一种DNA连接酶活性测定方法

（12）发明专利申请

（21）申请号 CN201410502851.6 （22）申请日 2014.09.28

（71）申请人 南京诺唯赞生物科技有限公司

地址 210014 江苏省南京市玄武区孝陵卫双拜巷78号D座

（10）申请公布号 CN104278090A

（43）申请公布日 2015.01.14

（72）发明人 徐晓昱;王静

（74）专利代理机构 南京正联知识产权代理有限公司

代理人 王素琴

（51）Int.CI

权利要求说明书 说明书 幅图

（54）发明名称

一种DNA连接酶活性测定方法

（57）摘要

本发明公开了一种DNA连接酶活性测定方

法，所述方法包括以下步骤：首先根据单链DNA模板合成毗连的两段引物，其中按引物的5’至3’方向来说，5’方向的引物的3’端与3’方向的引物的5’相邻，并且5’方向的引物为正常引物，而3’方向的引物为3’末端被磷酸化的引物；然后将这两段引物与单链DNA模板退火，以形成的单链DNA模板/正常引物-3’末端磷酸化引物复合物为底物，在DNA连接酶存在下进行连接

反应；随后以连接反应的产物为底物，在具有链置换活性的聚合酶作用下进行聚合反应，然后检测双链DNA或单链DNA的相对量，并以该相对量为基础推导出DNA连接酶的活性程度。本发明方法无放射性污染；操作简单快速；并且可以对DNA连接酶活性进行定量的检测分析。

法律状态

法律状态公告日2015-01-14 2015-01-14 2015-02-11 2015-02-11 2016-09-07 2016-09-07 2017-06-06 2017-06-06 2020-08-07

法律状态信息

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权利要求说明书

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说明书

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