种血细胞组成，其中（ ）的含量最多。
A．白细胞 B．血小板 C．红细胞 D．淋巴细胞 4、为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗凝血剂（ ）。
A. NaCl B.甲苯 C.蒸馏水 D.柠檬酸钠 5、将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是（ A．无色透明的甲苯层 B．脂溶性物质的沉淀层 C．血红蛋白的水溶液 D．其他杂质的暗红色沉淀物
6、凝胶色谱分离法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是 ( )
A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径
B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度 C．将酶或细胞固定在凝胶中
D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度
7、下列各项中，一般不影响凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是 ( )
A．层析柱高 B．层析柱的直径 C．缓冲溶液 D．样品的分布 8、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中决定蛋白质或多肽移动速度的主要因素是 ( )
A．蛋白质分子所带的电荷 B．蛋白质分子的形状
C．蛋白质分子的相对分子质量 D．缓冲溶液的pH
9、为了提取血红蛋白，从学校附近的屠宰场索取新鲜的猪血，对猪血处理的正确操作是（ ）
A．要在采血容器中预先加人抗凝血剂柠檬酸钠 B．取血回来后，马上进行高速长时问离心 C．将离心后的血细胞加入清水缓慢搅拌 D．重复洗涤直到上清液呈红色为止 10、下面说法不正确的是 ( )
A．在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变 B．缓冲溶液通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成 C．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 D．透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内 11、蛋白质的提取和分离分为哪几步( )
A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化 C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定 D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定
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）
12、洗涤红细胞时，离心所采用的方法是（ ）
A．低速长时间离心 B．低速短时间离心 C．高速长时间离心 D．高速短时间离心 13、凝胶色谱法分离蛋白质中使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶(Sephadex G一75)，其中G、75的含义为( )
A、G表示凝胶的使用量，75表示加75 g水
B、G表示凝胶的交联程度，75表示需加热到75℃
C、G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示每克凝胶膨胀时吸水7.5g
3
D、G表示凝胶的膨胀体积,75表示每克凝胶膨胀时体积可达75cm 14、在装填凝胶柱时，不能有气泡存在的原因是（ ）
A．气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果 B．气泡阻碍蛋白质的运动 C．气泡与蛋白质发生化学反应
D．气泡在装填凝胶的时候，使凝胶不紧密
15、样品的加入和洗脱的操作不正确的是（ ）
A．加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面 B．加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内 C．等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口
D．用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面 16、下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是（ ）
A．洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液 B．用蒸馏水重复洗涤红细胞 C．血红蛋白释放后应低速短时间离心 D．可采集猪血作为实验材料 17、下列有关提取和分离血红蛋白的程度叙述不正确的是（ ）
A．样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液
B．可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化 C．通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取 D．可通过SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度
18、在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是 ( )。 A．防止血红蛋白被氧化 B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和 C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程 D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能
19、下图中，可表示为相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的移动过程的是（ ）
20、下图是用除去DNA的滤液进行血红蛋白的提取和分离实验的装置，下列有关叙述不正确的是 ( )。
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A．首先用图甲装置对滤液进行处理，其目的是去除相对分子质量较小的杂质 B．图乙装置的试管中收集到的液体中最先出现的是相对分子质量较小的蛋白质
C．用图乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每管收集5 mL，连续收集
D．图丙装置中电泳法分离提纯血红蛋白的原理是血红蛋白带有一定量的电荷，在电场的作用下向一极移动
二、非选择题（共40分）
21、（每空2分，共12分）下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入(图I)和洗脱(图Ⅱ)示意图，请据图回答下列问题。
(1)在加样示意图中，正确的加样顺序 是 。 (2)用吸管加样时，应注意正确操作，分别是 ① 。 ②贴着管壁加样。
③ 。 (3)等样品 时，才加入缓冲液。
待 接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每 mL收集一管，连续收集。 22、（除第(3)每空1分外，其余每空2分，共10分）
PCR技术可扩增DNA分子，电泳技术是将待测样品放在光滑的凝胶薄膜上，并加上直流电场，可利用分子带电荷不同分离和分析氨基酸和多核苷酸片段等有机物。这两项技术综合应用于现代刑侦，可以获得最可靠的证据。如图是一次寻找嫌犯的测试结果：图甲是把遗迹中含有21个氨基酸的多肽进行
水解，将氨基酸混合物进行电泳的结果；图乙是通过提取罪犯B遗迹DNA和四位嫌犯的DNA进行扩增，并采用特定限制酶处理后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱。
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(1)在同一电场下，由于蛋白质或DNA的 以及 、 不同而产生不同的迁移方向或速度，从而实现样品的分离。
(2)在电泳过程中，带电分子会向着 的电极移动。
(3)由图甲得知，多肽由 种氨基酸组成；由图乙可知B最可能的对象是 。
23、（每空1分，共8分）科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。
(1)分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的 、大小及形状不同，在电场中的 不同而实现分离。
(2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供 和 。
(3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的 ，确定该蛋白质的抗菌效果。
(4)细菌培养常用的接种方法有 和 。实验结束后，对使用过的培养基应进行 处理。
24、（每空2分，共10分）测定蛋白质的相对分子质量是研究蛋白质的一项重要技术，常用凝胶(由多孔性网状物质构成的颗粒，其孔能让小分子物质进出)过滤法测定，即在一根垂直的玻璃柱中装满凝胶，然后在其上端加入蛋白质混合液并用缓冲液进行洗脱。根据各种蛋白质洗脱的先后顺序可以比较它们的相对分子质量大小。利用下列材料,鉴定样品液(含有A、B两种相对分子质量大小不同的蛋白质)中蛋白质相对分子质量的大小。
材料用具:支架台、符合要求的凝胶柱、吸管、缓冲液洗脱瓶、带有开关的玻璃导管、橡胶软管、夹子、试管若干、足量的缓冲液等。 (1)实验步骤：
①加样前先 。 ②加样： 。 ③洗脱： 。 ④收集并检测它们洗脱的先后顺序。
(2)实验结果及结论： 。 (3)请用坐标图表示出不同蛋白质相对分子质量大小与洗脱液体积的关系：
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选修一 专题5课题3《血红蛋白的提取和分离》测试卷
参考答案
一、选择题（每题3分，共60分）
1 B 2 B 3 C 4 D 5 C 6 A 7 C 8 C 9 A 10 D 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 C B C A A D C D B B 二、非选择题（共40分）
21、（每空2分，共12分）
(1)④→①→②→③
(2)不要触及破坏凝胶面 使吸管管口沿管壁环绕移动 (3)完全进入凝胶层 红色的蛋白质 5 22、（除第(3)每空1分外，其余每空2分，共10分）
(1)带电性质 分子大小 形状不同 (2)与所带电荷相反 (3)7 F2 23、（每空1分，共8分） (1)电荷（带电情况） 迁移速度
(2)碳源 氮源 (3)数量
(4)平板划线法 稀释涂布平板法 灭菌 24、（每空2分，共10分）
(1)
①先将凝胶柱垂直固定在支架台上，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐，关闭出口
②用吸管小心将1mlA、B两种蛋白质的混合样液加到色谱柱顶端，注意不要破坏凝胶面；打开下端出口，使样品渗入凝胶床内后，关闭下端出口
③小心加入缓冲液到适当高度，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，用缓冲液进行洗脱 (2) 若经过检测A先于B洗脱出来，则A的相对分子质量大于B；相反，A小于B (3)
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