发布网友 发布时间:2024-10-23 21:53
共1个回答
热心网友 时间:5分钟前
盐溶液(比如醋酸铅)使蛋白质沉淀的原因不是蛋白质变性而是盐析,少量的盐溶液改变了蛋白质的溶解度,所以在步骤一的时候,溶剂(水)的量相对不足,所以发生了沉淀,但是当加入足够的溶剂(硫酸铜是饱和了,但是蛋白质还能继续溶解),原来析出的蛋白质重新被溶解.这里可能有一个认识上的误区,所谓饱和硫酸铜溶液,饱和的只是硫酸铜,对于其他溶质,还是可以继续溶解的. 这个实验其实主要的目的是分别蛋白质的盐析和变性是两个不同的过程.如果加入重金属,或者加热,蛋白质沉淀以后,再加入无论多少水,都不会重新溶解. 盐析和变性的本质区别在于是否有蛋白质的二级结构改变. 盐析只是改变了蛋白质分子和水分子的结合方式 变性则发生了蛋白空间结构改变,主要是次级键和二硫键破坏,不过一般不涉及一级结构被破坏. 盐析 蛋白质分子表面多少有一些较不具极性的区域,水分子会在这些非极性区的表面聚集,形成类似『水笼』的构造 (请见下图),以便把蛋白质溶入水中.一旦蛋白质溶液加入硫酸铵,后者吸引了大量水分子,使水笼无法有效隔离蛋白质的非极性区,造成这些非极性区之间的吸引,因而沈淀下来. 变性 蛋白质受到酸、碱、尿素、有机溶媒、重金属、热、紫外光及X-射现等物理或化学的破坏,引起...