几种常用蔬菜农药残留检测技术概述及比较

几种常用蔬菜农药残留检测技术概述及比较

陈冬兰

夏彤王志波展锦波

渊江苏省如皋市农产品质量检验与测试中心袁江苏如皋226500冤

摘要着重概述了色谱检测法尧酶抑制检测法尧化学试剂速测法尧酶联免疫法等4种常用的蔬菜农药残留检测技术的原理尧检测方法等袁并将几种检测方法进行了比较遥

关键词气相色谱曰高效液相曰酶抑制法曰ELISA曰农药残留曰比较中图分类号S481.8曰TS207文献标识码A文章编号1007-5739渊2010冤09-0172-02

渊RugaoAgriculturalProductQualityInspectionandTestingCenterinJiangsuProvince袁RugaoJiangsu226500冤

AbstractFocusedon4commonlyusedtestingtechnologyofvegetablepesticideresidue袁includingchromatography袁enzymeinhibitionassay袁chemicalreagentsspeedmeasurementmethod袁enzyme-linkedimmunosorbentassay.Thedetectionprinciples袁testingmethodswereoverviewed.Severaldetectionmethodswerecomparedaswell.

Keywordsgaschromatography曰highperformanceliquid曰enzymeinhibition曰ELISA曰pesticideresidues曰comparison

OverviewandComparisononSeveralCommonlyUsedTestingTechnologyofPesticideResidueinVegatables

CHENDong-lanXIATongWANGZhi-boZHANJin-bo

目前蔬菜农药残留的检测方法有色谱法和速测法两大类遥色谱法是农产品中农药残留定量尧定性精确检测的方法袁一般能检测到痕量级渊10-12~10-9冤袁用于农产品质量安全的仲裁和鉴定曰速测法主要用于农药残留的定性分析袁一般能检

表1检测类别无公害蔬菜无公害水果

检测项数椅项

412282

中毒事故的发生遥每种检测方法都各有优缺点遥11.1色谱检测法

检测项目与有关标准要求

色谱检测法根据不同检测类别袁检测项目尧检测项数尧参照标准各不相同遥具体如表1所示遥测到2~5mg/kg即10-6袁可防止农产品中农残过高引起急性

色谱法检测范围及参照标准

检测范围臆0.05~20.00mg/kg臆0.02~2.00mg/kg臆0.02~0.50mg/kg

六六六臆0.1mg/kg渊鲜冤六六六臆0.2mg/kg渊干冤滴滴涕臆0.1mg/kg均不得检出

参照标准GB18406.1-2001GB18406.1-2001DB32T/343.2-1999DB32T/343.2-1999DB32T/343.2-1999

.com.cn. All Rights Reserved.无公害粮食无公害食用菌

不得检出项

马拉硫磷尧对硫磷尧甲拌磷尧甲胺磷尧久效磷尧氧化乐果尧克百威尧涕灭威尧无公害水果

拉硫磷尧对硫磷尧甲拌磷尧甲胺磷尧久效磷尧氧化乐果尧克百威尧甲基对硫磷杀虫脒

六六六尧滴滴涕

无公害植物油5敌敌畏尧甲拌磷尧甲胺磷尧氧化乐果尧涕灭威

1.21.2.1主要仪器

气相色谱仪遥色谱法是一种分离技术袁原理是将混合

稳定性差尧分子量较大的液体化合物遥对于呋喃丹尧西维因尧灭害威等氨基甲酸酯类农药的测定以及利谷隆尧灭草隆等取代脲类除草剂的测定用高效液相色谱遥22.1农药残留速测法酶抑制法

检测原理遥在一定条件下袁有机磷和氨基甲酸酯类农

物各组分在经过一个固定相和流动相两相组系时袁由于各组分在性质上的差异袁在两相中具有不同的分配系数曰当两相作相对运动时袁各组分随流动相一起流动袁并在两相中进行反复多次渊103耀106冤的分配袁使得各组分最终分离遥气相色谱法是色谱法中的一种袁已被用于许多领域中袁成为一种简易尧快速尧高效和灵敏的现代分析方法[1]遥检测器是测量气流中不同组分及其含量的敏感器袁待测的各组分通过检测器按其化学特征袁转换成易于测量的电信号袁经放大后进行定性定量遥检测有机氯化合物袁如ECD主要用于含卤代烃的农药残留检测袁检测器灵敏度为臆0.008pg/s的六氯化苯曰FPD主要用于含硫尧磷的农药残留检测袁检测器对硫的灵敏度为臆20pg/s的十二烷基硫醇袁对磷的灵敏度为臆0.9pg/s的磷酸丁酸酯遥1.2.2高效液相色谱遥是近年来发展起来的一种分离检测

陈冬兰渊1981-冤袁女袁江苏如皋人袁助理工程师袁从事农产品质量检测工作遥2010-04-14

2.1.1药对胆碱酯酶催化水解的功能有抑制作用袁其抑制率与农药的浓度呈正相关[2]遥原理结构院乙酰胆碱酯酶渊AchE冤+有机磷或氨基甲酸酯类农药寅酶活性被抑制曰乙酰胆碱酯酶渊AchE冤+拟除虫菊酯类农药寅酶活性不被抑制遥活性被抑制乙酰胆碱酯酶渊AchE冤+样本活性不被抑制不含有对神经有害物质含有对神经有害物质

试剂为缓冲液尧胆碱酯酶尧底物尧显色剂遥2.1.2检测步骤遥取1g样本袁擦去表面泥水袁切碎渊非叶菜

类取2g冤加5mL缓冲液袁振荡2~3min曰倒出提取液袁静止5min曰于比色杯内加入酶100滋L和2.5mL样本提取液袁静置10min曰加入100滋l显色剂袁100滋l底物袁混合后于412nm波长下比色遥酶抑制率计算方法为院抑制率渊%冤=渊吟Ac-吟As冤/吟Ac伊100技术遥与气相色谱法相比袁更适用于分析高沸点尧难挥发尧热

作者简介收稿日期

员苑圆陈冬兰等院几种常用蔬菜农药残留检测技术概述及比较式中院吟Ac为对照组3min后与3min前吸光度之差曰吟2.1.3As为结果样本判3定min遥抑后制与率约350%min袁前表示吸光基度本之上差不遥存在农药残留曰抑制率为50%~70%袁表示蔬菜中可能存在有机磷或氨基甲酸酯类农药残留曰抑制率逸70%袁表示肯定存在有机磷或氨基甲酸酯类农药残留遥通过气相色谱等仪器分析方法进行定量定性遥抑制率一般在原10豫耀110%袁一旦检测结果超出此范围袁即说明操作过程有误袁需要重新检测遥2.2化学试剂速测法

2.2.1化学试剂速测法检测原理遥通过研制有强催化作用

的金属离子催化剂袁使各类有机磷农药渊磷酸酯尧一硫代磷酸酯尧二硫代磷酸酯尧磷酰胺冤在催化作用下水解为磷酸与醇遥有机磷农药渊Ops冤强催化剂渊即检测液B冤磷酸+醇渊硫醇尧胺尧酚等冤然后研究灵敏度较高的紫色检测液A袁使有机磷水解产物与检液A反应袁使检测液A的紫红色褪去变成无色遥2.2.2mL检测步聚遥第1步取纯净水渊蒸馏水尧洁净水冤3~4上带袁约柄舒为包展装叶盒片内2~3塑料片测曰试第盆中3步取1/5吸处管曰吸第取2步盆中取需水测反蔬复菜冲洗叶面曰第4步用另一吸管吸取三角瓶中紫红色液体袁滴入盆中2滴袁混匀曰再将塑料瓶内黄色液体滴入盆中4滴袁混匀后静置5~10min袁观察颜色变化遥2.2.3结果判断遥如果液体褪色则表示有机磷农药残留超量袁不能食用遥重复测定2~3次遥3酶联免疫法渊又称免疫生测法袁英文简称ELISA冤3.1基本原理

有机ELISA结合而是发将展抗原抗起来的体一的免种综疫合反技应术和遥其酶基的高效本原催理化是反抗原

应

或抗体能结合到固相载体表面袁并保持其免疫活性曰抗原或抗体与酶联接所形成的结合物仍保留免疫和酶的活性曰结合物与相应的抗体或抗原结合后袁可根据加入酶底物溶液的颜色反应判定有无相应的免疫反应袁而且颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量成正比[3]

遥3.2酶联免疫分析法的操作程序

酶联免疫法是迄今为止农药残留免疫检测中应用最广

泛的一种免疫分析方法遥其中基于竞争吸附的ELISA法成为农药残留检测中的首选方法遥ELISA法有抗体包被直接竞争法渊E-H法冤尧抗原直接竞争法渊E-Ab法冤和间接竞争抑制法[4-10]遥3.2.1抗体包被直接竞争法渊E-H法冤遥是将纯化的抗体吸

附到酶联板上袁加入酶标记的农药和待测农药样品袁酶标记农药和样品中同一种未标记农药与抗体进行竞争结合遥通过洗涤去除游离的部分渊包括酶标记和未标记的冤后袁抗体上结合的酶标记农药量与样品中待测农药的含量成反比遥加入酶的底物袁酶催化底物反应产生有色物质袁经比色测定对待测农药进行定性定量检测遥3.2.2抗原包被直接竞争法渊E-Ab法冤遥是将人工抗原包被

到酶标板上袁加入酶标记的抗体和待测农药样品袁竞争性结合反应后洗涤袁反应板上只留下与包被抗原结合的酶标抗

体袁其结合量与样品中同种待测农药量成反比遥同样袁加入酶的底物袁产生有色物质经比色法对待测农药进行定性定量测定遥3.2.3间接竞争ELISA法遥是用人工抗原渊包被原冤包被酶

反应板后加入抗血清和待测农药进行竞争性结合反应袁洗涤反应板袁板上只留下与包被原结合的抗体渊第一抗体冤袁再加入酶标记的第二抗体袁与第一抗体进行选择性结合袁洗涤后加入酶的底物遥酶催化反应的产物量与被结合的第一抗体和酶标第二抗体量成正比袁与待测样品中相应的农药量成反比遥3.2.4双抗夹心法遥抗体包被酶标板后袁加入待测抗原渊待

捡农药冤使其与过量的固相抗体结合袁温育洗涤再加入过量的酶标记抗体袁分离固相和游离相化合物袁加入酶底物袁根

据反应程度可计算出样品中抗原的含量遥4几种农药残留检测方法的比较

快速检测的最低检出浓度尧最高允许残留限量渊MRL冤尧引起中毒的残留量尧气相色谱等仪器最低检出浓度之间的关系可以用一个简图来表示袁如图1所示遥色谱法尧酶抑制法尧化学试剂法及酶联免疫法4种检测方法的原理尧特点及成本等差异比较见表2遥引起中毒的残留浓度速测法最低检出浓度国家规定的残留量气相色谱等仪器最低检出浓度图1引起中毒的残留浓度尧速测法最低检出浓度尧国

家规定的残留量尧气相色谱等仪器最低检出浓度的关系5参考文献

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71-73袁76.

检测中的应用及其质量控制[J].渊下转第175页冤员苑猿

.com.cn. All Rights Reserved.李绍忠院昭平县水稻纹枯病的发生原因及防治对策渣冶袁是压低菌源数量的有效途径遥在早稻灌水耙田时袁残留在稻田土壤中的菌核多浮上水面袁混杂在野浪渣冶内袁随风飘到田边袁此时可打捞野浪渣冶晒干或深埋遥同时袁清除田边沟边杂草袁减少病源基数袁可大大减轻水稻纹枯病发病和流行遥二是改进种植制度袁搞好平衡施肥遥各地要因地制宜袁选择合理的种植制度袁各级政府和农业部门应引导群众做好种植结构的调整工作袁在条件适宜的地方要推广使用水原旱轮作的种植方式袁这样不仅可促进农业增效尧农民增收袁而且还能大大降低水稻纹枯病的发病危害程度和流行蔓延遥而实行水稻连作的地方袁一定要根据本地的土壤供肥能力袁推广测土配方施肥新技术袁注重氮尧磷尧钾等元素的平衡施用遥其主要按照野前重尧中控尧后补冶的方法遥做到重施基肥袁早施追肥遥做到有机肥与化肥相结合袁切忌偏施尧迟施氮肥遥做到水稻生长前期早生快发袁中期要控得住袁避免徒长袁叶片挺直袁叶色不乌袁后期不脱肥早衰遥三是科学管水袁合理灌溉遥水稻纹枯病发生流行与田间科学用水与否有密切的联系遥田渊上接第166页冤处理A尧处理B尧处理G的防效袁处理B对稻纵卷叶螟的杀虫效果与处理G相当袁极显著优于处理A的防效曰处理D尧处理E尧处理F对稻纵卷叶螟的杀虫效果分别为78.94%尧于处理D尧处理E尧处理G的防效袁处理E对稻纵卷叶螟的杀虫效果与处理G相当袁极显著优于处理D的防效渊表1冤遥药后14d袁处理A尧处理B尧处理C对稻纵卷叶螟的保叶效果分别为56.20%尧70.40%尧79.80%袁其中处理C的保叶效果最好袁显著优于处理A尧处理B尧处理G曰处理D尧处理E尧处F的保叶效果最好袁显著优于处理D尧处理E尧处理G曰且试3结论与讨论

试验结果表明袁1.8%甲维盐悬浮剂和2%阿维菌素悬浮剂对稻纵卷叶螟的杀虫和保叶效果优异袁药后3~7d袁1.8%甲维盐悬浮剂1500mL/hm2的防效为89.09%~95.60%袁药后14d袁保叶率为79.80%曰药后3~7d袁2%阿维菌素悬浮剂渊上接第173页冤检测方法酶抑制法间采用深灌尧漫灌的田块往往水稻纹枯病发生严重遥因此袁在田间灌溉一定要做到浅水勤灌袁适时露田尧晒田袁后期干湿交替管理袁减少无效分蘖袁增强植株抗病力袁从而抑制引起水稻发生纹枯病的诱因遥四是科学用药袁提高施药效果[5]遥应用化学药剂防治水稻纹枯病具有最直接尧最有效的优点遥生产中要严格按照田间纹枯病发生的趋势袁选准药剂品种和使用浓度袁是提高水稻纹枯病防治效果的关键遥同时袁应积极引进和开发农药新品种和防治技术袁以延缓病菌产生抗药性遥[1]广西自治区植保总站.粮食作物病虫及防治图册[M].南宁院广西民族出版社袁1998院10-12.

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4参考文献

1800mL/hm2的防效为90.62%~96.17%袁药后14d袁保叶率为81.80%袁2种药剂对稻纵卷叶螟的防效和保叶率明显高于对照药剂2%阿维菌素可湿性粉剂1.5kg/hm2遥因此袁从试验药剂的防治效果和防治成本考虑袁1.8%甲维盐悬浮剂防治稻纵卷叶螟的推荐剂量为1500mL/hm2袁2%阿维菌素悬浮剂的推荐剂量为1800mL/hm2袁大发生年份可适当加大施药量遥防治适期宜掌握在稻纵卷叶螟卵孵盛期和低龄幼虫高峰期[6-7]袁用水量不低于750kg/hm2袁喷药时力求均匀周到遥[1]韩文瑞袁谭流袁姜先芽袁等.几种杀虫剂对稻纵卷叶螟和稻飞虱的防治效果[J].广东农业科学袁2008渊8冤院100-101.[2]缪康袁束兆林袁赵来成袁等.29%辛硫窑氟虫腈乳油对稻纵卷叶螟的防效[J].江苏农业科学袁2008渊4冤院118-119.

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.com.cn. All Rights Reserved.2.2保叶效果

4参考文献

理F的保叶效果分别为57.60%尧72.40%尧81.80%袁其中处理

验药剂处理的水稻生长情况良好袁均无药害发生渊表1冤遥表24种检测方法的原理尧特点及成本等差异比较

适宜对象成本适宜地点叶菜尧瓜果类施用农药较多检测1个样品需要1.5规模蔬菜生产基地尧的蔬菜尧水果新产品袁可用万~2万元袁仪器成本在农贸交易批发市场于复检尧混合样检测2万元左右叶菜尧瓜果类蔬菜及水果袁检测1个样本需1元小型农贸交易市场尧一般可适用于农贸市场入左右袁1套试剂盒成本市民自备小规模基口处等候进场的产品速测在10元左右地适用于果蔬上已知或指定未进入产业化开发袁暂大型农贸市场及生农药品种的定性尧定量检测无销售产基地适用于所有农产品中农药检测1个蔬菜样品检测中心规范化固残留的仲裁和鉴定检测2000~5000元袁仪器定的实验室

设备配套成本最低200万元的最佳条件研究[J].食品科技袁2007渊11冤院171-173.检测残留农药范围主要特点有机磷尧氨基甲酸酯类对农残定性分析袁精确度低袁操作简便尧快速袁1名技术人员30min内可检5~6个样本袁但对酶活性要求高

化学试剂速测有机磷类对果蔬等表皮有机磷农药进行定法渊速测灵冤性检测袁结果不太稳定袁准确度低袁

一般需要重复2~3次袁方法简便尧快速尧成本低

酶联免疫法50种已研制出免疫抗对农残定性分析袁专业性尧特异性

体的农药品种包括有强袁灵敏度较其他速测仪高袁但具机磷类尧呋喃丹等有一定盲目性尧局限性

色谱法所有需检农药残留品对农残定性尧定量分析袁精确度高

种一般最低检出能达到10-12~10-9级

渊即pg/s冤袁但检测时间长袁仪器成本及技术要求高[10]李顺袁纪淑娟袁李东华.酯抑制法快速检测蔬菜中有机磷农药残留员苑缘