(12)发明专利申请
(10)申请公布号(10)申请公布号 CN 103735511 A(43)申请公布日 2014.04.23
(21)申请号 201410002671.1(22)申请日 2014.01.03
(71)申请人东华大学
地址201620 上海市松江区松江新城人民北
路2999号(72)发明人朱利民 宋恒欢 聂华丽 公晓
魏然(74)专利代理机构上海泰能知识产权代理事务
所 31233
代理人黄志达(51)Int.Cl.
D04H 1/728(2012.01)A61P 35/00(2006.01)
A61K 9/127(2006.01)A61K 31/192(2006.01)A61K 45/00(2006.01)A61K 47/32(2006.01)A61K 47/04(2006.01)D04H 1/4382(2012.01)
(54)发明名称
一种载药磁性脂质体的制备方法(57)摘要
本发明涉及一种载药磁性脂质体的制备方法，包括：将大豆卵磷脂PC、聚乙烯吡咯酮PVP、三氯甲烷和Fe3O4磁性纳米颗粒混合，振荡至完全溶解，得到混合溶液；将酮洛芬加入上述混合溶液中，振荡混匀，得到纺丝溶液，高压静电纺丝，干燥，得到纳米纤维膜；其中酮洛芬和大豆卵磷脂PC质量比为2:5-5:5；将上述纳米纤维膜加入三蒸水中，浸泡，即得。本发明制备原料易得，方法简单，条件温和，可成功制备新型载药磁性脂质体，易于工业化生产；本发明所得载药磁性脂质体水力直径约为200-600nm。CN 103735511 A权利要求书1页 说明书4页 附图3页权利要求书1页 说明书4页 附图3页
CN 103735511 A
权 利 要 求 书
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1.一种载药磁性脂质体的制备方法，包括：（1）将Fe3O4磁性纳米颗粒、大豆卵磷脂PC和聚乙烯吡咯烷酮PVP加入三氯甲烷中，振荡至完全溶解，得到混合溶液；其中混合溶液中大豆卵磷脂PC的含量为5-6%w/v，聚乙烯吡咯烷酮PVP含量为6-8%w/v，Fe3O4在溶液中的含量为2-10%w/w；
（2）将酮洛芬加入上述混合溶液中，振荡混匀，得到纺丝溶液，高压静电纺丝，干燥，得到纳米纤维膜；其中酮洛芬和大豆卵磷脂PC质量比为2:5-5:5；
（3）将上述纳米纤维膜加入三蒸水中，浸泡，即得载药磁性脂质体；其中纳米纤维膜和三蒸水的质量体积比为1g：1000mL。
2.根据权利要求1所述的一种载药磁性脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中Fe3O4磁性纳米颗粒的直径为20-50nm。
3.根据权利要求1所述的一种载药磁性脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中聚乙烯吡咯酮PVP型号为K90，重均分子量M=36w。
4.根据权利要求1所述的一种载药磁性脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中振荡时间为10-24h。
5.根据权利要求1所述的一种载药磁性脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中高压静电纺丝采用5mL注射器作为溶液储存器；采用削平的针头作为喷射细流的毛细管，所述的针头为5号不锈钢注射针头，内径0.5mm；纺丝液流量由微量注射泵控制；采用铝箔平板接收纤维。
6.根据权利要求1所述的一种载药磁性脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中高压静电纺丝工艺参数为：推进速率0.5-2.0mL/h，接收板离喷丝口距离20-25cm，电压12-16kv，环境温度为20-25℃，环境湿度67±4%。
7.根据权利要求1所述的一种载药磁性脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中干燥温度为37℃，干燥时间为2-3天。
8.根据权利要求1所述的一种载药磁性脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中浸泡时间为12-24h。
9.根据权利要求1所述的一种载药磁性脂质体的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中载药磁性脂质体水力直径为200-600nm。
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说 明 书
一种载药磁性脂质体的制备方法
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技术领域
[0001]
本发明属于脂质体材料的制备领域，特别涉及一种载药磁性脂质体的制备方法。
背景技术
脂质体是由磷脂分子分散在水中形成的微米级球状粒子。脂质体具有内层亲水性
和外层亲油性的两亲结构及双分子层的可调性，满足药物载体的携带和释放功能，并且磷脂分子具有良好的生物相容性，因而广泛地应用于药物传递等领域。但由于脂质体靶向分布欠佳等不足，其应用程度受到了限制。磁性脂质体是在脂质体中掺入磁性载体材料，而磁性纳米粒子直径小于30nm时，具有超顺磁性，即在较弱磁场中也可以产生较强的磁性，而外磁场消失后，磁性很快消失，不会被永久磁化。因此在脂质体内加入纳米磁性粒子，可大大增强脂质体的靶向性大大加强了脂质体的靶向性，如果将磁性脂质体放人交变磁场中，还可以增强药物释放的可控性及疗效。而磁性靶向给药系统是将药物和适当的磁性材料及必要辅料配制而成，在足够的体外磁场引导下，随血流运行，选择性地到达并定位于肿瘤靶区。药物以受控的方式从载体中释放，然后在肿瘤组织的细胞或亚细胞水平上发挥药效作用，故对正常组织无太大影响。研究表明，磁性靶向过程是血管内血流对微粒产生的力和磁铁产生磁力的竞争过程。因此，磁性脂质体是一种具有广阔应用前景的药物载体。[0003] 高压静电纺丝技术是一种自上而下的纳米制造技术，通过外加电场力克服喷头毛细管尖端液滴的液体表面张力和粘弹力而形成射流，在静电斥力、库仑力和表面张力共同作用下，被雾化后的液体射流被高频弯曲、拉延、分裂，在几十毫秒内被牵伸千万倍，经溶剂挥发或熔体冷却在接收端得到纳米级纤维。该技术工艺过程简单、操控方便、选择材料范围广泛、可控性强、并且可以通过喷头设计制备具有微观结构特征的纳米纤维，被认为是具有可能实现连续纳米纤维工业化生产的一种方法。应有该技术制备功能纳米纤维具有良好的前景预测。而将静电纺丝制备的纳米纤维膜自组装制备磁性脂质体，方法是一种创新，并且其制备的脂质体包含了磁性性质与纳米尺寸效应及生物相容性，将具有更广阔的应用前景。
[0002]
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种载药磁性脂质体的制备方法，该方法制备
原料易得，方法简单，条件温和，可成功制备新型载药磁性脂质体，易于工业化生产。[0005] 本发明的一种载药磁性脂质体的制备方法，包括：[0006] （1）将Fe3O4磁性纳米颗粒、大豆卵磷脂PC和聚乙烯吡咯烷酮PVP加入三氯甲烷中，振荡至完全溶解，得到混合溶液；其中混合溶液中大豆卵磷脂PC的含量为5-6%w/v，聚乙烯吡咯烷酮PVP含量为6-8%w/v，Fe3O4在溶液中的含量为2-10%w/w；
[0004]
[0007] （2）将酮洛芬加入上述混合溶液中，振荡混匀，得到纺丝溶液，高压静电纺丝，干
燥，得到纳米纤维膜；其中酮洛芬和大豆卵磷脂PC质量比为2:5-5:5；[0008] （3）将上述纳米纤维膜加入三蒸水中，浸泡，PVP吸水逐渐溶解，由于分子自组装，
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说 明 书
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PC分子包裹到磁性颗粒和药物分子周围，即得载药磁性脂质体；其中纳米纤维膜和三蒸水的质量体积比为1g：1000mL。[0009] 所述步骤（1）中Fe3O4磁性纳米颗粒的直径为20-50nm。[0010] 所述步骤（1）中聚乙烯吡咯酮PVP型号为K90，重均分子量M=36w。[0011] 所述步骤（1）中振荡时间为10-24h。[0012] 所述步骤（2）中高压静电纺丝采用5mL注射器作为溶液储存器；采用削平的针头作为喷射细流的毛细管，所述的针头为5号不锈钢注射针头，内径0.5mm；纺丝液流量由微量注射泵控制；采用铝箔平板接收纤维。[0013] 所述步骤（2）中高压静电纺丝工艺参数为：推进速率0.5-2.0mL/h，接收板离喷丝口距离20-25cm，电压12-16kv，环境温度为20-25℃，环境湿度67±4%。[0014] 所述步骤（2）中干燥温度为37℃，干燥时间为2-3天。[0015] 所述步骤（3）中浸泡时间为12-24h。[0016] 所述步骤（3）中载药磁性脂质体水力直径为200-600nm。[0017] 有益效果[0018] （1）本发明制备原料易得，方法简单，条件温和，可成功制备新型载药磁性脂质体，易于工业化生产；[0019] （2）本发明所得载药磁性脂质体水力直径约为200-600nm。[0020] （3）本发明制得的新型载药磁性脂质体，成功将药物包裹于其中，可应用于药物缓释系统。[0021] （4）本发明开发了一种新型载药脂质体的制备方法，并阐述了新型载药磁性脂质体的形成机制，若将模型药物酮洛芬替换成其他抗癌类药物，则为癌症治疗提供了一种新型磁性靶向药剂。附图说明
图1为实施例1-4载药磁性脂质体纳米纤维扫描电镜图；其中（a）为实施例1；（b）
为实施例2；（c）为实施例3；（d）为实施例4制备的载药磁性脂质体纳米纤维扫描电镜图；[0023] 图2为实施例1-4载药磁性脂质体透射电镜图；其中（a）为实施例1；（b）为实施例2；（c）为实施例3；（d）为实施例4载药磁性脂质体透射电镜图；
[0024] 图3为实施例1-4载药磁性脂质体动态光散射水力直径分布图；其中（a）为实施例1；（b）为实施例2；（c）为实施例3；（d）为实施例4载药磁性脂质体动态光散射水力直径分布图；
[0025] 图4为实施例1-4纤维自组装成载药磁性脂质体的机理图。
[0022]
具体实施方式
[0026] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
[0027] 实施例1
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说 明 书
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[0028] （1）将大豆卵磷脂PC0.25g与聚乙烯吡咯烷酮PVP0.3g装入棕色样品瓶中，再加入
三氯甲烷5mL，加入0.02g磁性Fe3O4纳米颗粒，振荡16h至混合均匀。[0029] （2）将酮洛芬药物KPF0.1g放入上述溶液中，振荡10h至完全溶解，制得载药纺丝液。
[0030] （3）静电纺丝：将上述2号纺丝液装入溶液储存器，采用削平的针头（5号不锈钢注射针头，内径0.5mm）作为喷射细流的毛细管，连接高压发生器（ZGF2000型，上海苏特电器有限公司），纺丝液流量由微量注射泵（美国Cole-公司）控制，采用铝箔平板接受纤维。电纺工艺参数：推进速率0.5mL/h，接收板离喷丝口距离25cm，电压16kv。其他条件：环境温度为25℃，环境湿度67±4%。收集纤维，并放于真空干燥箱（恒温37℃）干燥2d，后通过扫描电镜测试见图1(a)。
[0031] （4）将制得的纳米纤维取0.01g浸泡于10mL三蒸水中，24h后，透射电镜见图2(a)，测水力直径见图3(a)，自组装机理见如图4。[0032] 实施例2[0033] （1）将大豆卵磷脂PC0.25g与聚乙烯吡咯烷酮PVP0.3g装入棕色样品瓶中，再加入三氯甲烷5mL，加入0.02g磁性Fe3O4纳米颗粒，振荡16h至混合均匀。[0034] （2）将酮洛芬药物KPF0.15g放入上述溶液中，振荡10h至完全溶解，制得载药纺丝液。
[0035] （3）静电纺丝：将上述2号纺丝液装入溶液储存器，采用削平的针头（5号不锈钢注射针头，内径0.5mm）作为喷射细流的毛细管，连接高压发生器（ZGF2000型，上海苏特电器有限公司），纺丝液流量由微量注射泵（美国Cole-公司）控制，采用铝箔平板接受纤维。电纺工艺参数：推进速率0.5mL/h，接收板离喷丝口距离25cm，电压16kv。其他条件：环境温度为25℃，环境湿度67±4%。收集纤维，并放于真空干燥箱（恒温37℃）干燥2d，后通过扫描电镜测试见图1(b)。
[0036] （4）将制得的纳米纤维取0.01g浸泡于10mL三蒸水中，24h后，透射电镜见图2(b)，测水力直径见图3(b)，自组装机理见图4。[0037] 实施例3[0038] （1）将大豆卵磷脂PC0.25g与聚乙烯吡咯烷酮PVP0.3g装入棕色样品瓶中，再加入三氯甲烷5mL，加入0.02g磁性Fe3O4纳米颗粒，振荡16h至混合均匀。[0039] （2）将酮洛芬药物KPF0.2g放入上述溶液中，振荡10h至完全溶解，制得载药纺丝液。
[0040] （3）静电纺丝：将上述2号纺丝液装入溶液储存器，采用削平的针头（5号不锈钢注射针头，内径0.5mm）作为喷射细流的毛细管，连接高压发生器（ZGF2000型，上海苏特电器有限公司），纺丝液流量由微量注射泵（美国Cole-公司）控制，采用铝箔平板接受
纤维。电纺工艺参数：推进速率0.5mL/h，接收板离喷丝口距离25cm，电压16kv。其他条件：环境温度为25℃，环境湿度67±4%。收集纤维，并放于真空干燥箱（恒温37℃）干燥2d，后通过扫描电镜测试见图1(c)，。
[0041] （4）将制得的纳米纤维取0.01g浸泡于10mL三蒸水中，24h后，透射电镜见图2(c)，测水力直径见图3(c)，自组装机理见图4。[0042] 实施例4
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说 明 书
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[0043] （1）将大豆卵磷脂PC0.25g与聚乙烯吡咯烷酮PVP0.3g装入棕色样品瓶中，再加入
三氯甲烷5mL，加入0.02g磁性Fe3O4纳米颗粒，振荡16h至混合均匀。[0044] （2）将酮洛芬药物KPF0.25g放入上述溶液中，振荡10h至完全溶解，制得载药纺丝液。
[0045] （3）静电纺丝：将上述2号纺丝液装入溶液储存器，采用削平的针头（5号不锈钢注射针头，内径0.5mm）作为喷射细流的毛细管，连接高压发生器（ZGF2000型，上海苏特电器有限公司），纺丝液流量由微量注射泵（美国Cole-公司）控制，采用铝箔平板接受
纤维。电纺工艺参数：推进速率0.5mL/h，接收板离喷丝口距离25cm，电压16kv。其他条件：环境温度为25℃，环境湿度67±4%。收集纤维，并放于真空干燥箱（恒温37℃）干燥2d，后通过扫描电镜测试见图1(d)。
[0046] （4）将制得的纳米纤维取0.01g浸泡于10mL三蒸水中，24h后，透射电镜见图2(d)，测水力直径见图3(d)，自组装机理见图4。
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说 明 书 附 图
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