COPD患者氧化应激与糖皮质激素受体水平的相关性

ＣＯＰＤ患者氧化应激与糖皮质激素受体水平的相关性

【摘要】 目的探讨不同时期COPD患者全身氧化应激水平的变化及其与糖皮质激素受体的相关性。 方法测定40例急性加重期COPD患者（A组）、30例稳定期COPD患者（B组）、15例健康吸烟者（C组）血浆中MDA、GSH含量，SOD活性，及外周血有核细胞糖皮质激素受体水平。 结果①A组、B组、C组间：①血浆MDA含量呈下降趋势；②血浆GSH含量、SOD活性呈上升趋势；②外周血有核细胞GR水平呈递增趋势；③GR与血SOD、MDA、GSH的相关系数分别为0．593、-0．561、0．663， P ＜0．05。 结论①COPD患者在全身水平存在氧化/抗氧化失衡，尤以急性加重期患者更为明显;②COPD患者氧化应激增加是导致外周血有核细胞糖皮质激素受体水平下降的原因之一。

【关键词】慢性阻塞性肺疾病；氧化应激；糖皮质激素受体；诱导痰

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种气流受限为特征的疾病，气流受限不完全可逆，呈进行性进展，与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关[1]。氧化应激是导致COPD发生发展的重要机制之一，氧化应激与COPD气道损伤、气道炎症密切相关。近年来糖皮质激素在COPD尤其是重度-极重度COPD急性加重期中的应用越来越受到重视。然而，糖皮质激素在COPD患者中的疗效远较哮喘差，说明在COPD患者中可能存在某种机制导致糖皮质激素抗炎作用减弱。有学者认为这可能与COPD患者氧化应激水平增加有关，氧化应激导致糖皮质激素受体（GR）下调，从而减弱了糖皮质激素的抗炎效果。

1 对象与方法

1．1研究对象 受试者来源：2004年10月至2007年03月江门市中心医院及中山大学第一附属医院呼吸科门诊及住院的COPD患者70例（急性加重期患者40例，稳定期患者30例）及健康吸烟组15例。COPD诊断符合2004年诊断标准及急性加重期诊断标准，且所有COPD患者4周内未使用过激素及抗氧化治疗。健康对照者中吸烟指数大于200年支者为吸烟者。

1．2 研究方法 1．2．1 丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥法测定，还原型谷胱甘肽（GSH）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性均采用化学比色法测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所，步骤严格按试剂盒操作说明书进行测定。外周血有核细胞糖皮质激素受体采用放射配基结合试验法测定。

1．3 统计学方法 各组数据以均数±标准差（ x ±s ）表示，采用单因素方差分析（ANOVA）、 t 检验（LSD- t 检验）、Pearson相关分析；所有数据的计算、统计分析用SPSS12．0软件处理， P ＜0．05为有统计学意义。

2 结果

2．1 一般情况 最终完成痰诱导且标本合格，急性加重期组（A组）有33例，稳定期组（B组）有27例，吸烟对照组（C组）有14例；三组间性别、年龄无差异（ P ＞0．05），三组间吸烟指数无差别（ P ＞0．05）。见表1。

2．2 全身氧化应激水平变化 血浆中MDA水平A组、B组＞C组，A、B组间差异无统计学意义（ P ＞0．05）；血浆中GSH水平C组＞B组＞A组；血浆中SOD水平C组＞B组＞A组，各组间差异有统计学意义（ P ＜0．05）。

2．3 外周血有核细胞糖皮质激素受体水平变化 A组、B组、C组三组外周血有核细胞GR水平A组＜B组＜C组，分别为(1 565±719)结合单位、(2 069±488)结合单位、(2 739±926)结合单位，各组间差别有统计学意义（ P ＜0．05）。

2．5 氧化应激与糖皮质激素受体的简单相关分析 GR与血SOD、MDA、GSH的相关系数分别为0．593、-0．561、0．663， P ＜0．05。

3 讨论

COPD患者肺组织长期暴露于内源性或外源性产生的氧化剂中，同时体内抗氧化酶活性下降、非酶性抗氧化剂减少，从而导致体内氧化应激增强。氧化应激不仅直接损伤肺组织，而且可使抗蛋白酶氧化失活、炎症细胞渗出、炎症介质基因表达，从而促进COPD的发生发展。我们通过测定血浆MDA、GSH、SOD的水平来探讨COPD患者全身氧化应激水平的变化。结果发现在COPD加重期患者与稳定期患者比较时，血浆GSH、SOD均较稳定期患者下降，说明COPD加重期患者在气道局部和全身氧化应激水平较稳定期高，这与Santos MC和Kostikos,K[2，3]的研究结果一致；在稳定期COPD患者与吸烟对照组的比较中

血浆抗氧化剂和抗氧化酶活性（GSH水平和SOD活力）均较吸烟对照组低，而血浆脂质过氧化产物MDA水平较吸烟对照组增加，说明COPD稳定期患者全身氧化应激水平较吸烟对照组高。综合以上结果，说明COPD患者全身水平存在氧化/抗氧化失衡，尤以急性加重期患者更为明显。

糖皮质激素受体是一种细胞内的可溶性蛋白，与糖皮质激素（GC）呈高亲和力和专一性的结合，是GC发挥重要生理和药理作用的中介物。呼吸系统许多疾病如哮喘、COPD等都使用GC进行治疗，但它们之间疗效并不一致，不同个体间疗效亦不一致，有些患者能获得较好疗效，而有些患者却不能达到预期效果。GR数量的改变与这些疾病的激素疗效存在一定的关系。一般来说，GR的含量与GC的反应成正比。糖皮质激素受体数量的减少是导致糖皮质激素疗效减弱的重要机制。我们研究发现在吸烟健康者、COPD稳定期、加重期患者外周血GR水平呈下降趋势，说明了不同时期COPD患者GR水平的变化规律。吸烟可能是导致GR水平下降的原因之一，Livingston [4]在研究吸烟对GR的影响中发现吸烟可以导致α型GR减少。但在吸烟健康者、稳定期、加重期COPD间吸烟指数无差别的情况下，GR水平仍呈下降趋势，说明除了吸烟以外存在其他因素导致GR水平的下降，氧化应激可能是其中的原因之一。本研究在研究氧化应激与糖皮质激素受体的关系时，通过Pearson相关分析发现COPD患者外周血有核细胞糖皮质激素受体水平与血浆MDA负相关，而与血浆中GSH及SOD正相关，说明COPD患者氧化应激增加是导致外周血有核细胞糖皮质激素受体水平下降的原因之一。关于氧化应激导致糖皮质激素受体水平下降的机制目前尚不清楚，在哮喘的研究中发现NF-κB、AP-1 的激活，炎症介质、炎症因子的释放增加可能是导致GR表达下降的原因；也有可能是氧化损伤直接导致GR水平下降。但这些方面的机制尚不确切，有待于进一步研究。

参考文献

［1］Rabe KF,Hurd S,Anzueto A et al.Global strategy for the diagnosis,management,and prevention of chronic obstructive pulmonary disease:GOLD executive summary.Am J Respir Crit Care Med.2007 Sep 15;176(6):527-528.

［2］ Santos MC,Oliveira AL,Viegas AM.Systemic markers of the redox balance in chronic obstructive pulmonary disease.Biomarkers.2004 ,9(6):461-469.

［3］ Kostikas K,Papatheodorou G,Psathakis K.Oxidative stress in expired breath condensate of patients with COPD.Chest.2003,124(4):1373-1380.

［4］Livingston E,Darroch CE,Chaudhuri R，et al.Glucocorticoid receptor alpha:beta ratio in blood mononuclear cells is reduced in cigarette smokers.J Allergy Clin Immunol.2004,114(6):1475-1478.