TLC法测定醋酸氢化可的松有关物质的方法研究

TLC法测定醋酸氢化可的松有关物质的方法研究

谢沐风

(上海市药品检验所,200233)

中图分类号:R9-3;R9171794101　　文献标识码:A　　文章编号:1002-7777(2004)01-0046-02　　醋酸氢化可的松是一用途十分广泛的甾体类药物,已被《中国药典》2000年版(CHP)[1]和《美国药典》XXIV(USP)[2]收载,其中有关物质的检测均采用TLC法进行。我们在试验中发现两方法各有优缺点,便重新进行了方法学研究。新建立的方法灵敏,既有科学性又具有可操作性。1　试药及仪器

醋酸氢化可的松对照品(批号:0013-9505,中国药品生物制品检定所);硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂)。其它有机溶剂均为分析纯。2　试验方法与结果211　《中国药典》方法[1]212　《美国药典》方法[2]213　测定结果

CHP:主斑点拖尾严重,尾部甚至与起始点相

μ溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述溶液各10l,

分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-水(180∶15∶1)为展开剂,展开后,晾干,105℃干燥10分钟,放冷,喷以碱性四氮唑蓝试液,立即检视。供试品溶液如显杂质斑点,其总和不得大于210%(011%对照应能检出,否则本试验无效)。结果主斑点不拖尾,Rf值为0160;仅主斑点上方有一杂质斑点,与主斑点完全分离,强度与012%对照相近;011%对照清晰可见。3　讨论

311　醋酸氢化可的松属于激素类中的肾上腺皮质

激素,四氮唑法是肾上腺皮质激素的重要显色方法,尤其是在薄层色谱中,醋酸氢化可的松分子在吸附层上具有较高的反应性,故显色极为灵敏;而硫酸-乙醇显色法主要是针对雌性激素的显色反应,对于属于肾上腺皮质激素类的醋酸氢化可的松则反应活性不强,故在如此高的浓度下,仅能显色到015%的灵敏度[3]。

312　在CHP和USP的展开剂中,虽1,2-二氯乙

连,主斑点下方观察不清,Rf值仅为0118;主斑

点上方有一杂质斑点,与主斑点完全分离,强度与012%对照相近;011%对照基本可见,说明本显色方法灵敏度较高。

USP:主斑点不拖尾,Rf值为0162;主斑点上方未见杂质斑点;015%对照可见,011%对照未显出,说明本显色方法灵敏度不高。214　结果分析

CHP的点样量与USP相比,为3∶20。CHP的011%可显出,而USP却只能显色到015%,说明CHP的显色方法更为敏锐;而USP主斑点不拖尾,Rf值0162,但CHP主斑点拖尾严重,尾部甚至与

烷和氯仿的极性相近,但两者用量却相差一倍,这导致醋酸氢化可的松在展开剂中的分配比加大,Rf值增加,故使用USP展开剂展开效果好,主斑点

圆润,不拖尾。

313　有关物质检测,在主斑点不拖尾的情况下,

供试品溶液浓度越高,越能反应出杂质存在情况,故供试品溶液浓度选择1010mg・ml-1。

314　对照溶液采用梯度,可对杂质有一“半定量”

起始点相连,主斑点下方观察不清,Rf值仅为

0118,说明USP的展开剂和稀释用溶剂选择更佳,综合以上分析,我们重新建立了分析方法。215　重新拟订的方法与测定结果

取本品,加氯仿-甲醇(1∶1)制成每1ml中

的评价,比一点对照法更直观、更清楚。315　甾体激素类药物具有很强的生理作用,因此

其纯度分析十分重要。现在,许多国家均已规定,甾体原料药中的单个杂质含量应低于110%,含量在011%以上的杂质均需鉴定,故本法在对照液中加入011%对照,并规定其应能检出,本试验方有

效,以保证每次试验的有效性和准确性。316　本法快速、简便、易行,便于基层的应用。

含1010mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取适

量,加氯仿-甲醇(1∶1)制成每1ml中分别含0101、0102、0105、011、012mg的溶液,作为对照

中国药事2004年第18卷第1期・47・

大理地区市售丹参药材鉴定

许　华

(云南省大理白族自治州药品检验所,671000)

中图分类号:R93115　　文献标识码:A　　文章编号:1002-7777(2004)01-0047-02　　丹参为常用中药,《中国药典》2000年版(一部)收载,为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge的干燥根及根茎,具有止痛、活血通经、清心除烦之功效。用于月经不调,闭经痛经,症瘕积聚,胸腹刺痛,热痹疼痛,心烦不眠,肝脾肿大,心绞痛等症。近年来丹参的开发研究日益受到重视,然而市售丹参品种多样,为了掌握市售丹参品种情况,合理制定丹参类药材质量标准,开发利用资源,作者对大理地区作丹参药材出售入药的丹参进行收集。经鉴定为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根茎[1]、紫丹参(滇丹参)SalviayunnanensisC.H.Wight及大紫丹参SalviaprzewalskiiMaxim.var.mandarinorum(Diels)Stid.的干燥根及根茎,已收载云南省药品标准1974年版[2]。除上述3种药材外,还有1种小红丹参,为唇形科植物三叶鼠尾SalviatrijugaDiels的干燥根及根茎。大理、合庆、剑川、洱源、迪庆、中旬、丽江等地区产,当地称红丹参,作丹参药用[3],现将4种药材性状、显微、理化鉴别结果报告如下:1　性状111　丹参

具有分枝的圆锥形,长5～15cm,直径014～

1cm;根茎具密集的叶痕而成节,常拐曲。根表面有细根痕及纵皱纹,支根在分枝处常变细,略呈纺缍形。质坚脆,易折断;断面不平整,浅棕黄色,外层有时暗棕色,边缘(栓皮)呈紫红色。气微,味甘、微苦涩。113　大紫丹参呈园锥形,扭曲不直,下部有分枝,长15～30cm,直径2～4cm。根茎常分叉,上端残存四棱形茎基及叶柄残基。主根由数股扭成麻花状,表面有多数不规则的纵沟纹,表皮紫褐色,脱落后显砖红色。质松泡,易折断;断面中心白色。气微,味苦、微甜。114　小红丹参具分枝,根茎短,顶端有时残留茎基,根数条,长圆柱形,具须状细根,长5～20cm,直径011～015cm。表面砖红色,粗糙,具纵皱纹。质坚脆,易折断,断面不平整,皮部紫褐色,木部淡黄色、气微、味微苦涩。2　显微鉴别211丹参粉末

根茎短粗,顶端有时残留茎基。根数条,长园

柱形,略弯曲,有的分枝并具有须状细根,长10～20cm,直径013～1cm。表面棕红色或暗棕红色,粗糙,具纵皱纹。老根外皮疏松,多显紫棕色,常呈鳞片状剥落。质硬而脆,断面疏松,有裂隙或略平整而致密,皮部棕红色,木部灰黄色或紫褐色,导管束黄白色,呈放射状排列。气微,味微苦涩。112　紫丹参(滇丹参)

石细胞单个散在或数个相连,淡黄色或近无

μμμ色,直径14～70m长至190m,壁厚5～20m。

μ韧皮纤维单个散在或成束棱形,长60～170m,直

μμ径7～27m,壁厚3～12m,孔沟明显。导管主为

μ网纹,及具缘纹孔导管,直径18～60m。木纤维主为纤维管胞,单个散在或数个成束。木纤维细胞

成片,黄棕色,长方形或多角形,壁稍厚,微木化。

参考文献:

[1][2][3]

1521

中国药典[S]1二部,2000:1031

USP1XXIV12001:828

[致谢:中国药品生物制品检定所化药室张启明老

安登魁主编1药物分析[M]1济南:济南出版社,1992:

师和吴渭滨老师对本文进行了指导和帮助,在此表示感谢。]