产品说明书
AO/PI双染试剂盒
产品组成：
产品编号 规格 AO染色液 PI染色液 试剂C 说明书
BB-4142 100 -200assays
500ul 500ul 10ml 1
产品简介：
BestBio贝博AO/PI双染细胞凋亡检测试剂盒是采用DNA探针双染细胞核的方法检测细胞的状态。吖啶橙（Acridine Orange，AO）为一种荧光染料，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm，吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，复合物可发出不同颜色的荧光，红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为AO-RNA或单链DNA(F>530nm)。因此，在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。Propidium Iodide是一种DNA结合性染料，其激发和发射波长分别为488nm和630nm，产生红色荧光，但无膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞。因此，在荧光显微镜下观察，正常细胞不能着色，早期凋亡细胞呈微弱红光，晚期凋亡细胞红光加强，坏死细胞呈强红色荧光。
使用方法：
1、 染色缓冲液的配制：
根据样品数按下列比例配制染色缓冲液。 取100μL试剂C加900μL无菌去离子水稀释，混匀即成染色缓冲液。
2、 收集样本细胞，细胞数量在10X105个以内。 3、 用PBS洗涤细胞两次。
4、 用500μL 染色缓冲液将细胞重悬。 5、 加入5ul AO染色液。 6、 加入5ul PI染色液。
7、 轻轻混匀后4℃避光孵育10-20分钟。 8、 用PBS洗涤细胞。
9、 用荧光显微镜或流式细胞仪检测结果。
结果分析 ：
在荧光显微镜下，选用488nm激发光镜检：AO染色正常细胞DNA呈均匀黄色或黄绿色，形态结构正常。当细胞凋亡时，染色质浓缩，细胞核碎裂成点状，被染成大小不一、致密浓染。坏死细胞呈强红色荧光。
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
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本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
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