金菠萝种苗组织培养技术

金菠萝种苗组织培养技术

作者：符运柳 徐立 李志英

来源：《现代农业科技》2016年第01期

摘要 根据对凤梨科植物离体保存和种苗繁育的生产实践经验，介绍了菠萝优良品种金菠萝组培苗一、二级苗的种苗生产技术，以促进该菠萝优良品种的推广种植。 关键词 金菠萝；育苗技术；组织培养

中图分类号 S668.3 文献标识码 B 文章编号 1007-5739（2016）01-0121-02 Tissue Culture Technology of Ananas comosus（L.）Merrill Seedling FU Yun-liu XU Li LI Zhi-ying *

（Institute of Tropical Crop Genetic Resources，Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences，Ministry of Agriculture Key Laboratory of Crop Gene Resources and Germplasm

Enhancement in Southern China & Key Laboratory of Tropical Crops Germplasm Resources Genetic Improvement and Innovation，Danzhou Hainan 571737）

Abstract Based on the practical experience in the production of bromeliads vitro conservation and seed breeding，the seedling cultivation technology on quality of Ananas comosus（L.）Merrill tissue culture were introduced to promote the pineapple cultivars planted.

Key words Ananas comosus（L.）Merrill；seedling technology；tissue culture

菠萝[Ananas comosus（L.）Merrill]是我国热带、亚热带地区的四大水果之一[1]。传统的菠萝繁殖主要靠各种芽苗（冠芽、裔芽、吸芽和块茎芽）进行无性繁殖，这类菠萝种苗的获得，需要在果实采收后3～4个月，从老的菠萝植株上生长出的新芽，其繁殖系数低，生长速度慢，优良的遗传性状不稳定[2-3]，且容易将母体的病虫害带给幼苗，对生产不利，因此可以利用组织培养技术提高繁殖系数，加快获得优良品种[2，4]。

金菠萝是近年来引进的一个优良的鲜食菠萝品种，其果形端正、果眼比较浅且容易去皮、果肉颜色金黄、味道可口，消费者对其青睐有加。该品种具有抗病性强、耐寒、耐旱、果实大小均匀、产量高且稳产、耐运输、耐贮存等特点。另外，该品种早熟性好，仅比巴厘种晚熟1周，且人工催花效果非常好，结果和成熟度一致性好，适合机械化采收，为目前大力发展的优良新品种[5]。

为加快该品种在海南省乃至热区的推广种植，笔者等人研究了该品种的种苗组织培养技术及假植栽培技术，下面就该技术的研究过程进行叙述。

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1 菠萝优良品种推广的重要性

我国适宜种植菠萝的地方只有广东、广西、云南三省区的一部分及海南全省。然而，菠萝品种单一，品质档次不高，品种结构的不合理，销售市场过分集中，过量使用激素和种植技术不规范等问题已经严重影响了海南乃至我国菠萝产业的健康发展。

据了解，海南地区菠萝出园价，不同品种差价很大，台农16号菠萝一般比巴厘种高2～3倍。种植巴厘种菠萝产值为9万～12万元/hm2，而台农16号则为27.0万～31.5万元/hm2， 2种菠萝种植成本仅相差约3万元/hm2[6]。目前，我国种植的菠萝品种主要是20世纪50—70年代选育的，栽培品种类型较少，且优质菠萝品种不多。生产上主要的栽培品种有皇后类的“巴厘”种、“神湾”种；卡因类的“无刺卡因”种和近年从我国台湾省引进的一些杂交品种，其中“巴厘”种（菲律宾种）的栽培面积约占菠萝总面积的80%以上。

为促进海南省乃至我国菠萝产业的健康发展，在开拓菠萝市场的基础上，应加速对菠萝品种的改良，同时要建立标准化的生产示范基地，以促进优良品种的推广种植。 2 金菠萝种苗组织培养技术 2.1 取材及消毒

2.1.1 取材。在中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所果树中心正常管理的种源圃中选取品种纯正、生长健壮、无病虫害的金菠萝母株的健壮吸芽。

2.1.2 消毒。将吸芽剥弃多余叶片后用流水冲洗干净，在洗涤剂溶液中浸泡10～30 min，接着用流水将洗涤剂冲洗干净，然后放超净工作台上用吸水纸吸干外植体表面的水分后放入0.1% HgCl2溶液中，加入几滴吐温，消毒12 min，最后用无菌水冲洗3～5次。 2.2 组织培养与植株再生

用灭好菌的手术刀，剥弃消毒好的外植体的外层叶片，视外植体大小，将消毒好的外植体纵切成3～4块，接种于MS+6-BA 3.0～5.0 mg/L+NAA 0.05～0.20 mg/L+蔗糖30 g/L+卡拉胶6.0 g/L的培养基上，10 d后，从叶腋出萌发出腋芽（图1a），继代2次后，形成大量丛生芽（图1b）。将丛生芽切割成小块，转接到培养基MS+6-BA 0.5～1.0 mg/L+NAA 0.05～0.10 mg/L+蔗糖30 g/L+卡拉胶6.0 g/L上进行培养，25～30 d继代1次，8～10代后，切取约2 cm高的单芽，接种于生根培养基1/2MS+NAA 0.1～0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+卡拉胶6.0 g/L上，7 d后开始发根，20～25 d后根基本长齐，形成完整植株（图1c）。

上述培养基的pH值均为5.8～6.0，培养室温度为（28±1）℃，光照时间10～12 h/d，光照强度30～40 μmol/m2·s。 2.3 基质选择及处理

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组培苗假植采用土壤栽培是最经济有效的栽培措施，但是，由于土壤易携带病毒和害虫，利用土壤育苗，一方面易使组培苗假植期受病毒及害虫的侵染，另一方面，由于土壤比较重，对于移植大田、营养杯回收再利用也有诸多不便。而利用椰糠作为栽培基质代替传统的土壤栽培，既避免了土传病虫害的传播蔓延，又不破坏水土，且由于椰糠的持水量高，因而可减少管理养护的成本[5-7]。因此，笔者选用以椰糠为主、结合有机肥、草炭等进行配比的栽培基质，对金菠萝组培苗进行假植栽培。

结合多年的凤梨科植物育苗经验，笔者在菠萝育苗前对使用的基质进行了预处理：将沤熟的椰糠、有机肥、草炭等按所需比例进行配比，混匀，然后用杀菌剂溶液淋透，盖膜捂3～5 d后揭开膜，用清水淋透后种苗[8]。 2.4 炼苗移栽

2.4.1 炼苗。为提高菠萝组培苗的移栽成活率，在移栽前，可适当进行炼苗。将生根苗从培养室移到荫棚（遮荫度为70%～80%）放置，一般炼苗3～4 d即可[9-10]。

2.4.2 移栽。将经过炼苗后的菠萝生根组培苗从培养容器内取出，用清水洗干净根部培养基后，放入多菌灵杀菌剂600倍液中浸泡30～60 s，将组培苗进行分级后移栽到装好基质的营养杯中，然后将营养杯整齐的摆放到育苗畦中，淋足定根水，在畦上搭建小拱棚，然后加盖塑料薄膜与遮阳网进行遮荫、保温保湿。移栽后的前15 d注意遮荫保湿。待小苗开始发新根后，即可薄施水肥，以促进幼苗的生长（图1d）。 2.5 管理

菠萝组培苗移栽7 d内见干浇水，约15 d后揭去顶上的遮盖物。待小苗开始发新根时（移栽15～20 d后），喷施营养液，每周1次，浓度为0.1%，小苗开始抽新叶后，营养液浓度可加大至0.2～0.3%。

在病虫害防治方面，由于采用无土栽培基质育苗，有效地避免了苗期土传病虫害的危害，因此，育苗期间用药多为杀菌类药。为保证和提高种苗大田移栽的成活率，至少在出圃前10 d应停止施肥，并配合控水和控光以达到炼苗要求[11]。 3 育苗存在的问题及建议

菠萝是高度杂合体，生产上主要用菠萝营养体抽生的各类芽（冠芽、裔芽、吸芽、蘖芽等）作为种苗进行繁殖。但是，靠营养体繁殖的繁殖系数较低，且易发生菠萝叶，果实的变异和芽变，导致种质退化，还容易将母体的病虫害带给幼苗，因此这种方法既不利于优良品种的推广应用，也不利于菠萝品种的调整和改良。

利用组织培养技术繁育种苗，可在短期内繁育出批量生产性状一致的种苗，满足生产上的需求。利用组织培养技术繁育菠萝种苗已有不少报道，虽然不同的菠萝品使用的培养基配方不

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一样，但都建立了高效的快繁技术体系，给生产上提供了有力的技术支撑，然而菠萝组培苗移植到大田后，成活率非常低，仅为20%～30%，这大大限制了菠萝优良品种的推广种植[6]。 金菠萝是近年来引进的优良品种。该品种果实外观和综合评价好，是加工和鲜食均适宜的品种。早熟性好，仅比巴厘种晚熟1周，人工催花效果非常好，结果和成熟度一致性好，适合机械化采收，为目前大力发展的优良新品种。

为降低种苗生产成本，加速该优良品种的推广种植，笔者等通过对组织培养技术、田间育苗基质配比处理及植后管理等育苗环节进行研究，将成活率提高到90%以上，对该品种的推广种植起到了很好的促进作用。 4 参考文献

[1] 郑加协，李华东，甘永辉.密宝菠萝组织培养及低成本快繁技术的研究[J].果树学报，2005，22（1）：27-30.

[2] 陈健妙，甘铨，刘联.食用菠萝的组织培养和快速繁殖[J].植物生理学通讯，2001，37（5）：427-428.

[3] 罗丽霞，程萍.剥粒菠萝组织培养及快速繁殖的研究[J].植物学通报，2002，19（2）：231-233.

[4] 郑成木，刘**.热带亚热带植物微繁殖[M].长沙：湖南科学技术出版社，2001. [5] 唐仕华.菲律宾椰衣纤维产销前景看好[J].世界热带农业信息，2000（5）：21-22. [6] 王永壮，符运柳，刘以道，等.香蕉育苗技术的推广应用[J].热带农业科学，2011（8）：14-16.

[7] 陶富.我国菠萝产业发展现状及对策[J].中国园艺文摘，2011（5）：44-45. [8] 孙霞，亓翠英，秦燕.生姜通过器官发生途径体外再生的研究[J].北方园艺，2012（19）：121-123.

[9] 张继友，景晓辉，吴伦英，等.热研4号王草原生质体的制备[J].分子植物育种，2015（4）：915-918.

[10] 李志英，张学全，张鲲，等.蜻蜓凤梨中EIN3的克隆及其表达分析[J].分子植物育种，2015（1）：139-144.

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