织锦巴非蛤不同组织及性别总类胡萝卜素含量比较分析

文献标识码：A

文章编号：（圆园18）1001原693202原园165原园5

AnalysisoftotalcarotenoidcontentwithdifferenttissuesorgendersinPaphiatextzleDENGSu-zhen,LIQing-chang,HANFang,ZHANGXiao-lin,渊KeyLaboratoryofMariculturefortheEastChinaSea,MinistryofAgricultureofChina,FisheriesCollege,JimeiUniversity,

Xiamen361021,China冤

CAIMing-yi,ZHANGJing,LIUXian-deAbstract：Inthispaper,thetotalcarotenoidcontent渊TCC冤infivetissuesofPaphiatextzleincludingaxefoot,mantle,ad鄄ductormuscle,gillandgonadwasanalyzed.TheTCCindifferentgenderofPaphiatextzlewerealsocompared.Theresultsshowedthattherearesignificantdifferencesamongthefivetissues渊P<0.01冤exceptthegillandgonad渊P>0.05冤for0.05冤,buttheTCCintestisishigerthanovary渊P<0.01冤.TheresultsofthisstudyrevealthedistributionoftotalcarotenoidcontentinPaphiatextzle.Keywords：Paphiatextzle;tissue;gender;totalcarotenoidTCC,TheTCCinthefivetissuesfromhightolowareasfellows院axefoot,gonad,gill,mantle,andadductormuscle.Thereisnosignificantdifferenceinaxefoot,mantle,gill,adductormuscleforTCCbetweenmaleandfemalePaphiatextzle渊P>类胡萝卜素是一类天然脂溶性的色素，在人体内的代谢物包括视黄醛、视黄醇等（何强强等，）。研究表明类胡萝卜素在增强人体的免疫功2011能等方面有很重要的作用，在预防癌症、心血管疾收稿日期：2017-03-29；修订日期：2017-05-26

病、骨质疏松症及其它慢性疾病方面效果显著（LaRoweetal，2005；Raoetal，2007；吴小芬等，2016）。类胡萝卜素在鱼、虾、贝、蟹等重要的海洋动物中都有分布，特别是牡蛎、扇贝、贻贝JA141672015fjscq05基金项目：福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划（）；福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室开放课（）。作者简介：邓素贞(1994-)，硕士研究生，主要从事贝类遗传育种研究。电子邮箱：823157241@qq.com。通讯作者：刘贤德，博士，教授。电子邮箱：xdliu@jmu.edu.cn。http：//hytb.nmdis.org.cn166海洋通报37卷等双壳纲中含量更高（Ackmanetal，1989；张倩等，2011），主要起到改善卵质、减少胚胎发育死亡率、抗氧化、着色等作用（刘金海等，2002；高前欣，2005）。贝类体内缺乏相应的酶系，自身不能合成类胡萝卜素，其体内丰富的类胡萝卜素来自于所摄食的含有类胡萝卜素的藻类或者微生物，经1995代谢吸收，最后富集在体内（Britton宁，）2009。在虾夷扇贝）和华贵（栉Patinopecten孔扇贝（yessoensisChlamys）etnobilis（al李，）Zhengetal，2010）的闭壳肌组织、三角帆蚌Hyriopsiscumingii）（闻海波等，2012）的外套膜中央膜、边缘膜、性腺、鳃丝及肝脏5种组织以及马氏珠母贝2016（Pinctadamartensii套膜中央膜组织中已有类胡萝卜素含量比较的相关）的鳃、肝胰腺、闭壳肌、外套膜边缘膜与外）（吴小芬等，报道。目前国内有关织锦巴非蛤的研究多涉及生态、生理学特性及食品应用等方面（肖湘等，同组织及性别总类胡萝卜素的研究至今未见报道。2002；王万东，2006；赖增隆，2009），而有关不织锦巴非蛤（Paphiatextzle）属于软体动物门Mollusca）、瓣鳃纲（Lamellibranchia）、帘蛤目Veneroida）、帘蛤科（Veneridae）、巴非蛤属Paphia），主要分布于中国福建沿海、广东、广西和台湾等地（栗志民等，2011）。该贝类营养丰富、肉味鲜美，因而受到广大消费者的喜爱，是我国东南沿海著名的海产经济贝类之一2011）（纪燕如等，本研究分析了雌雄织锦巴非蛤斧足、外套膜、。闭壳肌、鳃、性腺5个组织的总类胡萝卜素含量，并对各组织中的类胡萝卜素含量的差异情况进行比较，探索织锦巴非蛤体内类胡萝卜素分布规律，为下一步织锦巴非蛤的品质鉴定、营养成分分析、加工利用与遗传育种研究提供参考资料。1材料与方法1.1织锦巴非蛤于实验材料2017年2月购自福建省厦门市水产市场，体重2.07（19.10依2.35）g，壳长54.22依1.02））mmmm、壳宽。随机选取（31.57100依1.13个织锦巴非蛤样品用于）mm、壳高（（20.37依本实验分析。http：//hytb.nmdis.org.cn1.21.2.1实验方案随机选取健康的织锦巴非蛤，用手术刀切断织取样锦巴非蛤的前后闭壳肌，打开壳后剪取斧足、外套膜、闭壳肌、鳃和性腺组织。1.2.2采用镜检法鉴定织锦巴非蛤的雌雄。取少许织锦巴非蛤雌雄鉴别织锦巴非蛤的性腺涂在事先滴有一滴蒸馏水的载玻片上，直接放在显微镜（OlympusBX-53）下进行观察。1.2.3总类胡萝卜素的提取20121）总类胡萝卜素提取方法参阅文献研究并略有改动，具体方法（步杨叶欣骤等，无水硫酸钠和适量的无水乙醇）称取织锦巴非蛤各组织0.1g如下：（左右，加入等量的分析纯）充分匀浆；2）将匀浆液用无水乙醇润洗两次匀浆管，一并转移到mL500，用锡箔纸避光密封，在10mL离心管中，加无水乙醇定容至Eppendorfr/min低温离心10min4（益Centrifuge冰箱过夜；53430）用8R4，计（UV-1200公司，），取上清液；MAPADA）测定在4）用紫外分光光度480nm处的吸光值，代入公式算出总类胡萝卜素含量。总类胡萝卜素含量（滋g/g）=AA480480为480nm处吸光度值，伊K伊KV/为常数E1%1cm（伊10G，其中：4），V为提取液体积（mL），E11cm1%为1cm光程的比色杯中品质量g/L质量浓度溶质的理论吸收值（2500），G为样1.3（g）。采用数据处理Excel2013软件进行数据统计分析。数据结果以平均值依标准误（Mean依SE）表示，P<0.05表示有显著性差异，P>0.05表示无显著性差异，采用Excel2013和Photoshop软件作图。2结果与分析2.1将织锦巴非蛤的精巢和卵巢处理后在显微镜下织锦巴非蛤雌雄鉴定结果观察，在40倍物镜下可以看到清晰的精子的形态或者椭圆形的卵细胞2.2织锦巴非蛤不同组织总类胡萝卜素含量差异（如图1所示）。比较分析对100个织锦巴非蛤的斧足（Fo）、外套膜（（（（（2期邓素贞等：织锦巴非蛤不同组织及性别总类胡萝卜素含量比较分析167图1织锦巴非蛤雌雄鉴定注：白色箭头指向精子，黑色箭头指向卵细胞（）、闭壳肌（）、鳃（）及性腺（）5种MaAdGiGo组织总类胡萝卜素含量进行测量，然后按照总的（不分雌雄）、雌性、雄性进行各组织总类胡萝卜素含量比较，结果如表1所示。总的来讲，各组织中总类胡萝卜素的含量依次为：斧足>性腺>鳃>外套膜>闭壳肌，除了鳃与性腺之间没有显著（性差异外），其它各组织之间均存在极显P>0.05著差异（P<0.01），其中斧足中含量最高，为（19.45依0.80）滋g/g，闭壳肌中含量最低，为（）滋g/g。雌、雄各组织中总类胡萝卜素1.71依0.12含量的分布基本一致，但在雄性个体精巢中总类胡萝卜素含量明显高于外套膜中的含量，雌性个体卵巢中总类胡萝卜素含量低于外套膜中的含量。织锦巴非蛤各组织总类胡萝卜素含量雌、雄外套膜4.77依0.40c5.51依0.33c6.20依0.29c46.88%

2.3表1织锦巴非蛤不同组织总类胡萝卜素含量比较结果组织Mean依SE雌性（）斧足16.52依1.31a18.89依1.07a19.45依0.80a40.92%

性腺11.01依1.28b9.87依0.78b78.23%3.61依0.45c鳃6.79依0.81b8.77依0.56b8.16依0.40b48.09%

闭壳肌1.23依0.24d1.66依0.13d1.71依0.12d72.16%

雄性（）Mean依SE总的（）Mean依SE变异系数CV

P<0.05P>0.05注：标有不同小写字母者表示横向组间差异显著（），标有相同小写字母者表示横向组间差异不显著（）。比较结果织锦巴非蛤的斧足（Fo）、外套膜（Ma）、闭AdGiGo壳肌（）、鳃（）及性腺（）5种组织的雌、雄比较结果如图2所示，除了性腺之外，各组织之间的总类胡萝卜素含量没有显著性差异（P>0.05），精巢中的总类胡萝卜素含量显著高于卵巢P<0.01（）。Matsunoetal，等在着色方面具有非常重要的作用（2001；邓敦等，2003；冷向军等，2006）。近年来，随着生活水平的不断提高，消费者在购买食品时越来越重视商品的质量，而色泽又是判断食品质量的一个重要指标。颜色与食品的营养价值有一定的关系，诱人的色泽不但能提高商品的价值，也可增强食用者的食欲，因此研究贝类中类胡萝卜素含量是有必要的。本实验结果表明，斧足中总类胡萝卜素的含量在被测量的5个组织中最高，含量为（19.45依）滋g/g，而在华贵栉孔扇贝（Zhengetal，0.80）性腺中的含量最高（59.90依1.32）滋g/g，在2010http：//hytb.nmdis.org.cn3讨论类胡萝卜素是一种广泛分布于动物、植物、微生物体内的天然色素，对于水产动物如对虾、贝类168海洋通报37卷2118雌雄15129630

斧足外套膜闭壳肌腮性腺图2织锦巴非蛤各组织总类胡萝卜素含量雌、雄比较结果注：**表示两变量之间有极显著差异（P<0.01）。马氏珠母贝（吴小芬等，2016）肝胰腺中含量最高2012（这说明了总类胡萝卜素的生物组织分布存在物种特）91.39依13.09的肝脏中含量更是高达）滋g/g，在三角帆蚌（134.8依61.7（闻海波）滋g/g等，，异性。织锦巴非蛤类胡萝卜素含量在各组织的分布与上述3种贝类物种的研究规律不同，推测与织锦巴非蛤的取样时间有关，本实验样品采集于2月份，此时精巢和卵巢分别处于休止期和滞留退化状态，这可能是导致性腺组织类胡萝卜含量比其他贝类偏低的原因。此外，在被检测的5个组织中除了鳃和性腺之间的总类胡萝卜素含量没有显著性的差异外（P>0.05），其他各组织之间均有极显著的差异（P<0.01），因此类胡萝卜素在织锦巴非蛤体内的分布具有组织特异性。织锦巴非蛤是一种重要的经济贝类，大多雌雄异体，从外形无法区分性别差异，当性发育成熟时，卵巢颜色一般为淡黄色，精巢为乳白色，但这种肉眼观察法并不准确，尤其是非繁殖季节。因而，本研究选用镜检法鉴别织锦巴非蛤的雌雄。研究发现雌雄比例相差较大，推测有两种可能：第一，采样偏少；第二，与波纹巴非蛤类似，存在性逆转。波纹巴非蛤生殖腺组织学的研究证实波纹巴非蛤存在性逆转现象，雌雄比例随季节变化，雄性个2002体）在。此外，本研究结果表明，织锦巴非蛤精巢2-4月份出现频率较高（吴洪流等，中的总类胡萝卜素含量显著高于卵巢，这与虾夷扇贝2010（）李宁，卵巢中的类胡萝卜素含量均显著高于精巢的2009）和华贵栉孔扇贝（Zhengetal，研究结果不相同，但与波纹巴非蛤的研究规律较为类似，推测造成这种结果的原因与织锦巴非蛤生殖周期有关。一般来说，分布于闽南海区的波纹巴非蛤繁殖期在5月中旬至10月下旬，进入11月份后，生殖活动已基本结束，此时多数个体卵巢萎缩http：//hytb.nmdis.org.cn退化（赵志江等，1991；徐小伟，2014），而精巢退化不显著，这可能也是造成卵巢中类胡萝卜素含量较低的原因。有关织锦巴非蛤精巢中类胡萝卜素含量显著高于卵巢的原因还需要进一步的研究。源结论本研究利用镜检法对织锦巴非蛤进行了性别鉴定，利用分光光度法对不同组织及性别的总类胡萝卜素含量进行检测分析，初步揭示了总类胡萝卜素在织锦巴非蛤体内的分布及性别差异情况，为下一步织锦巴非蛤的优良品种选育提供了参考。参考文献AckmanBrittonG,RLiaaen-JensenG,1989.MarineS,biogenicPfanderlipids,H,1995.fats,Carotenoids.andoils.CRCVolumePress.

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（本文编辑：袁泽轶）http：//hytb.nmdis.org.cn