专利名称：一种新型利用聚合酶链反应体外表达蛋白的方法专利类型：发明专利发明人：徐东昕,邓林红申请号：CN201510383649.0申请日：20150702公开号：CN105018530A公开日：20151104
摘要：本发明涉及一种新型利用聚合酶链反应体外表达蛋白的方法，包括以下步骤：使用基因特异性引物组，用PCR扩增每一个潜在的开放阅读框；第二轮PCR反应在5ˊ端引入了T7噬菌体启动子，在3ˊ端引入T7噬菌体终止子，使用一个通用引物组扩增，得到的PCR产物含有组氨酸标签和T7噬菌体启动子片段和T7终止子片段的DNA；在无细胞反应体系中加入细菌提取物，进行体外蛋白质合成反应，随后采用磁珠法进行蛋白质纯化。本发明的有益效果是：通过PCR给基因增加T7噬菌体启动子和终止子，使其可以在体外成为蛋白质的表达片段。该方法可以快速、高通量表达体外重组蛋白，尤其适合有毒蛋白。
申请人：邓林红,徐东昕
地址：加拿大安大略省士嘉堡市肯尼迪路2368号912户
国籍：CA
代理机构：常州市维益专利事务所
代理人：王凌霄
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