CTAB重要用途
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发布时间：2024-10-23 21:25
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时间：2024-10-31 22:43
CTAB，即十六烷基三甲基溴化铵，是提取DNA配方中的关键成分之一。CTAB提取缓冲液的经典配方包括Tris-HCl提供缓冲环境，防止核酸被破坏；EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子，抑制DNase活性；NaCl提供高盐环境，使DNP充分溶解，存在于液相中；Cβ-巯基乙醇作为抗氧化剂，有效地防止酚氧化成醌，避免褐变，使酚容易去除基因组DNA。
CTAB的使用量为4克，NaCl为16.3克，1M Tris-HCl 20毫升（pH8.0），5M EDTA 8毫升，先用70毫升ddH2O溶解，再定容至200毫升灭菌。冷却后加入0.2-1%2-巯基乙醇，与氯仿-异戊醇（24：1）混合，先加96毫升氯仿，再加4毫升异戊醇，摇匀即可。
在提取RNA的配方中，CTAB的使用量为2%，与2%聚乙烯吡咯烷酮PVP（W/V）混合，加入100 mM Tris-HCl（pH8.0，DEPC处理的水配置），25mM EDTA，5g/L亚精胺Spermidine，以及0M NaCl，2%巯基乙醇（V/V，使用前加入）。需要注意的是，由于在高温灭菌条件下，Tris-HCl要和DEPC发生反应，所以在配制RNA提取缓冲液时，应直接使用DEPC处理的水配制。
