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仪器分析实验二显微镜酶标仪

2024-04-12 来源:步旅网
实验二 荧光显微镜的操作及酶标仪的使用方法

一、 实验目的:

1、了解倒置荧光显微镜及酶标仪的工作原理; 2、掌握仪器的使用方法; 3、了解操作中的注意事项; 二、 工作原理: 1、倒置荧光显微镜:

荧光显微镜是利用一个高发光效率的点光源,经过滤色系统发出一定波长的光作为激发光、激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后,再通过物镜和目镜的放大进行观察。这样在强烈的对衬背景下即使荧光很微弱也

易辨认,敏感性高,荧光光源—一般采用超高压汞灯(50-200W),它可发出各种波长的光,但每种荧光物质都有一个产生最强荧光的激发光波长,所以需家用激发滤片(一般有紫外、紫色、蓝色和绿色激发滤片),仅使一定波长的激发光透过照射到标本上,而将其他光都吸收掉。没种物质被激发光照射后,在极短时间内发射出较照射波长更长的可见荧光。 2、多功能酶标仪:

光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本。该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号。电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器经行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果。 三、 操作方法: 1、倒置荧光显微镜:

1)移去显微镜防护罩,检测显微镜镜头和滤光片,打开光源:

2)单纯使用相差显微镜观察时,在电压调节旋钮处于最小状态是打开

TH4-200电源开关,然后按显示镜正面下方的电源按钮,指示灯亮即可使用。使用其右上方的电压旋钮可以调节亮度。使用后将电压旋钮调到最低,再关闭电源;

3)使物镜与光学组件选择环匹配:

4)如需使用荧光,打开汞灯电源开关,稍等片刻,观察“BURNER ON”

指示灯亮并伴随”啪嗒“一声则显示汞灯开启正常;

5)放好标本,在可见光下调节显微镜,选择好放大倍数并调节好焦距,找

到合适的视野;

6)观察荧光标本,确认SHUTTER处于ON的位置,旋转荧光激发块选择

盘,选择所需荧光组件; 7)开启电脑电源;

8)将显微镜光路选择调节钮推至拍摄档;

9)双击电脑桌面图标“DPController”开启拍摄软件;

10) 在Capture选择卡中点击预览按钮经行观察和参数调整,确认后点击拍摄钮进行拍摄,拍摄过程中请避免操作台震动;

11) 如需要添加标尺,请在Scale选择卡中开启并选择相应的放大倍数; 12) 拍摄后,照片管理器DPManager将自动开启,在此处选择对照片进行加工或保存;

13) 使用结束后关闭汞灯电源,待汞灯冷却后方可盖上显微镜防护罩; 14) 用移动设备取走需要的图片,关闭电脑。 2、多功能酶标仪: 1)打开主电源,然后打开机器电源,预热5分钟以上,打开电脑,运行Gene5

软件,或者打开一个设计好的程序;

2)设置激发光波长、发射光波长、滤镜位置、检测灵敏度和光源; 3)布板,排列样品孔和标准孔的位置浓度;

4)读板,输入相关的信息后点击Read,开始读板; 5)将当前看到的数据结果直接导入到Excel表格中;

6)保存数据,使用移动设备取走需要的结果,关闭电脑和机器。

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