ADS系列大孔吸附树脂纯化山楂叶总黄酮工艺研究_董恒颖

量的增加,收率呈增大趋势。由此得出较好的酶用量为每2g底物IPA-7502.5g。但因该因素处于最次地位,从经济效益来考虑,在没有很大的影响收率的条件下,适宜的酶用量可为每2g底物IPA-7502.3g。5.2󰀁底物浓度的影响󰀁从表3列2可以看出:随着底物浓度的变大,反应的收率呈降低趋势,这主要是IPA-750受底物7-苯乙酰胺基-3-乙烯基头孢烷酸高浓度的抑制。适宜的底物浓度为3%。5.3󰀁pH的影响󰀁从表3列3可以得到:随着pH的增大,反应物转化的比较完全,收率提高,但当pH过高时,收率反而下降。增加pH值,实质是增加了反应体系中氨水的浓度,十分有利于反应彻底进行,故转化率提高。但pH值过高,将导致7-苯乙酰胺基-3-乙烯基头孢烷酸和7-AVCA的开环,故收率下降。适宜的pH值为8.0。5.4󰀁温度的影响󰀁从表3列4可以看出:随着温度的升高,收率先增大,当温度为28󰀁和30󰀁时收率最

高,随后收率降低。这主要是因为酶在28~30󰀁之间活性最大,而且比较稳定,综合考虑反应的适宜温度为28󰀁。

利用酶法制备7-AVCA使反应有了很大的改善,避免了有机溶剂的使用,剔除了五氯化磷、二氯甲烷、吡啶,避免了一些副反应的发生,既提高了转化率,又减少了对环境的污染。同时酶法也简化了反应步骤,割除了化学法苛刻的反应条件,降低了能耗,同时又可使酰化酶回收套用,节约了成本。该法具有相当好的社会和经济效益,相信在以后的医药生产中,酶法因其上述优点必将得到越来越广泛的应用。

参考文献

1󰀁胡树琛,周慧殊,毕小玲.7-氨基-3-乙烯基-3-头孢烯-4-羧酸的合成.中国药科大学学报,1993,24(4):246

2󰀁Kameyama,Yutaka.Processforproducing3-alkenylcephemcompound.

JP,WO9855485.1998-12-10

3󰀁柳杏辉,莫章桦,曾红宇.应用固定化青霉素酰化酶IPA-750制备

7-ADCA的工艺研究.精细化工中间体,2003.33(5):37

ADS系列大孔吸附树脂纯化山楂叶总黄酮工艺研究

董恒颖,王󰀁莹

(天津华立达生物工程有限公司,天津󰀁300457)

*

摘󰀁要󰀁目的:研究ADS系列大孔吸附树脂分离纯化山楂叶总黄酮的工艺条件及参数。方法:以树脂对山楂叶总黄酮的吸附量和洗脱率为指标,对ADS系列大孔吸附树脂分离纯化山楂叶总黄酮的工艺条件进行筛选。结果:ADS-8型大孔吸附树脂对山楂叶总黄酮有较好的吸附分离性能,该树脂分离纯化山楂叶总黄酮的最佳工艺条件为:上柱液pH值4.5,

上柱液总黄酮含量为1000mg/L,以流速3BV/h上柱,上样量为100ml(约5BV);所用洗脱剂乙醇体积分数为40%,以2BV/h的流速洗脱,洗脱剂用量为150ml(约7.5BV)。经过上述工艺纯化后,所得产品总黄酮含量达到80%。结论:ADS-8型大孔吸附树脂适于分离纯化山楂叶总黄酮。

关键词󰀁山楂叶,总黄酮,大孔吸附树脂

中图分类号:R917󰀁󰀁󰀁文献标识码:A󰀁󰀁󰀁文章编号:1006-5687(2010)05-0067-05

PurificationprocessforflavonoidsfromhawthornleaveswithADStypeofmacroporousresin

DongHengying,WangYing

(TianjinHulidaBiotechnologycoLtd,Tianjin300457)ABSTRACTObjective:ToinvestigatethetechnicalparametersofpurificationprocessoftotalflavonoidsfromhawthornleaveswithADStypeofmacroporousresin.Methods:Theconditionsofpurificationoftotalflavonoidsfromhawthornleaveswerescreenedwithadsorbingcapacityanddesorptionrateoftotalflavonoidsasindicators.Results:Amongsixtypesofmacroporousadsorptionresinchoosed,ADS-8isthebestresinforseparatingandpurifyingofflavonoidsfromhawthornleaves.Theoptimumconditionsare:theconcentrationofhawthornleavesflavonoidsis1000mg/LatthepHvalueof4.5,flowvelocityis3BV/h,thetreatedamountis100ml(about5BV),theconcentrationofeluentis40%(volumefraction)ethanolwith150ml(about7.5BV),andtheflowvelocityofeluentis2BV/h.AfterpurifyingbyADS-8,thepurityofproductcanreach80%.Conclusion:ADS-8canbeusedinpurificationoftotalflavonoidsofhawthornleaves.

KEYWORDShawthornleaves,flavonoids,macroporousadsorptionresin

*收稿日期:2010-07-0168天津药学󰀁Tianjin󰀁Pharmacy󰀁2010年󰀁第22卷第5期

󰀁󰀁山楂叶为蔷薇科植物山里红(CrataeguspinnatifidaBgeVarmajorNEBr)或山楂(CrataeguspinnatifidaBge)的叶子,含有丰富的黄酮类化合物,如牡荆素、牡荆素-4󰀁-鼠李糖苷、牡荆素-4󰀁,7-双葡萄糖苷、乙酰牡荆素-4󰀁-鼠李糖苷、金丝桃苷和芦丁等,对

[1,2]

心脑血管疾病有显著疗效。对山楂叶黄酮类化合物的提取常采用水提法和醇提法。醇提法乙醇用量大,成本较高,不适合中小企业工业化生产。有关山楂叶总黄酮的纯化多用大孔吸附树脂法,其上柱液的制

[3]

备主要采用醇提法,已经报道的树脂型号有D101和

[4]

HPD-600;而以水提法为基础的大孔吸附树脂纯化工艺却少见报道。由于ADS系列大孔吸附树脂也是分离纯化黄酮类化合物的常用树脂,因此,本研究主要考查ADS系列大孔吸附树脂分离纯化山楂叶总黄酮的性能,为探讨新的制备山楂叶总黄酮的工艺提供技术支持。1󰀁材料与仪器

山楂叶采自山西晋城,挑选后清洗干净,烘箱60~70󰀁烘干,粉碎过20目筛保存备用。ZTC-II型天然澄清剂:天津正天成澄清技术有限公司生产,其A组分用蒸馏水配制成1%的水溶液,预溶胀24h;B组分用1%醋酸溶液配制成1%的溶液,预溶胀24h。芦丁对照品,购于中国药品生物制品检定所;氢氧化钠、盐酸、无水乙醇、亚硝酸钠和硝酸铝均为分析纯。大孔吸附树脂ADS-5、ADS-8、ADS-7、ADS-17、ADS-21,购于天津南开和成科技有限公司。D101大孔吸附树脂,购于天津市海光化工有限公司。

UV-2550PC紫外可见分光光度计:日本岛津公司;AB204-S型分析天平:瑞士METTLERTOLEDO公司;LABOROTA4000旋转蒸发仪:德国Heidolph公司;SHZ-III型循环水真空泵:上海亚荣生化仪器厂;PHSJ-A精密pH酸度计:北京光学仪器厂;玻璃层析柱:󰀁15mm󰀁600mm。2󰀁方法与结果2.1󰀁山楂叶总黄酮的分析方法

[5]

2.1.1󰀁标准曲线的绘制󰀁将芦丁于120󰀁下干燥至恒重,准确称取芦丁0.0146g,用60%(体积分数)乙醇溶解,定容于50m,l得浓度为0.292mg/ml芦丁对照品溶液。

精密量取芦丁对照品溶液0、2.5、5.0、7.5、10.0和12.5ml于25ml容量瓶中,加入5%的亚硝酸钠溶液0.75m,l摇匀,放置6min后加入10%的硝酸铝溶液0.75m,l摇匀,放置6min后加入4%氢氧化钠溶液10.0m,l用30%乙醇定容,摇匀,10min后于510nm处测定吸光度A。得芦丁含量Y(󰀁g/ml)与吸光度X

间的回归方程为:Y=0.0111X+0.0107,r=0.9997,线性范围为0~150󰀁g/ml。2.1.2󰀁样品的测定2.1.2.1󰀁液体样品的测定󰀁先把液体样品定容至适当体积,过滤,弃去初滤液,精密量取滤液1m,l置于50ml量瓶中,加95%乙醇至刻度,摇匀。再从中取2.0ml于25ml量瓶中,依󰀁2.1.1󰀁项下方法测定山楂叶总黄酮含量。2.1.2.2󰀁固体样品测定󰀁取提取物0.10g,用95%乙醇定容至25m,l摇匀,过滤,弃去初滤液,精密量取滤液0.5m,l置于25ml容量瓶中,加95%乙醇至刻度,摇匀。再从中取5.0ml于25ml容量瓶中,依󰀁2.1.1󰀁项下方法操作,测定山楂叶总黄酮含量。

2󰀁2󰀁山楂叶总黄酮的提取和纯化工艺流程󰀁山楂叶󰀁粉碎󰀁沸水提取󰀁过滤󰀁浓缩󰀁ZTC-󰀁澄清剂预处理󰀁过滤󰀁滤液上柱吸附󰀁洗脱󰀁浓缩󰀁干燥󰀁山楂叶黄酮产品。

2󰀁3󰀁山楂叶总黄酮的提取及上柱液的制备󰀁称取粉碎后的山楂叶粉末60.0g置5L三口瓶中,加入蒸馏水1200m,l瓶口分别装置搅拌器和回流冷凝管,微沸提取90min,待烧瓶冷却至室温后,离心分离收集上清液。滤渣再加入1000ml蒸馏水,重复提取1次。合并两次上清液,真空浓缩至原体积的1/2,测量其体积。实验结果,第一次回流提取得到提取液1016m,l第二次提取得到943ml。合并两次上清液,真空浓缩至1000ml。按文献所述方法利用ZTC󰀁澄清剂除去山楂叶总黄酮提取液中的杂质得上柱液。重复测定3次,该上柱液中总黄酮含量平均值为1285mg/L。2󰀁4󰀁树脂的预处理󰀁将ADS-5、ADS-8、ADS-7、ADS-17、ADS-21和D101树脂于乙醇(95%)中浸泡24h,使其充分溶胀,然后用乙醇清洗至洗出液无白色浑浊后,再用蒸馏水洗去乙醇;然后大孔树脂依次用2倍体积5%的氢氧化钠水溶液、1倍体积蒸馏水、2倍体积10%的盐酸洗涤,最后用蒸馏水洗至中性。以乙醇湿法装柱,用95%乙醇在柱上流动淋洗,随时观察流出的乙醇液,至乙醇液与水以1󰀁5体积比混合无白色浑浊为止,然后用大量蒸馏水洗去乙醇。2󰀁5󰀁树脂的筛选2.5.1󰀁吸附率的测定󰀁分别准确称取预处理好的ADS-5、ADS-8、ADS-7、ADS-17、ADS-21、D101湿树脂各1.500g置于250ml三角瓶中,加入预处理好的上柱液50.0m,l放入25󰀁的恒温振荡器上振荡(180r/min)24h,至吸附平衡。定时取样进行分析,按

[7]

[6]

天津药学󰀁Tianjin󰀁Pharmacy󰀁2010年󰀁第22卷第5期69

(1-1)式分别计算树脂对总黄酮的饱和吸附量和吸附率,选出吸附效果较好的树脂。

Q=[(Co-Ce)󰀁VA]/W󰀁󰀁󰀁(1-1)式中Q:饱和吸附量(mg/g);Co:总黄酮的起始质量浓度(mg/ml);Ce:总黄酮的吸附平衡质量浓度(mg/ml);VA:上柱液体积(ml);W:湿树脂质量(g)。2.5.2󰀁洗脱率的测定󰀁用20ml蒸馏水分2次冲洗照󰀁2.5.1󰀁项下所得吸附树脂,然后将冲洗好的树脂置于250ml三角瓶中,准确加入70%乙醇溶液100m,l再放入25󰀁恒温振荡器上振荡(180r/min)12h,过滤,测定滤液中总黄酮的浓度,并按(1-2)式计算洗脱率。

D(%)=CDVD/Q󰀁100󰀁󰀁󰀁(1-2)

式中D:洗脱率,%;CD:洗脱液质量浓度,mg/m;lVD:洗脱液体积(ml);Q:饱和吸附量(mg/g)。2.5.3󰀁树脂对山楂叶黄酮的吸附和解吸性能󰀁大孔吸附树脂由于其理化性质不同,对吸附分离的影响很大。由于树脂极性、孔径、孔容、比表面积等不同,故性质不同。在所选的6种大孔吸附树脂中,ADS-5、ADS-8和D101属于非极性树脂,ADS-17中极性树脂,ADS-7、ADS-21为极性树脂。由表1可知,4种树脂ADS-5、ADS-8、ADS-7和D101对山楂叶总黄酮的吸附性能均较好,总黄酮吸附量高于其他几种。

表1󰀁6种大孔吸附树脂对山楂叶黄酮的吸附性能比较

树脂型号吸附量(mg/g)

ADS-537.1

ADS-841.9

ADS-7ADS-17ADS-2142.2

25.6

19.0

D10140.6

2.6󰀁吸附条件对ADS-8树脂吸附性能的影响

2.6.1󰀁上柱液pH值对ADS-8树脂吸附性能的影响󰀁分别称取ADS-8湿树脂1.500g,置于三角瓶中,加入50.0ml山楂叶黄酮上柱液,调节不同的pH值,然后水浴恒温(25󰀁)振荡4h。测定不同上柱液pH值时ADS-8树脂的吸附量,结果见表3。由表3可以看出,ADS-8树脂吸附山楂叶黄酮的最佳pH值为4.5,此时树脂的吸附效果最好,吸附量分别约为45mg/g。pH值在3.0~4.5范围内,吸附量随pH值的增大而增加;pH值超过4.5后,吸附量随着pH值的增大而减小。因此,本实验选定上柱液的最佳pH为4.5。表3󰀁上柱液pH对ADS-8树脂吸附性能的影响

pH总黄酮吸附量(mg/g)

3.041.2

3.542.9

4.144.8

4.545.5

5.045.0

6.040.3

2.6.2󰀁上柱液流速对树脂动态吸附性能的影响󰀁按照文献的方法测定ADS-8树脂的堆密度为0.91

g/m。l称取处理过的湿树脂20.0g,湿法装柱(15mm󰀁600mm),测定其柱床体积(BV)为22m。l分别用2、3和4BV/h的流速在同一实验条件下进行动态吸附考查,结果见表4。实验结果表明,流速为2BV/h和3BV/h时,山楂叶黄酮类化合物渗漏点出现较晚,而4BV/h时,渗漏点出现较早。这是由于流速较慢,有利于上柱液中的黄酮类化合物在树脂床中进行的粒扩散和膜扩散,但会延长实验操作周期;而流速太快,黄酮类化合物没有被树脂充分吸附,而随上柱液流出;综合考虑,ADS-8树脂吸附纯化山楂叶黄酮的最佳流速为3BV/h。

表4󰀁流速对ADS-8树脂吸附性能的影响

流出液体积

(ml)1060110160210260

2BV/h03.215.827.338.648.153.256.0

总黄酮含量(mg/L)

3BV/h04.818.130.343.956.162.477.0

4BV/h021.635.651.067.272.081.192.0

[8]

选择ADS-5、ADS-8、ADS-7和D101树脂,在

分别与山楂叶总黄酮上柱液吸附2、4和12h后,按照󰀁2.5.2󰀁项下方法对其进行解吸实验,用70%乙醇洗脱,分别测定吸附2、4和12h后总黄酮的吸附量和洗脱率,结果见表2。从表2可知,ADS-7树脂虽然吸附效果很好,但解吸比较困难;ADS-8树脂吸附效果较好,并且解吸时间较短,洗脱率较D101树脂高,故确定ADS-8为分离纯化山楂叶总黄酮的最佳树脂。

表2󰀁4种大孔吸附树脂对山楂叶黄酮的吸附和解吸性能比较

总黄酮吸附量(mg/g)

树脂型号

2h

ADS-5ADS-8ADS-7D101

35.142.838.740.8

4h35.742.841.541.9

12h37.543.145.243.3

2h87.472.014.152.7

4h77.587.614.067.3

󰀁12h

69.290.613.188.6

洗脱率(%)

310360

2.6.3󰀁上柱液浓度对树脂动态吸附性能的影响󰀁称取处理过的湿树脂20.0g,湿法装柱(15mm󰀁600

70天津药学󰀁Tianjin󰀁Pharmacy󰀁2010年󰀁第22卷第5期

mm)。调节上柱液总黄酮的含量为0.50、1.00、1.50g/L,pH值为4.5。分别以3BV/h的流速上样,检测流出液中黄酮的含量,考查上柱液浓度对树脂动态吸附性能的影响,结果见表5。由该表可知,上柱液的浓度越低,树脂处理的溶液量就越大,但浓度太低时,会延长操作周期;上柱液的浓度过大,影响被吸附的黄酮类化合物与树脂的扩散速率,反而使其吸附效率下降。因此本实验上柱液山楂叶总黄酮的浓度以1000mg/L为宜,此时ADS-8树脂的处理量为100ml(约5BV)。表5󰀁上柱液浓度对ADS-8树脂吸附性能的影响

流出液体积

(ml)20406080100120160200240

0.50g/L

0002.33.25.213.216.620.2

总黄酮含量(mg/L)

1.00g/L

002.44.912.920.630.342.152.5

1.50g/L

03.17.618.131.343.957.063.677.9

其洗脱率可达到90%左右。

表7󰀁洗脱剂流速对树脂洗脱性能的影响

洗脱率(%)

洗脱液体积(ml)

1BV/h

50100150200250

63.484.490.693.693.8

2BV/h58.785.590.093.493.6

3BV/h48.084.890.293.293.8

2.7.3󰀁洗脱剂用量对洗脱效果的影响󰀁分别称取处

理过的湿树脂20.0g,湿法装入5根相同的树脂柱(15mm󰀁600mm)。调节上柱液总黄酮含量为1000mg/L,pH值为4.5,以3BV/h的流速上样,上样量为100.0m,l上样后用去离子水洗涤(流速为2BV/h),直至流出液变无色为止。然后分别用50、100、150、200和250ml体积分数为40%乙醇溶液洗脱,洗脱剂流速为2BV/h,收集洗脱液,测定其洗脱率,结果见表8。实验结果表明,洗脱剂的用量越大,洗脱效果越好,但洗脱剂的体积多于150ml时,洗脱效果提高不明显,因此本实验确定洗脱剂用量为150ml(约7.5BV),此时洗脱率约为90%。

表8󰀁洗脱剂用量对洗脱率的影响

洗脱剂用量(ml)洗脱率(%)

5058.7

10085.5

15090.0

20093.6

25096.3

2.7󰀁洗脱条件对树脂洗脱性能的影响

2.7.1󰀁洗脱剂浓度对树脂洗脱性能的影响󰀁分别称取ADS-8湿树脂1.500g,转移到三角瓶中,加入50.0ml山楂叶黄酮上柱液,调节pH值为4.5,然后置于恒温(25󰀁)水浴振荡4h。待吸附平衡后,分离树脂,用20ml蒸馏水分2次冲洗,再将树脂放入三角瓶中晾干。之后分别加入20%、40%、60%、80%和95%的乙醇各40.0m,l置于恒温(25󰀁)水浴振荡4h。收集上清液并测定总黄酮浓度,计算洗脱率。结果见表6。由表6可知,对于ADS-8湿树脂,40%体积分数的乙醇的洗脱效果最好,因此本实验确定洗脱剂的浓度为40%。

表6󰀁洗脱剂浓度对洗脱率的影响

乙醇体积分数(%)

洗脱率(%)

2069.5

4090.0

6086.2

8079.8

9575.5

2.8󰀁山楂叶总黄酮的分离纯化工艺验证及产物纯度

测定󰀁称取20.0g山楂叶粉末,按照上柱液pH值4.5,上柱液总黄酮含量为1000mg/L,以流速3BV/h上柱,上样量为100ml(约5BV);所用洗脱剂乙醇体积分数为40%,以2BV/h的流速洗脱,洗脱剂用量为150ml(约7.5BV)收集所需组分,分别在旋转蒸发仪上浓缩,除去有机溶剂,经冷冻干燥后,得到固体样品0.46、0.51和0.48g纯化产品(重复3次),相应总黄酮含量分别为80.2%、83.4%和81.5%。3󰀁讨论

(1)ADS-8大孔吸附树脂对山楂叶总黄酮水提液具有良好的吸附性能,用其纯化山楂叶黄酮类化合物是可行的。

(2)上柱液经ZTC󰀁澄清剂处理后可以加快大孔吸附树脂对山楂叶总黄酮的吸附速率。

(3)ADS-8大孔吸附树脂纯化山楂叶总黄酮吸附效果好、解吸附条件温和、容易再生、可以多次反复使用,具有较广阔的工业生产应用前景。2.7.2󰀁洗脱剂流速对树脂动态洗脱性能的影响󰀁分

别以1、2和3BV/h的流速对已经吸附过的树脂进行洗脱处理,结果见表7。实验结果表明,在相同的洗脱液体积下,以1BV/h和2BV/h的洗脱剂流速的解吸效果相差不大,为缩短操作周期,本实验选定洗脱剂流速为2BV/h较合适,当洗脱剂的体积达到100ml时,

天津药学󰀁Tianjin󰀁Pharmacy󰀁2010年󰀁第22卷第5期

参考文献

1󰀁郭琦丽,吕武清.山楂叶的研究进展.中国药业,2007,16(22):602󰀁陈四平,臧亚茹.山楂叶的研究进展.承德医学院学报,2003,20

(2):164

3󰀁许英爱,范国荣,高申.大孔吸附树脂分离纯化山楂叶总黄酮的研究.中药材,2007,30(2):228

4󰀁郭永学,李楠,仉燕崃,等.大孔吸附树脂纯化山楂叶总黄酮工艺研究.中成药,2006,28(1):23

71

5󰀁何改.山楂叶黄酮类化合物最佳提取工艺研究.食品研究与开发,

2002,23(1):15

6󰀁张小利,张黎明,王朝臣.山楂叶总黄酮酶解提取液的澄清工艺研究.食品研究与开发,2006,27(10):101

7󰀁周存山,余筱洁,杨虎清,等.油梨皮黄酮提取及大孔树脂纯化.农业工程学报,2008,24(8):271

8󰀁戚向阳,张俐勤,陈维军,等.大孔吸附树脂分离纯化罗汉果皂苷的新方法.农业工程学报,2005,21(9):163

黄连中生物碱的超临界CO2萃取工艺研究

佟若菲,张秋爽,朱雪瑜

1

2

3

*

(1.天津市儿童医院,天津󰀁300074;󰀁2.天津生物化学制药有限公司,天津󰀁300308;󰀁3.天津药物研究院,天津󰀁300193)

摘󰀁要󰀁目的:研究黄连中生物碱的超临界CO2萃取工艺。方法:采用单因素和正交实验的方法,考查萃取压力、萃取温度、萃取时间和物料粒度等因素对黄连中生物碱超临界CO2萃取物得率的影响。结果:超临界CO2萃取黄连中生物

碱影响因素从高到低依次为萃取压力、萃取温度、萃取时间。最佳萃取工艺条件为:萃取压力30MPa,物料粒度40~60目,萃取温度60󰀁,萃取时间1.5h。此条件下黄连中生物碱萃取率为14.24%。结论:该方法提取效率高、稳定、准确、重现性好。

关键词󰀁黄连,生物碱,超临界二氧化碳萃取

中图分类号:TQ46󰀁󰀁󰀁文献标识码:A󰀁󰀁󰀁文章编号:1006-5687(2010)05-0071-03

OptimizationofprocessofalkaloidsfromRhizomaCoptidisbysupercriticalCO2extraction

TongRuofe,iZhangQiushuang,ZhuXueyu

(1.TianjinChildrens'Hospita,lTianjin300074;2.TianjinBiochemicalPharmaceuticalCoLtd.,Tianjin300308;3.TianjinInstitu-teofPharmaceuticalResearch,Tianjin300193)ABSTRACTObjective:TostudythesupercriticalCO2extractionprocessofRhizomaCoptidis.Methods:Theeffectsofextractionpressure,temperature,timeandmaterialgranularityonalkaloidsyieldwereinvestigatedbythesinglefactorandorthogonalexper-iment.Results:Theeffectsofpressure,temperatureandtimedecreasedinsequence.Theoptimumextractionconditionswereasfollows:Theextractionpressureis25MPa,themedicinalmaterialsgranularityis40~60eyegriddle,extractiontemperatureis35󰀁,andextractiontimeis1h.Undertheseconditions,theextractionrateofalkaloidsis14.24%.Conclusion:Themethoddeve-lopedhereisefficient,stable,accurateandrepeatable.KEYWORDSRhizomaCoptidis,alkaloids,supercriticalCO2extraction

󰀁󰀁黄连为毛茛科植物黄连(CoptischinensisFranch)三角叶黄连(CoptisdeltoideaCYChengetHsiao)或云连(CoptisteetaWall)的干燥根茎,性味苦,寒,具有清热燥湿,泻火解毒等功效。其化学成分有异喹啉类生物碱(Isoquinolinealkaloids)、阿魏酸和绿原酸,生物碱类主要为小檗碱、黄连碱、巴马亭、药根碱、表小檗碱及木兰花碱等,一般以小檗碱(berberine)为质控目[1-3]标。黄连在我国󰀁中国药典󰀁2005年版和󰀁四川省药材标准󰀁均有所收载,在日本及欧洲各国已被广为应用。

生物碱类成分多以亲脂性的游离形式存在于植物

中。黄连中简单生物碱在总生物碱中所占比例非常大,而简单生物碱为小分子物质,故提取多采取醇提和

[4-7]

酸提等方法。但这些方法存在提取率低、有机溶剂残留等缺点。醇提过程中的浓缩会造成大量生物碱的损失,酸提取法不仅时间长,而且在提取过程中易造成易氧化成分的破坏与损失,对部分成分有破坏作用。

超临界CO2流体萃取技术(SPE)是一项高新型物质分离精制技术,具有在接近室温的环境下进行萃取,不会破坏生物活性物质,而且操作方便,能耗低,无污染,分离能力高,无溶剂残留等优点。目前该技术已被

[8]

广泛应用于医药、食品等方面,但用于黄连生物碱的

*收稿日期:2010-06-13