无菌操作规范流程(完整版)

无菌操作规范流程（1）

一、开始实验前15分钟，在更衣间更换细胞房专用拖鞋进入细胞房，打开生物安全柜（超净台）的紫外。在实验室准备间将细胞房风机打开，并将细胞房外空调视气温选择是否打开并调整至合适温度。

二、进入细胞房时，实验人员首先在更衣间更换无菌服，换好细胞房专用拖鞋，戴好口罩、手套。帽子须遮盖全部头发、口罩须盖住口鼻，并认真洗手。细胞房内如果有不洁的口罩、手套（包括手套袋）、鞋套，应及时扔进垃圾桶。实验白大褂应整齐挂入衣橱，鞋子于鞋柜摆放整齐，保持更衣间干净整洁。

三、从更衣间进到风淋室再进到细胞房有两道门，进到风淋室后先打开分淋并关门，经过分淋才能打开进细胞房的门。两扇门不能同时打开。

四、关掉所有紫外灯，将废液桶放到每个实验台备用，给垃圾桶套上垃圾袋，并从冰箱中取出当天需要用到的培养基及相关试剂预热到室温。

五、实验中，手套袖边要用酒精棉球充分消毒，以避免人为带进污染物。培养基等外来物表面要用酒精棉球擦干净再放入超净台。培养瓶等瓶口需在火边消毒后再拧开或旋紧。

无菌操作规范流程（2）

一、每个超净台用完后，应立即取出废液桶将废液倒入水池，倒入少许新洁尔灭消毒液预处理并洗净，然后放到指定位置。用75%乙醇擦干净超净台台面，将移液枪（100ul、200ul、10ul、2ul）调到最大量程并整齐摆放于实验台。整理超净台和实验台台面，使之

看起来干净整齐。

二、离开细胞房时注意关掉超净台、显微镜、离心机，每个房间的照明灯以及空调，处理不洁耗材等杂物，换回白大褂实验服和外用鞋。关闭细胞房的空气净化风机。

三、细胞房内需要准备充足的75%酒精棉球、新洁尔灭消毒液、无水酒精、10ml移液管、25ml移液管、六孔板、中型培养瓶、小型培养瓶、吸管、50ml离心管、15ml离心管、培养皿、1.5ml离心管、枪头（1000ul、200ul、10ul）、口罩、手套、垃圾袋等耗材（注意外包装完整）。尽量避免实验期间进出无菌室。