维生素C含量的测定

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维生素C含量的测定

一、

实验目的与原理

维生素C又称抗坏血酸，分子式C6H8O6还原型维生素C是新鲜果蔬营养成分的重要部分。

（一）二氯酚靛酚法：天然的抗坏血酸有还原型和脱氢型两种，还原型抗坏血酸分子结构中有烯醇（COH=COH）存在，故为一种极敏感的还原剂，它可失去两个氢原子而氧化为脱氢型抗坏血酸。染料2,6—二氯酚靛酚钠（C12H6O2NCl2Na）作为氧化剂，可以氧化抗坏血酸而其体身亦被还原成无色的衍生物。2,6—二氯酚靛酚钠盐易溶于水，其碱性或中性水溶液呈蓝色，在酸性溶液中呈桃红色，这个变化用来鉴别滴定的终点。由于抗坏血酸在许多因素影响下都易发生变化，因此，取样品时应尽量减少操作时间，并避免与铜、铁等金属接触以防止氧化。

（二）碘量法：抗坏血酸具有还原性，可被I2定量氧化，因而可用I2标准溶液直接测定。通过消耗碘溶液的体积及其浓度，计算试样中维生素C的含量。化学反应式如下：

KIO3+5KI+3H2SO4=3K2SO4+3I2+3H2O

二、仪器和用品 1、实验材料

果蔬样品、维生素C标准溶液，1%草酸溶液、2,6-二氯靛酚溶液、10%KI溶液，淀粉液、标准KIO3溶液 2、仪器

滴定管、容量瓶、移液管、烧杯、研钵、漏斗、分析天平容量瓶，滴管 三、实验步骤 1.试剂制备与标定

①标准抗坏血酸溶液：精确称取抗坏血酸20mg，用1％草酸溶解于100ml容量瓶中，用1%草酸定容。用移液管移取5ml到50ml容量瓶中，并加1％草酸定容。 ②2,6—二氯酚靛酚溶液配制及标定：称取2,6—二氯酚靛酚即2,6—二氯吲哚酚纳50mg，溶于200ml热水中（热水中溶解52mgNaHCO3），冷却后加水50ml，过滤后盛于棕色药瓶内，避光保存。

标定：吸取标准抗坏血酸溶液5ml，加1％草酸5ml、20ml蒸馏水，以2,6—二氯酚靛酚染料溶液滴定，至桃红色15秒不褪即为终点。滴定的溶液的体积相当于维生素C，计算出每一毫升染料溶液能氧化的抗坏血酸毫克数。

③待测液的制备：取10g磨碎的样品液，加1％草酸溶液稀释后无损地移入100ml容量瓶，加1％草酸溶液定容至2500ml，过滤，备用。 2.样品Vc的测定 （1）二氯酚靛酚滴定法

20g 1%草酸液 样品10g 研成浆状

1%草酸液

定容至100ml容量瓶

移取10ml

过滤

250ml容量瓶，草酸定容 200ml锥形瓶

20ml蒸馏水

滴至终点（淡红色，15s内不褪去）

2,6—二氯酚靛酚

（2）碘量法

将定容后的样品待测液用移液管吸取10ml于碘量瓶，用移液管准确加入

2ml2NH2SO4溶液，1ml10%KI溶液及1ml淀粉液，摇匀加塞，避光静置2min，用标准KIO3溶液滴定至终点（淡蓝色30s内不褪色），记录并计算。 3.计算

（1） 二氯酚靛酚滴定法

(mg/100g)=(V*T*100)/W

式中：V-滴定样品所用的2，6-二氯酚靛酚体积-空白滴定所用的2，6-二氯酚靛酚体积，ml

T-1毫升2，6-二氯酚靛酚染料溶液相当的抗坏血酸毫克数。 W-滴定时吸取的样品重，g （2）碘量法

(mg/100g)=*y*b/(a*x)*100 式中：y-消耗的标准KIO3溶液体积，ml X-移取的滤液体积，ml 标准KIO3溶液相当于 a/b-样品稀释倍数 四、实验数据记录 样液重：

样品为蔬菜 第一次 法一：耗用2，6-二氯酚靛酚体积（ml） 第二次 第三次 平均值 空白 法二：耗用 KIO3体积（ml） 样液重：

样品为橙汁 第一次 法一：耗用 2，6-二氯酚靛酚体积（ml） 法二：耗用 KIO3体积 第二次 第三次 平均值 空白 （ml）

2，6-二氯酚靛酚染料标定 第一次 第二次 第三次 平均值 耗用2，6-二氯 酚靛酚溶液体积（ml）

五、计算过程：

1、2，6-二氯酚靛酚染料标定

1ml 2，6-二氯酚靛酚染料溶液相当的抗坏血酸毫克数

T=（（++）/3）= 2、蔬菜相关计算 二氯酚靛酚滴定法

(mg/100g)=(V*T*100)/W

（1.78-0.15）0.0294100 = 35.91（mg/100g）10.0080/310250碘量法

(mg/100g)=*y*b/(a*x)*100

=

0.088（1.60-0.10）100 33.00（mg/100g）10.0080102503、橙汁的相关计算 二氯酚靛酚滴定法

(mg/100g)=(V*T*100)/W

（0.84-0.15）0.0294100 =14.99(mg/100g)

10.1510/310250碘量法

(mg/100g)=*y*b/(a*x)*100

0.088（0.71-0.10）10013.22mg/100g

10.151010250五、实验讨论

1.实验汇总表 类别 方法 菜叶 橙汁 2,6—二氯酚靛酚滴定法碘量法测得含量测得的含量（mg/100g） （mg/100g） 2.结果讨论

1) 从上表看出菜叶中维生素c含量远远高于橙汁。

2) 用两种方法测定维生素C的含量时，二氯酚靛酚法测定值都比碘量法高，

其原因是二氯酚靛酚存在还原型的脱氢抗坏血酸，与有机物结合在一起，使测定值偏高。

3) 环境温度影响碘量法的灵敏度，在25度下最灵敏，实验时的温度在25

度左右，所以碘量法较为精准。但原料中存在淀粉含量的多少会影响终点，使终点提前出现，所以淀粉含量高的食物不能用碘量法来测定其维生素C含量。

4) 由于两种原料都有颜色，滴定终点颜色偏离，使实验产生偏差。 5）用两种方法法测定维生素C的含量时，取样品时应尽量减少操作时间，并避免与铜、铁等金属接触以防止氧化。