高效液相色谱-柱后在线光化学衍生荧光检测法测定辣椒油中4种苏丹红染料

第６期　刘琚，等：高效液相色谱一柱后在线光化学衍生荧光检测法测定辣椒油中４种苏丹红染料　’６２５・　苏丹红是一类人工合成的以苯基偶氮萘酚为主　要基团的偶氮染料，其外观为暗红色或深黄色片状　体，是亲脂性化合物，常用于溶剂、油、蜡、汽油的增　色及鞋、地板的增光。　，也用于生化毒理学研究中　的着色。由于苏丹红染料具有潜在的致癌性，我国　和欧盟都禁止将其添加在食品中　。　苏丹红的测定方法主要有分光光度法　、薄　层色谱法（ＴＬＣ）　…、气相色谱一质谱联用法（ＧＣ—　ＭＳ）　“　、高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）¨　、液相色　谱一质谱联用法（ＬＣ—ＭＳ）　等。ＨＰＬＣ一紫外一可　见光检测器（ＵＶＤ）法是我国和欧盟制定的苏丹红　检测的标准方法　；对阳性样品，欧盟则建议采　用ＬＣ—ＭＳ进行确认。为了提高标准方法的可靠性，　使用ＭＳ检测器是常用的选择，但由于设备昂贵、成　本高，不利于大批量样品的快速测定。通过使用选　择性比ＵＶＤ好的荧光检测器（ＦＬＤ），可改善方法　的可靠性。同时由于ＦＬＤ具有选择性好、灵敏度　高、装置价格低廉等优点，为大批量样品中苏丹红的　快速测定提供了新的技术手段。　为了实现采用ＨＰＬＣ—ＦＬＤ测定苏丹红，需要对　其进行衍生，使其转变为能产生荧光的化学结构。　本文采用实验室自制的程序控制时间／光强光化学　反应器（ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｒｅａｃｔｏｒ，ＰＣＲ）对苏丹红组　分进行在线光化学衍生，建立了ＬＣ分离一在线光化　学衍生一荧光检测法用于测定辣椒油中的苏丹红Ｉ、　Ⅱ、Ⅲ和Ｂ。　１　实验部分　１．１试剂与材料　乙腈（色谱纯，Ｔｅｄｉａ公司），甲酸（分析纯，汕头　市达濠精细化学品有限公司），水为超纯水。　苏丹红标准品为Ｓｕｄａｎ　Ｉ（纯度９７％）、Ｓｕｄａｎ　Ⅱ（纯度９０％）、Ｓｕｄａｎ　ｍ（纯度９６％）、Ｓｕｄａｎ　Ｂ（纯　度９７％），均购自美国Ｓｉｇｍａ—Ａｌｄｒｉｃｈ公司。上述标　准品分别用乙腈配制成质量浓度为１００　ｍｇ／Ｌ的标　准储备液并保存于４℃冰箱中，使用时将储备液用　乙腈稀释至合适浓度。　辣椒油样品购于本地市场。　１．２仪器与设备　岛津液相色谱仪，系统配置为ＬＣ一２０ＡＢ二元　泵、ＳＰＤ—Ｍ２０Ａ二极管阵列检测器（ＰＤＡ）、ＲＦ一２０Ａ　荧光检测器、手动进样器（Ｍｏｄｅｌｓ　７７２５ｉ，Ｒｈｅｏｄ—　ｙｎｅ，ＵＳＡ）及２０　Ｌ定量环。超声波清洗器（昆山　市超声仪器有限公司），隔膜真空泵（天津市津腾实　验设备有限公司），红外快速干燥器（上海市川沙县　明星电子设备厂）。　自制的程序控制时间／光强光化学反应器［２７　由　光源（低压汞灯，１５　ｗ）、聚四氟乙烯（ＰＴＦＥ）反应管　（６　ｍ×０．３　Ｉｔｌｍ，Ｚｅｕｓ　Ｃｏｒｐ，ＵＳＡ）、光反射壁、保　温外壳及可编程控制器（ＰＬＣ）组成。　１．３样品前处理　称取ｌ０．０　ｇ的辣椒油样品于锥形瓶中，加入６０　ｍＬ乙腈后超声辅助萃取３０　ｍｉｎ。冷却后，准确移　取萃取液于容量瓶中，用乙腈定容至１００　ｍＬ，经　０．４５　ｍ滤膜过滤后进样测定，以外标法定量。　１．４分析测定条件　色谱柱为Ａｇｉｌｅｎｔ　ＺＯＲＢＡＸ　ＳＢ　Ｃ１８柱（１５０　ｍｍ×３．０　ｍｍ，３．５　ｍ），柱温为室温。流动相为　乙腈（Ａ）一水（Ｂ）溶液，流速为０．４　ｍＬ／ｍｉｎ。梯度　洗脱程序：０～４　ｒａｉｎ，９０％Ａ；４～８　ｍｉｎ，９０％Ａ～　１００％Ａ；８～２０　ｍｉｎ，１００％Ａ；２０．０１～２３　ｒａｉｎ，　９０％Ａ。进样量２０　Ｌ。实验时，待测组分从色谱柱　流出后进入ＰＤＡ，然后进入ＰＣＲ进行光化学衍生，　最后进入ＦＬＤ进行测定。ＦＬＤ检测的激发波长与　发射波长及ＰＣＲ紫外灯电压等参数见表１。　表１　光化学反应器和荧光检测器工作参数　Ｔａｂｌｅ　１　Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｆｏｒ　ＰＣＲ　ａｎｄ　ＦＬＤ　Ａ　Ｅｘ：ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ；Ａ　Ｅｍ：ｅｍｉｓｓｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　２结果与讨论　２．１流动相的选择　由于苏丹红染料的分子结构中含有羟基，具有　弱酸性，因此调节流动相ｐＨ值至弱酸性，可抑制弱　酸的解离，改善色谱峰的分离度及峰形。实验中比　较了水一乙腈，以及含０．００１％（体积分数，下同）、　０．００５％、０．Ｏ１％、０．０５％、０．１％甲酸的水一乙腈作为流　动相时４种苏丹红染料的分离效果。实验结果表　明，使用添加甲酸的水一乙腈作流动相时，待测组分　的色谱峰形及分离度与水一乙腈作为流动相时基本　一致，因此本实验采用水一乙腈作为流动相。图１为　优化条件下的色谱图。　２．２检测条件的确定　在优化的色谱分离条件下，对紫外光照前、光照　后的４种苏丹红染料的标准溶液进行激发光谱和发　射光谱比较。结果表明，苏丹红Ｉ和苏丹红Ⅱ在紫　・６２６・　３Ｏ　色　谱　３Ｏ　第３０卷　２５　２５　２Ｏ　２Ｏ　ｌ　５　＞　１５　吕　１０　ｌ０　５　５　０　Ｏ　１Ｏ　０　２０　Ｏ　５　１Ｏ　２０　ｔ／ｍｉｎ　｜｛ｍｉｎ　图１苏丹红Ｉ、１１、Ⅲ和Ｂ混合标准溶液的（ａ）ＰＤＡ谱图和（ｂ）ＦＬＤ谱图　Ｆｉｇ．１　（ａ）ＰＤＡ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ａｎｄ（ｂ）ＦＬＤ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｕｄａｎ　Ｉ，Ⅱ，ｍ　ａｎｄ　Ｂ　Ｓｕｄａｎ　Ｉ　ａｎｄ　ＳｕｄａｎⅡ：４　ｍｇ／Ｌ；Ｓｕｄａｎ　Ｉｌｌ：０．５　ｍｇ／Ｌ；Ｓｕｄａｎ　Ｂ：１　ｍｇ／Ｌ．ＰＤＡ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ：４７７　ｎｍ　ｆｏｒ　Ｓｕｄａｎ　Ｉ，４９２　ｎｍ　ｆｏｒ　Ｓｕｄａｎ　ｌＩ．５０２　ｎｍ　ｆｏｒ　ＳｕｄａｎⅢ．５０９　ｎｍ　ｆｏｒ　Ｓｕｄａｎ　Ｂ．Ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＦＬＤ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ，ｓｅｅ　Ｔａｂｌｅ　１．　外光照前无荧光发射，紫外光照后生成有较强荧光　发射的产物；苏丹红Ⅲ和苏丹红Ｂ光照前有弱的荧　光，光照之后荧光大为增强。图２为苏丹红Ｉ和Ⅱ　光化学衍生产物的激发光谱、荧光光谱以及苏丹红　Ⅲ和Ｂ在光衍生前母体和光衍生产物的激发光谱、　荧光光谱。　量一ｓｕ０ｌｕ—　ｂ　３　如　０＿２Ｏ　０　ｌ５　５　０　∞　０．ＩＯ　０．０５　０．００　００　２　Ｏ．４　２２０　２４０　２６０　２８０　３００　３２０　３００　３５０　４００　４５０　Ｏ　３　０　２　０．１　０．Ｏ　２００　２５０　３００　３５０　３５０　４００　４５０　５００　２００　Ｏ０　Ｏ　４　５０　厂———————　］　３　９　－　１０Ｏ　Ｉ｝　　／　一～＼　　一～ｌＩ　５Ｏ　ｌ　Ｏ　０　３５Ｏ　Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ／ｎｍ　４００　Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ／ｎ　４５０　ｆ　５００　Ｆｉｇ．２图２苏丹红染料光照前、光照后的（ａ）激发光谱和（ｂ１发射光谱　（ａ　１　Ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ（ｂ）ｅｍｉｓｓｉｏｎ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　Ｓｕｄａｎ　ｄｙｅｓ　ｂｅｆｏｒｅ　ａｎｄ　ａｆｔｅｒ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　Ｃ０ｎｄｉｔｉｏｎｓ：ＰＴＦＥ　ｔｕｂｅ　ｌｅｎｇｔｈ，６　ｉｖ［；ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ，６５　ｓ；ｌａｍｐ　ｖｏｌｔａｇｅ，２２０　Ｖ　Ｃｕｒｖｅｓ：１．ＵＶ　ｌａｍｐ　ＯＮ；２．ＵＶ　ｌａｍｐ　ＯＦＦ．　第６期　刘　厢，等：高效液相色谱一柱后在线光化学衍生荧光检测法测定辣椒油中４种苏丹红染料　‘６２７・　根据上述实验结果，对４种待测组分进行光化　着管长的增长苏丹红１的荧光信号减弱；而苏丹红　Ⅱ、苏丹红Ⅲ和苏丹红Ｂ的荧光信号则随着反应管　长度的增加而一直增强。考虑到管长为５．０　ｍ时　学衍生、荧光检测条件的优化，设置了ＦＬＤ和ＰＣＲ　的工作参数，其中ＦＬＤ和ＰＣＲ均编成固定的时间　程序进行激发波长和发射波长及灯电压的控制（见　表１）。　各组分均有较强的荧光信号，且管长增长对色谱峰　变宽有一定的影响，最终选择反应管长为５．０　ｍ。　２．３　光化学衍生条件的优化　光照时间和强度、反应介质酸度和反应温度是　光源的辐射强度对光化学反应的速率与效率影　响最大。实验中使用实验室自制的程序控制时间／　光强光化学反应器，通过ＰＬＣ来控制不同时段光源　的电压，从而控制光照强度。在固定流速时，考察了　光化学衍生反应中需要优化的条件，实验中考察了　上述因素对待测组分荧光信号强度的影响。　当流动相流速固定时，光化学反应时问决定于　光化学反应管的长度。实验考察了ＰＴＦＥ光化学反　应管长为２．０、４．０、５．０、８．０　ｍ（对应的光照时问为　不同管长（２．０、４．０、６．０、８．０　ｍ）条件下，灯电压分　别为１３０、１５０、１７０、１８０、２００、２２０　Ｖ时各组分的荧光　信号强度变化，实验结果见图３。结果表明，４种组　分的荧光信号强度在不同管长条件下，基本随着灯　电压的增加而增强（苏丹红Ｉ在管长８　ｍ的情况下　除外）。因此在选择６．０　ｍ管长的条件下，设置紫　外灯的电压为２２０　Ｖ。　２ｌ、４２、６５、８４　Ｓ）时各组分荧光信号强度的变化，结　果见图３。图３中结果表明，在２～５　ｍ的管长范围　内，随着反应管长度的增长即光照时间增加，苏丹红　Ｉ的荧光信号增强；而在６～８　ｍ的管长范围时，随　图３　光照时间及光强对苏丹红荧光信号强度的影响　Ｆｉｇ．３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｌｉｇｈｔ　ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｉｇｎａｌｓ　ｏｆ　Ｓｕｄａｎ　ｄｙｅｓ　为了考察反应介质酸度对苏丹红荧光信号强度　的影响，在流动相中添加０．００ｌ％（体积分数，下　同）、０．００５％、０．０Ｉ％、０．０５％、０．Ｉ％的甲酸，结果见　子结构差异所致。故实验选择流动相中不加甲酸。　图５为光化学反应器温度从１６～４５℃时荧光　信号强度的变化。由图５可知，苏丹红Ｉ和Ⅱ的荧　光信号强度受温度变化影响不大；而苏丹红Ⅲ和Ｂ　图４。苏丹红Ｉ和Ⅱ的荧光强度随酸度变化不大，　苏丹红Ⅲ的荧光强度随酸度的增强而减弱，苏丹红　的荧光信号强度随温度的升高均有减弱，这表明反　应温度升高对这两种组分的光衍生不利。因此，实　验在１６℃条件下进行。　Ｂ的荧光信号随酸度的增强而增强。４种目标物的　荧光强度受酸度影响的差异较大，这可能是由其分　・６２８・　色　谱　第３０卷　Ⅲ和Ｂ的ＲＳＤ分别为２．６％、３．５％、３．２％和３．８％，　可满足实际样品测定要求。　在辣椒油样品中添加待测各组分，计算各组分　的加标回收率，以此评价方法的准确度。在辣椒油　样品中分别添加上述４种苏丹红标准品得到含量分　别为０．８、２、４　ｍｇ／ｋｇ的样品，每个含量水平的样品　平行测定３次，结果如表２所示。实验结果表明，添　加３个不同浓度水平的标准溶液，各组分的加标回　收率范围为８１．３％～１００．４％，可满足微量组分的定　量测定要求。　图４流动相中甲酸含量对苏丹红染料荧光信号强度的影响　Ｆｉｇ．４　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｆｏｒｍｉｃ　ａｃｉｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｎｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｉｇｎａｌｓ　ｏｆ　Ｓｕｄａｎ　ｄｙｅｓ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ａｓ　ｉｎ　Ｆｉｇ．２．　表２辣椒油样品中４种苏丹红标准品的加标回收率　Ｔａｂｌｅ　２　Ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｏｆ　Ｓｕｄａｎ　ｄｙｅｓ　ｓｐｉｋｅｄ　ｉｎ　ａ　ｃｈｉｌｉ　ｏｉｌ　ｓａｍｐｌｅ　％　２．５方法的线性范围及检出限　分别移取适量体积的苏丹红单标准溶液，用乙　腈稀释成一定浓度的混合标准溶液，按上述优化的　实验条件进样测定。以峰面积（Ｙ）对质量浓度（Ｘ，　ｍｇ／Ｌ）作图，所得线性回归方程、线性范围及相关系　数（ｒ　）如表３所示。结果表明，各组分在相应的浓　度范围内有良好的线性响应（　≥０．９９６　３）。　图５　反应温度对苏丹红染料荧光信号强度的影响　Ｆｉｇ．５　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　Ｏｉｌ　ｔｈｅ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｉｇｎａｌｓ　ｏｆ　Ｓｕｄａｎ　ｄｙｅｓ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ａｓ　ｉｎ　Ｆｉｇ．２．　在辣椒油样品中添加低浓度水平的目标物，依　照１．３节、１．４节方法进行样品前处理和测定，以所　得标准偏差（ＳＤ，　＝ｌ０）的３倍对应的浓度为方法　的检出限（ＬＯＤ）；以１０倍标准偏差对应的浓度为　方法的定量限（ＬＯＱ）。表３所示的实验结果表明。　本工作建立的方法对各组分的ＬＯＤ和ＬＯＱ与不经　２．４方法的精密度与准确度　实验以相对标准偏差（ＲＳＤ）来表示方法的精　密度。配制６份在辣椒油中添加待测组分的人工合　成样品，各目标物的含鼍均为０．８　ｍｇ／ｋｇ。按照１．３　节和１．４节所述方法进行样品前处理和测定，计算　荧光信号强度的ＲＳＤ。结果表明，苏丹红Ｉ、Ⅱ、　ＰＣＲ光化学衍生而直接进行ＰＤＡ测定的方法相比　接近或更低，其中苏丹红Ⅲ和Ｂ的检出限要比ＰＤＡ　测定方法低一个数量级，更适合测定较低含量的苏　丹红Ⅲ和Ｂ。　表３　ＨＰＬＣ．ＦＬＤ方法的线性范围、线性方程、线性相关系数（ｒ　）及ＨＰＬＣ－ＰＤＡ／ＦＬＤ方法的检出限和定量限　Ｔａｂｌｅ　３　Ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅｓ。ｌｉｎｅａｒ　ｅｑｕａｔｉｏｎｓ，ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ（ｒ　）ｆｏｒ　ＨＰＬＣ—ＦＬＤ　ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ　ｌｉｍｉｔｓ　ｏｆ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ（ＬＯＤｓ），ｌｉｍｉｔｓ　ｏｆ　ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉ０ｎ（ＬＯＱｓ）ｆｏｒ　ＨＰＬＣ－ＰＤＡ／ＦＬＤ　ｍｅｔｈｏｄ　３结语　利用苏丹红染料在光化学衍生之后产生强荧光　蓑　蓑薷　光衍生具有装置简单、操作简便、重现性好的特点。　３　４　５　６　第５期　刘　瑁，等：高效液相色谱一柱后在线光化学衍生荧光检测法测定辣椒油中４种苏丹红染料　・６２９・　新建立的测定方法灵敏度高，特别是对苏丹红Ⅲ和　苏丹红Ｂ的检出限达０．００９　ｍｇ／ｋｇ和０．０２２　ｍｇ／ｋｇ，与传统的使用ＰＤＡ检测器的方法相比要低　一个数量级，适合于低含量苏丹红染料的测定。　参考文献：　Ｌｉｕ　Ｌ　Ｎ，Ｌｉｎ　Ｔ　Ｌ，Ｃａｏ　Ｙ．Ｆｉｎｅ　ａｎｄ　Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（刘　丽娜，林天乐，曹永．精细与专用化学品），２００５，１３（８）：１６　［２］　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｈｅａｌｔｈ．Ｎｏ．５　Ｂｕｌｌｅｔｉｎ　ｉｎ　２００５　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｈｅａｌｔｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ　Ｒｅｐｕｂｌｉｃ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ（卫生部．中华人　民共和国卫生部公告２００５年第５号）．（２００５—０４—０４）［２Ｏｌ０—　０９－０１　Ｊ．ｈｔｔｐ：∥ｗｗｗ．ｍｏｈ．ｇｏｖ．ｃｎ／ｏｐｅｎ／ｗｅｂ～ｅｄｉｔ—ｆｉｌｅ／　２００６ｌ１　１６１７０２２６．ｄｏｃ　Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ　Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｆ　ＥＣ）Ｎｏ．６６９／２００９　Ｃａｐｉｔ（２ｎ　Ｆ，Ｃａｐｉｔ￣ｍ—Ｖａｌｌｖｅｙ　Ｌ　Ｆ，Ｆｅｒｎ４ｎｄｅｚ　Ｍ　Ｄ，ｅｔ　ａｌ　Ａｎａｌ　Ｃｈｉｍ　Ａｃｔａ．１９９６，３３Ｉ：ｌ４ｉ　Ｐｉｅｌｅｓｚ　Ａ，Ｂａｒａｎｏｗｓｋａ　Ｉ，Ｒｙｂａｋ　Ａ，ｅｔ　ａｌ　Ｅｃｏｔｏｘｉｃｏｌ　Ｅｎｖｉ—　ｒｏｎ　Ｓａｆ，２００２，５３：４２　Ｙｕ　Ｋ　Ｊ．Ｙａｎｇ　Ｆ．Ｌｕ　Ｓ　Ｙ．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｌａｂｏｒａ—　ｔｏｒｙ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（余孔捷，杨方，卢声宇．中国卫生检验　杂志），２００４．１４（５）：５９６　［７］　Ｗａｎｇ　Ｘ　Ｊ．Ｍｉａｏ　Ｈ，Ｗｅｎ　Ｊ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｌａｂｏ—　ｒａｔｏｒｙ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（王鲜俊，缪红，文君．中国卫生检验　杂志），２００５，ｌ２：】４７５　［８］　Ｌａｎｃａｓｔｅｒ　Ｍ，Ｇｏｏｄａｌｌ　Ｄ　Ｍ，Ｂｅｒｇｓｔｒ６ｍ　Ｅ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｊ　Ｃｈｒｏｍ—　ａｔｏｇｒ　Ａ，２００５，１０９０：１６５　［９］　Ｌａｎｃａｓｔｅｒ　Ｍ，Ｇｏｏｄａｌｌ　Ｄ　Ｍ，Ｂｅｒｇｓｔｒ６ｍ　Ｅ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ａｎａｌ　Ｃｈｅｍ，２００６，７８（３）：９０５　［１０］　Ｐａｎｇ　Ｙ　Ｌ．Ｗａｎｇ　Ｈ　Ｙ．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｌａｂｏｒａ－　ｔｏｒｙ（庞艳玲，王怀友．分析试验室），２００８，２７（１）：６Ｏ　Ｗｕ　Ｈ　Ｑ．Ｈｕａｎｇ　Ｘ　Ｌ．Ｈｕａｎｇ　Ｆ．ｅｔ　ａ１．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ（吴惠勤，黄晓兰，黄芳，等．分析测　试学报），２００５，２４（３）：１　［１２］　Ｌｉｎ　Ｚ　Ｇ，Ｔａｎ　Ｊ，Ｃｈｅｎ　Ｍ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　（林竹光，谭君，陈美瑜，等环境化学），２００６，２５（５）：６３９　［１３］　Ｚｈａｎｇ　Ｓ　Ｂ，Ｈａｎ　Ｃ，Ｌｉｕ　Ｊ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＣｈｉｎｅｓｅ　Ｉｎｓｔｉ—　ｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（张胜帮，韩超，刘继　东，等．中国食品学报），２００９，９（２）：１８７　［１４］　Ｃｏｒｎｅｔ　Ｖ，Ｇｏｖａｅ￣Ｙ，Ｍｏｅｎｓ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｊ　Ａｇｎｃ　Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍ，　２００６，５４（３）：６３９　［１５］　Ｅｒｔａ§Ｅ，ＯｚｅｒＨ，Ａｌａｓａｌｖａｒ　Ｃ．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍ，２００７，１０５（２）：　７５６　［１６］　Ｚｈｅｎｇ　Ｍ　Ｍ，Ｗｕ　Ｊ　Ｈ，Ｌｕｏ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（郑明明，吴剑虹，骆丹，等．色谱），　２００７，２５（５）：６１９　［１７］　Ｙｕ　Ｃ　Ｈ，Ｌｉｕ　Ｑ，Ｌａｎ　Ｌ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｊ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ　Ａ，２００８．　１１８８（２）：ｌ２４　［１８］　Ｆａｎ　Ｙ　Ｃ，Ｃｈｅｎ　Ｍ　Ｌ，Ｓｈｅｎｔｕ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ａｎａｌ　Ｃｈｉｍ　Ａｃｔａ，　２００９，６５０（１）：６５　［１９］　Ｘｕ　Ｚ　Ｘ，Ｗａｎｇ　Ｓ，Ｆａｎｇ　Ｇ　Ｚ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ，２０１０，　７１：３９７　［２Ｏ］　Ｒｅｂａｎｅ　Ｒ，Ｌｅｉｔｏ　Ｉ，Ｙｕｒｃｈｅｎｋｏ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｊ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ　Ａ，　２０１０，１２１７（１７）：２７４７　［２１］　Ｗａｎｇ　Ｐ，Ｇｕｏ　Ｓ　Ｆ，Ｊｉｎｇ　Ｔ，ｅｔ　ａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｒｏ—　ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（王鹏，郭少飞，荆涛，等．色谱），２００８，２６　（３）：３５３　［２２］　Ｍｕｒｔｙ　Ｍ　Ｒ　Ｖ　Ｓ，Ｓｒｉｄｈａｒａ　Ｃｈａｒｙ　Ｎ，Ｐｒａｂｈａｋａｒ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．　Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍ，２００９．１１５（４）：１５５６　［２３］　Ｂｏｔｅｋ　Ｐ，Ｐｏｕｓｔｋａ　Ｊ，Ｈａｊ￣ｌｏｖａ　Ｊ．Ｃｚｅｃｈ　Ｊ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉ，２０１０　２５（１）：１７　［２４］　Ｈｏｕ　Ｘ　Ｌ，Ｌｉ　Ｙ　Ｇ，Ｃａｏ　Ｓ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ，２０１０，　７１：１３５　［２５］　ＧＢ／Ｔ　１９６８１—２００５　［２６］　Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ．ＮＥＷＳ　Ｎｏｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ：０３／９９［２０１　ｌ一　１１一ｌＯ］．　ｈｔｔｐ：＃ｗｗｗ．ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ．ＣＯＩｎ．ｃｎ／ｄｏｗｎｌｏａｄ／　ｄｏｗｎｌｏａｄＨＴＴＰ．ａｓｐ＇？ｉｄ＝１　１０２８９　［２７］　Ｌｉｕ　Ｊ，Ｆａｎｇ　Ｆ，Ｃｈｅｎ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ　Ａｎａｌ　ｙｓｉｓ（刘瑁，方芳，陈婷，等分析测试学报），２０１１，３０　（１０）：１１００