正交实验法优化贞芪增免胶囊有效成分的提取工艺

解放军药学学报第２５卷第ｌ期正交实验法优化贞芪增免胶囊有效成分的提取工艺　文章编号：１００８－９９２６（２００９）０１－００１７－０４　中图分类号：Ｒ２８４．０２；Ｒ２８６．０２　文献标识码：Ａ　蔓　－ｌ７・　正交实验法优化贞芪增免胶囊有效成分的提取工艺　葛　欣①，盛　杰，邱建国，孙爱军　（①兰州军区兰州总医院药材科甘肃兰州７３００５０）　摘要：目的以药材指标成分和出膏量为指标优选贞芪增免胶囊有效成分的提取工艺。方法以黄芪甲苷、阿魏酸为指标　成分，采用正交实验法对贞芪增免胶囊有效成分的提取工艺进行优选。结果该工艺合理，有效成分提取率高。　关键词：黄芪甲苷；阿魏酸；提取工艺；正交实验　优选工艺为：黄芪等３味药材，采用回流法（８　倍量７０％乙醇，提取３次，每次１ｈ）；当归等其它药材及醇提取后的药渣采用水煎煮法（１Ｏ倍量水，提取３次，每次ｌｈ）。结论　Ｔｏ　Ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｔｈｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｃｔｉｖｅ　Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｆｏｒ　Ｚｈｅｎｑｉｚｅｎｇｎｆｉ－　ａｎ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ　ｂｙ　Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　Ｔｅｓｔ　ＧＥ　Ｘｉｎ①ＳＨＥＮＧ　Ｊｉｅ，ＱＩＵ　Ｊｉａｎ．Ｇｕｏ，ＳＵＮ　Ａｉ—Ｊｕｎ　（①Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ　ｇｅｎｅｒａｌ　ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｌａｎｚｈｏｕ　Ｃｏｍｍａｎｄ　ｏｆ　ＰＬＡ，Ｌａｎｚｈｏｕ　７３００５０，Ｇａｎｓｕ　Ｃｈｉｎａ）　，ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ａｉｍ　Ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　Ｚｈｅｎｑｉｚｅｎｇｍｉａｎ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ　ｂｙ　ｈｅｒｂ　ｔａｒｇｅｔ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｏｕｐｕｔ　ｏｆ　ｍａｓｔｉｃ　ｗｉｔｈ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｚｈｅｎｑｉｚｅｎｇｍｉａｎ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　ｗｉｔｈ　ａｓｔｒａｇａｌｉｎ　ａｎｄ　ｆｅｒｕｌａｉｃ　ａｃｉｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｉｎｄｅｘ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｐｒｅｐ—　ａｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ　ｗａｓ　ａｓ　ｆｏｌｌｏｗｓ：Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ，ｅｔｃ．ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ｒｅｆｌｕｘｉｎｇ（ａｄｄｉｎｇ　７０％ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｉｇｈｔ　ｔｉｍｅｓ　ｔｈｅ　ｗｅｉｇｈｔ　ｏｆ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔｈｒｅｅ　ｔｉｍｅｓ，１　ｈ　ｐｅｒ　ｔｉｍｅ）；Ａｎｇｅｌｉｃａ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｈｅｒｂｓ　ａｎｄ　ｇｒａｆｔｓ　ｅｘ—　ｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ｒｅｆｌｕｘｉｎｇ　ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ｗａｔｅｒ　ｄｅｃｏｃｔｉｎｇ（ａｄｄｉｎｇ　ｗａｔｅｒ　ｔｅｎｔｉｎｅｓ　ｔｈｅ　ｗｅｉ　ｇｈｔ　ｏｆ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔｈｒｅｅ　ｔｉｍｅｓ，ｌ　ｈ　ｐｅｒ　ｔｉｍｅ）．Ｃｏｎｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｉｓ　ｒｅｌｉａｂｌｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｓ　ｈｉｇｈ．　ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：ａｓｔｒａｇａｌｉｎ；ｆｅｒｕｌａｉｅ　ａｃｉｄ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　贞芪增免胶囊源于某医院依中医传统理论组方　的经验方，由黄芪、当归等６味中药组成，具有扶正　固本，补气滋阴之功效，用于久病虚损、气阴不足；现　代药理实验证实有提高机体免疫功能，保护骨髓和　肾上腺皮质功能，配合手术、放射线、化疗治疗各类　肿瘤，可促进机体正常功能的恢复。汤剂临床应用　多年，疗效显著。拟优选制剂工艺制成胶囊剂，实现　减少服用量，增强疗效、便于携带的目的。　　Ｐ，Ｚｅｎｇ　ＢＹ，Ｓｍｉｔｈ　ＬＡ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｉｐａｒｋｉｎｓｏｎｉａｎ　ａｎｄ　ｎｅｕｒｏ－　［２］　Ｊｅｎｎｅｒｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｍｏｄａｌｌｎｉｌ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＭＰ，Ｉ｜Ｐ．ｔｒｅａｔｅｄ　ｃｏｍｍｏｎ　ｍａｌＴｆｌＯ一・　［５］　王睿，方［６］　刘翼，周筱青，等．单次日服莫达非尼片在中国健康志愿　者的药代动力学［Ｊ］．中国临床药理学杂志，２Ｏ０４，２０（４）：２７８　营，楼雅卿，Ｂｅｒｔｉｌｓｓｏｎ　Ｌ，等．我国汉族健康志愿者异喹呱　羟化代谢缺陷频率及其药代动力学研究［Ｊ］．中国临床药理学　杂志，１９８９，５（１）：５６　ｓｅｔ［Ｊ］．Ｅｘｐ　Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ，２０００，１３３（２）：１７８　［３］　Ｈｅｉｔｍａｎｎ　Ｊ，Ｃａｓｓｅｌ　Ｗ，Ｇｒｏｔｅ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｄｏｓｅ　ｓｈｏｒｔ—ｔｅｒｍ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｍｏｄａｉｎｉｆｌ　ａｆｆｅｃｔ　ｂｌｏｏｄ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ｉｎ　ｐａｒｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ　ｓｌｅｅｐ　ａｐｎｅａ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｔｈｅｒ，１９９９，６５（３）：３２８　［４］　Ｗｏｎｇ　Ｙ　Ｎ，Ｋｉｎｇ　Ｓ　Ｐ，Ｌａｕｇｈｔｏｎ　Ｗ　Ｂ，ｅｔ　ａ１．Ｓｉｎｇｌｅ—ｄｏｓｅ　ｐｈａｒｍａｅｏ－　ｋｉｎｅｔｉｃｓ　ｏｆ　ｍｏｄａｆｉｎｉｌ　ａｎｄ　ｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｉｄａｔｅ　ｇｉｖｅｎ　ａｌｏｎｅ　ｏｒ　ｉｎ　ｃｏｍｂｉ－　［７］　杨积平，许善初．性别对药动学的影响［Ｊ］．中犀药房，２００５，１６　（１５）：１１８８　（收稿１３期：２００７－０８．１５；修回日期：２００８－０１．２１）　ｎａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｈｅａｌｔｈｙ　ｍａｌｅ　ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９８，　３８（３）：２７６　（本文编辑梁爱君）　①作者简介：葛通讯作者：盛欣（１９５２一），女，河北乐亭人，主任药师。研究方向：医院制剂。Ｔｅｌ：（０９３１）８９９４６５４　杰，Ｔｅｌ：（０９３１）８９９４６７５：Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｋｙｙｓｊ＠１６３．ｃｏｒｎ　’　‘１８・　解放军药学学报２００９年２月第２５卷第１期　Ⅱ丌　Ｊ　ＣｈｉｎＰＬＡ　Ｖｏｌ　２５　Ｎｏ　Ｊ　６　２００９　１仪器与试药　表１黄芪等药材乙醇回流提取工艺因素水平表　Ｔａｂ　１　Ｆａｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｈｅｒｂｓ　ｂｙ　ａｌｃｏｈｏｌ　高效液相色谱仪、ＣＳｏ９３０双波长薄层扫描仪，　ＬＣ－６Ａ泵，ＳＰＤ－６ＡＶ紫外检测仪，Ｕ６ｋ进样器（均为　日本岛津公司）；旋转蒸发器ＲＥ．５２Ａ（上海亚荣生　化仪器厂）；黄芪甲苷对照品、阿魏酸对照品（均为　实验水平　：　间　ｌ　５０　６　１．０　ｌ　２　３　６Ｏ　７０　８　１０　１．５　２．０　２　３　中国药品生物制品检定所），甲醇为色谱纯，其他试　剂均为分析纯，药材（购自兰州市黄河药材专业市　场）。　２方法与结果　注：首次加乙醇量需补加２倍量，根据吸醇率实验，吸醇率为　２００％　表２　乙醇提取正交实验设计及结果表　Ｔａｂ　２　Ｄｅｓｉｇｎ　ａｎｄ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ａｌｃｏｈｏｌ　２．１黄芪等３味药材乙醇回流提取工艺优化　２．１．１　黄芪甲苷含量测定　（１）溶液的制备对照品溶液①　精密称取黄芪甲苷对照品，加甲醇制　成０．５ｍｇ・ｍＬ　的溶液，作为对照品溶液。②供试品　溶液按处方精密称取药材，用７０％乙醇回流提取　３次，第１次加１Ｏ倍量，第２、３次加８倍量，回流　２ｈ，分次滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至约　２００ｍＬ，用水定容至２５０ｍＬ。精密量取已定容的乙　醇提取液２０ｍＬ，用乙醚脱脂３次，每次２０ｍＬ。水层　用水饱和正丁醇萃取２～５次，至正丁醇层近无色，　每次２０ｍＬ。正丁醇层用１％ＮａＯＨ溶液洗涤２～５　次，至碱液层近无色，每次２０ｍＬ。正丁醇层水浴蒸　Ｋｌ　Ｋ２　Ｋ　０．５９　０．７３　０．９６　０．６２　０８２　０．７２　０．６　．０．９０　０８９　０．８５　０．７４　０．７８　．干，残渣用甲醇溶解并定容至５ｍＬ，离心１５ｍｉｎ，　Ｋｌ　Ｋ　２　０．２０　０．２４　０．３２　０．２１　０２７　０．２４　０．２０　０．３０　．３　０００ｒ／ｍｉｎ，取上清液作为供试品溶液。③阴性对　照溶液品测定精密称取除黄芪以外的两味药材，同②供　照薄层色谱法¨Ｊ，精密吸取供试品溶液４、　试品溶液的制备方法制备得阴性对照溶液。（２）样　Ｋ　３　Ｒ　Ｋｌ　０．３０　０．２８　０．２５　０．２６　０．１０　０．０４　０．１２　０．０９　２５６　２．４５　２．５３　２．１４　．６　Ｌ、对照品溶液２、４　Ｌ，阴性对照溶４．６ｔｘＬ，分别交　叉点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以氯仿．甲醇．水（６５：　３５：１０）为展开剂，１０℃以下放置下层溶液，展开，取　出，晾干，喷以１０％硫酸乙醇溶液，在１００￣Ｃ加热至　斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻　璃板，周围用胶布固定，在供试品色谱图中，与对照　品色谱图相应的位置上有一相同斑点，阴性对照品　无干扰。扫描波长：ｈｓ＝５３０ｎｍ，　＝７００ｎｍ，测量供　Ｋ２　Ｋ３　Ｋ１　Ｋ，　Ｋ３　Ｒ　２．６４　２．６１　２．５９　２．７１　２．６０　２．７４　２．６８　２．９５　０．８５　０．８２　０．８４　０．７１　０．８８　０．８７　０．８６　０．９０　０８７　０．９１　０．８９　０．９８　．０　Ｏ３　０．０９　０．０５　０．２７　表３黄芪甲苷含量的方差分析表　Ｔａｂ　３　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｖａｒｉａｎｃｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ａｓｔｒａｇａｌｉｎ　试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即　得。　２．１．２正交实验设计按处方称取黄芪等３味药　材，以影响提取率的乙醇浓度、加醇量、回流时间、浸　泡时间等因素为考察对象，每因素３个水平，见表　１。选用Ｌ９（３　）正交设计表，见表２，提取液浓缩并　用水定容至２５０ｍＬ，测定黄芪甲苷含量和出膏　率¨０』，见表３、４，据此优选乙醇提取工艺。　２）－－９．０，Ｆ１注：Ｆｌ－０　１（２０．０５（２．２）＝１９．０，Ｆｌ－０　０ｌ（２２）＝９９．０。　，．解放军药学学报２００９年２月　第２５卷第１期Ｐｈａｒｍ　Ｊ　Ｃｈｉｎ　ＰＬＡ　Ｖｏｌ　２５　Ｎｏ　１　Ｆｅ　２００９　表４　乙醇提取出膏量的方差分析表　Ｔａｂ４　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆｖａｒｉａｎｃｅｉｎｔｈｅ　ｏｕｔｐｕｔ　ｏｆ　ｃ　ｅｘｈ＇ｄｅｄ　ｂｙ￣ｍｌｍｌ　品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。（２）色谱　注：　’ｌ—ｏ　ｌ（２２）　９・０，Ｆ１０　０５（２，２）　１９・０，Ｆ　ｍ０　０１（２，２）　９９・０。　．以黄芪甲苷含量（ｍｇ・ｍＬ　）为评价指标，极差　分析与方差分析结论一致，Ｃ＞Ａ＞Ｄ＞Ｂ，优选为　Ｃ。Ａ　Ｄ：Ｂ，，各影响因素均无显著性差异；以出膏量　（ｇ）为评价指标，极差分析与方差分析结论一致，　Ｄ＞Ｂ＞Ｃ＞Ａ，优选为Ｄ３Ｂ３Ｃ３Ａ２；Ｄ因素的影响具　有显著性意义（Ｐ＜０．０５），其他因素均无显著性意　义。以黄芪甲苷含量为主，出膏量为辅，综合上述分　析结果，并考虑经济成本认为最佳提取工艺为　Ａ　Ｂ：ｃ　Ｄ，，即以７０％乙醇８倍量，浸泡３ｈ，回流提取　３次（单因素分析提取次数），每次１ｈ。　２．１．３工艺验证黄芪等３味药材采用醇提正交　实验优化工艺，提取３批，进行工艺验证。验证结果　表明此工艺合理，见表５。　表５　乙醇提取工艺验证结果　Ｔａｂ　５　Ｒｅｍｉｔｓ　ｏｆ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｕｔｈｅｎｔｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ａｌｃｏｈｏｌ　２．２　当归等药材的水提取工艺优化　２．２．１阿魏酸含量测定（１）溶液的制备①对　照品溶液　精密称取阿魏酸对照品适量，加少量　９５％乙醇润湿溶解，再用５％冰乙酸一５０％乙醇混合　溶媒（以下简称混合溶媒，）制成８０ｐ￣ｇ・ｍＬ　的对照　品溶液。②供试品溶液精密称取当归等药材与乙　醇提取后残渣加水煎煮提取３次，第１次加水１１倍　量，第２、３次加水８倍量，煎煮２ｈ，分次滤过，合并　滤液，滤液浓缩至约２００ｍＬ，用水定容至２５０ｍＬ。精　密量取已定容的水提取液８ｍＬ，用５％碳酸钠溶液　调ｐＨ至中性，离心沉淀１５ｍｉｎ，取上清液，沉淀用蒸　馏水洗涤、离心沉淀２次，合并３次上清液，用稀盐　酸调ｐＨ至１—２，乙醚萃取３次，每次２０ｍＬ，合并乙　醚液，水浴蒸干，残渣用混合溶媒溶解并定容１０ｍＬ，　摇匀。作为供试品溶液。③阴性对照溶液精密称　取除当归外其它药材与乙醇提取后残渣，同②供试　条件及系统适用性色谱柱：Ｃ，。分析柱（３．９ｒａｍ×　１００ｍｍ）；检测灵敏度：０．０２ＡＵＦＳ；流动相：甲醇－５％　冰乙酸（１：４）；流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长：３２０ｎｍ；　柱温：室温；进样：供试品溶液２０ｔｘＬ，对照品溶液　５　，阴性对照溶液２０１．ｚＬ，记录色谱图。见图１，所　有进样溶液均经０．４５　ｍ的滤膜超滤，超声脱气。　阿魏酸保留时间为７ｒａｉｎ左右。分离度（Ｒ）＞１．５，　理论塔板数（凡）以阿魏酸峰计算不低于３　０００，在　供试品色谱图中，与对照品色谱图相应的位置上有　相同保留时问的色谱峰，阴性对照在此保留时间无　色谱峰干扰。　Ｂ　Ｃ　１　Ｉ　＾　＼　１』Ｌ一　√Ｌ　一一　言———　］广——１ｌ＿一　ｔＣｉｉｎ）　Ａ对照品溶液Ｂ阴性对照溶液Ｃ样品１阿魏酸　图１高效液相色谱图　Ｆｉｇ　１　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ　ｏｆ　ｚｈｅｎｑｉｚｅｎｇｍｉａｎ　ｃａｐｓｕｌｅｓ　２．２．２正交实验设计按处方称取当归等药材及　加入回流提取后的药渣，以影响提取率的加水量、提　取时间、浸泡时间等因素为考察对象，每因素３个水　平，见表６。选用　（３　）正交设计表，见表７。提取　液浓缩并用水定容至２５０ｍＬ，测定阿魏酸含量　和　出膏量，见表８、９，据此优选水提取工艺。　表６水提取工艺因素水平表　Ｔａｂ　６　Ｆａｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｌｅｖｅ￣ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｍｏｎｇｈｏＨｃｕｓ　ｂｙ　ｗａｔｅｒ　注：首次补加水２倍量，根据吸水率实验，吸水率为２００％。　以阿魏酸含量（Ｉｘｇ・ｍＬ　）为评价指标，极差分　析与方差分析结论一致，Ａ＞Ｃ＞Ｂ，优选为Ａ　Ｃ　Ｂ，；　以出膏量（ｇ）为评价指标，极差分析与方差分析结　论一致，Ｃ＞Ａ＞Ｂ，优选为Ｃ　Ａ，Ｂ　。但各影响因素　均无显著性差异。以阿魏酸含量为主，出膏量为辅，　综合上述分析结果并考虑经济成本认为最佳提取工　艺为　Ｂ　Ｃ　，即加１０倍量，浸泡３ｈ，水煎煮３次（单　因素分析提取次数），１ｈ／次。　・２Ｏ・　解放军药学学报２００９年２月　第２５卷第１期Ｐｈａｒｍ　Ｊ　ＰＬ４　Ｖｏｌ　２５　Ｎｏ　１　Ｆｅｂ　２００９　表７水提取正交设计及结果表　水，浸泡３ｈ，提取３次，ｌｈ／次水煎煮，提取３批，进　Ｔａｂ　７　Ｄｅｓｉｇｎ　ａｎｄ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ｗａｔｅｒ　表８阿魏酸含量的方差分析Ｔａｂ　８　Ａｎａｌｙｓｓｉ　ｏｆｖａｒｉａｎｃｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆｆｅｒｕｌａｉｃ　ａｃｉｄ　注：Ｆ１—０　ｔ（２２）　９．０，Ｆ１０　ｏ５（２，２）＝１９．０，Ｆｌ—ｏ　ｏｌ（２２）＝９９．０。　。，表９水提取出膏量的方差分析　Ｔａｂ　９　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｖａｒｉａｎｃｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｏｕｔｐｕｔ　ｏｆ　ｉｎａｓｔｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ｗａｔｅｒ　注：Ｆｌ—ｏ１（２．２）　９．０，ＦＩ—ｏ．０５（２，２）　１９．０，ＦＩ—ｏ．ｏ１（２，２）＝９９．０　．２．２．３水提取工艺验证　当归等其它药材及醇提　取后的药渣采用正交实验优化提取工艺用１０倍量　行工艺验证。验证结果表明此工艺合理。　表１０水提取工艺验证结果　Ｔａｂ　１０　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｓｔ　ｏｆｔｅｄｍ０ｌ曜：ｉ衄ｌ　ａｕｔｈｅｎｔｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｘｘｏｎ　ｂｙ　ｗａｔｅｒ　３讨论　３．１黄芪为方中君药，其主要化学成分为黄芪甲苷　和多糖，文献报道黄芪甲苷用６０％乙醇　、７０％乙　醇　回流提取，本实验用Ｌ。（３　）优选后７０％乙醇回　流提取含量最高，且适用于生产，而黄芪多糖水提取　效果好，故采用乙醇回流提取，药渣再水煮的工艺。　３．２　文献报道黄芪甲苷采用双波长薄层扫描　法…、ＨＰＬＣ法　、ＨＰＬＣ—ＥＬＳＤ　测定其含量。因其　没有特征光谱，只是在２０５ｎｍ边缘光谱有吸收，所　以用ＨＰＬＣ法测定，经过实验，用此方法对照品、供　试品、阴性对照黄芪甲苷均有同等吸收值的两个小　峰；在没有配置ＨＰＬＣ—ＥＬＳＤ时，采用双波长薄层扫　描法测定黄芪甲苷含量较理想。　３．３当归¨　含挥发油、阿魏酸等主要活性成分，非　挥发性组分如阿魏酸具抗辐射损伤、提高机体免疫　力、抗氧化和清除自由基作用。阿魏酸水提取效果　较好，故作为水煎煮工艺的优选定量指标。　参考文献：＿＿　－　　国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［ｓ］．北京：化　学工业出版社，２００５．２１２　涂宏海，赵汝海．生血胶囊质量标准研究［Ｊ］．中成药，２００３，２５　（９）：７０８　古丽萍，盛杰，邱建国，等．ＨＰＬＣ法测定红花当归合剂中阿　魏酸的含量［Ｊ］．解放军药学学报，２００４，２０（６）：４６８　张立平．肾炎颗粒剂的制备工艺研究［Ｊ］．中成药，２０００，２２　（８）：５８６　崔新颖．正交试验法提取黄芪甲苷的工艺研究［Ｊ］．北京大学　学报・自然科学版，２００１，２（１）：２９　田　丰．ＨＰＬＣ法测定黄芪中的黄芪甲苷含量［Ｊ］．沈阳药科大　学学报，２０００，１７（１）：４３　国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［Ｓ］．北京：化　学工业出版社，２００５．２１２　阴建，郭力弓．中药现代研究与临床应用（第一册）［Ｍ］．北　京：学苑出版社，１９９４．２８９　（收稿日期：２００７－０１－１７；修回日期：２００８－０１－０５）　（本文编辑狄亚敏）