实验二 索氏抽提法测定脂肪的含量
1、实验目的:
索氏抽提法,用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公认的经典方法,也是我国粮油分折首选的标准方法。
2、实验原理
采用索氏抽提法中的残余法,即用低沸点有机溶剂(乙醚或石油醚)回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外,还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质,因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。
3、实验材料、主要仪器和试剂
3.1、实验材料:大豆种子、 滤纸
3.2、仪器
(1)索氏脂肪抽提器(2)干燥器(直径15~18cm,盛变色硅胶)
(3)不锈钢镊子(长20cm)
(5)分析天平(感量0.001g)
(6)称量瓶
(8)烘箱
(9)粉碎机
3.3、试剂
无水乙醚或低沸点石油醚(A.R.)
4、操作步骤
4.1、粉碎样品:
称取3g左右大豆种子进行研磨,研磨后称重(a)。用滤纸包好。
4.2、称取称量瓶的重量(b)
4.3、将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中,注入一次虹吸量的1.67倍的无水乙醚,使样品包完全浸没在乙醚中。连接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒温水浴中进行抽提,调节水温在70~80℃之间,使冷凝下滴的乙醚成连珠状(120~150滴/min或回流7次/h以上),抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止。抽提完毕后,
用长镊子取。
4.4、称重
待乙醚挥发之后,将称量瓶置于70℃烘箱中干燥 ,放入干燥器冷却至恒重为止(记作c)。
5、结果与计算
粗脂肪含量(%)=(c-b)/a ×100
式中:a:样品重量(g)
b:称量瓶重量(g)
c:含有粗脂肪的称量瓶的重量(g)
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