(医疗药品)药用植物组织培养实验指导

柳福智编

农学院中草药栽培与鉴定教研室

2007年8月

前言

药用植物组织培养实验是根据中草药栽培与鉴定专业的培养要求，为学生开设的一门实验课程。药用植物组织培养实验的任务是使学生加深对药用植物组织培养基本理论的理解，掌握药用植物组织培养实验的基本操作技能，学习药用植物组织培养实验的基本知识，养成严格、认真和实事求是的科学态度，提高观察、分析和解决问题的能力，为将来参加工作打下良好的基础。

编者 2007年8月

学生实验守则

1、实验前认真预习，领会实验原理，明确本次实验的目的和要求，了解实验步骤和注意事项。

2、实验时要严格按照规范操作进行，仔细观察实验现象，认真记录有关数据。

3、要认真写好实验报告，实验报告要清楚、简练、整洁。

4、学生进入实验室必须严格遵守实验室规则，服从带教老师的指导。 5、爱护实验室的仪器设备，不准将实验室的仪器设备私自带出室外。 6、严格遵守操作规程及实验时应注意的事项，在使用不熟悉其性能的仪器和药品之前，应查阅有关资料或请教指导教师，不要随意进行实验，以免损坏仪器，浪费试剂，使实验失败，更重要的是预防发生意外事故。 7、实验过程中应注意防火灾、防爆炸、防腐蚀、防污染工作，牢固树立“安全第一”意识。

8、实验结束后，一切仪器试剂应放回原处，玻璃仪器要清洗干净，一些有毒、有腐蚀性的废液应倒入废液缸内。

9、实验台面要擦试干净，由值日生负责安全卫生工作，包括清理实验室，检查水、电的开关，清除垃圾和污物，关好门窗后方可离开实验室。 药用植物组织培养实验报告一般包括以下内容和要求： （1）实验名称、实验日期。

（2）实验目的写明通过本实验要达到的训练目的。

（3）实验原理用文字表述本实验的基本原理。 （4）操作步骤简明扼要叙述实验的操作步骤。 （5）实验数据的处理及结果。

（6）问题及讨论应对实验中观察到的现象及实验结果进行分析和讨论，如果实验失败，要寻找失败原因，总结经验教训，以提高自己的基本操作技能。

目录

实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌............. 实验二母液的制备及培养基的配制、灭菌............... 实验三药用植物茎尖培养............................ 实验四药用植物的花药培养......................... 实验五试管苗的移栽...............................

实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌

一、目的要求：

1．通过参观，了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。

2．通过实际操作，学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。 二、实验内容

了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的，总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。植物组织培养是一项十分细致的工作，为了保证植物外植体不受污染，第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒，使它们保持无菌状态，做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧，因此每个学生必须学好这套基本功。

三、实验原理

实验仪器的清洗、消毒和灭菌是组织培养成功的关键所在，是外植体免受污染的前提。由于灭菌剂的种类不同，所以选择消毒剂既要考虑良好的消毒、杀菌作用，同时易被蒸馏水冲洗掉。

四、实验仪器与材料：

高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿（试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯），以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪，肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。

五、方法和步骤：

首先在老师带领下参观组培室，并听取讲解，然后配制洗液，称取工业用重铬酸钾40克，溶解在500ml在水中，然后徐徐加入450ml粗制浓硫酸（或废硫酸）配好的溶液呈红色，铬酸洗液是一种强氧化剂，去污能力强，但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效，铬酸洗液可反复使用，直到溶液呈青褐色为止。此溶液腐蚀性强，洗涤时需注意。

每人清洗部分玻璃器皿，方法：清水洗净→泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷→清水反复冲洗→蒸馏水淋一遍→烘干备用。

然后清洗部分较脏的玻璃器皿，方法：采用先碱后酸，即用洗衣粉洗刷后冲洗干净→晾干→侵入酪酸洗液，浸泡时间视器皿的肮脏程度而定→清水反复冲洗干净→蒸馏水淋洗一遍→烘干备用。

带有石蜡或胶布的器皿：先将其除去，再用常规洗涤，石蜡用水煮沸数次即可去掉，胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时，再用水冲洗，凉干后浸入洗液，以后的步骤同前。

对器皿和用具进行高压灭菌，即用手提式高压灭菌锅，在1.2个大气压下保持15~20分钟。解剖刀、手术剪、解剖针、镊子等用具在接种前还要用百分之七十的酒精棉球擦一下，再用酒精灯的火焰灭菌，冷却后即可应用。

六、作业：

试阐述为什么要对器皿和用具进行严格的洗涤和灭菌？

实验二母液的制备及培养基的配制、灭菌

一、目的要求：

通过掌握培养基对母液制备及常用培养基的配制和灭菌方法，为植物组织培养准备合适的营养条件。

二、实验内容

学习母液和培养基的配制，灭菌的方法。 三、实验原理

植物材料培养要获得成功，并正常生长，培养基的组成成分是一个决定性因素，不同植物要求不同的培养基，因此，在进行大量工作之前，对不同培养基应进行分析、比较、试验，选择一个符合试验材料需要的适宜培养基。

大多数植物组织培养所用的培养基由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成。

四、实验仪器与材料

高压灭菌锅、冰箱、普通及精密天平、电炉、铝锅、玻璃器皿（烧杯、量微、容量瓶、移液管、试剂瓶、三角瓶、漏斗），化学试剂(CaCl2·2H2O，KNO3，MgSO4·7H2O，

NH4NO3，KH2PO4，Na2—EDTA，FeSO4·7H2O，MgSO4·4H2O，ZnSO4·7H2O，H3BO3，KI，NaMoO4·2H2O，CuSO4·5H2O，CoCl2·6H2O，甘氨酸，盐酸硫胺素，盐酸吡哆醇，烟酸，肌醇，蔗糖，琼脂，若干种生长调节

物质及天然复合物，HCL,NaOH,酒精)，以及称量纸、药匙、玻璃棒、精密度纸，瓶盖用纸，线绳或橡皮筋、铅笔、标签纸。

五、方法和步骤 1、母液的配制

母液的配制是按所使用药品的类别，而分别配成大量元素、微量元素、维生素和铁盐等。配制母液时特别要注意无机盐成分在一起，可能产生的化学反应，如Ca2+和SO2-4,Ca2+,Mg2+和PO3-4一起溶解后，会产生硫酸钙或磷酸钙的不溶物沉淀，因此不能配在一起作母液贮存，应分别配制和保存。

配制母液时要用双重蒸馏水等纯度较高的水，药品应采用化学纯或分析纯级，药品的称量及定容都要准确，各种药品先以少量蒸馏水使其充分溶解，然后按培养基上的排列顺序混合。

现以Murashige和Skoog(1962)培养基为例叙述如下：根据各种药品的特点，母液可配成4种。

母液Ⅰ：把大量元素按培养基配方的20倍浓度混合在一起。 KNO338克 NH4NO333克 MgSO4/7H2O7.4克 KH2PO43.4克 CaCl2/2H2O8.8克

加水定容至1000毫升，配1升培养基时，吸收50毫升，注意CaCl2应待其它度剂彻底溶解后再加入，否则易出现沉淀。

母液Ⅱ：把硼、锌、锰、铜、钴、钼等微量元素，接培养基配方浓度的1000倍浓缩配制在一起。 MnSO4*4H2O22.3g ZnSO4*7H2O8.6g H3BO36.2g 中心简介 师资队伍 规章制度 实验教学 实验指导书 教学大纲 教学情况 信息平台 视频教学 中心视频介绍

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野生药用植物驯化实验指导

甘肃农业大学农学院 野生药用植物驯化实验指导

陈垣编

农学院中草药系 2007年8月

前言

本实验指导是《野生药用植物驯化》课程的配套实验教材，根据本系

驯化经验经反复修改、充实编撰而成，其内容包括：野生药用植物种子休

药用植物资源调查、野生药用植物种子采集、田间覆盖试验、营养繁殖试

物引种观察等，除常规驯化栽培实验外还注意结合高难度名贵稀缺药用植

学生实际应用技能，注意突出对学生独立工作能力的训练和培养。本实验

培与鉴定专业本科生实验教学，亦可作为农林等其他有关专业学生及教师

编者 2007年8月

学生实习守则

一、学生实验期间不得准无故缺席、迟到、早退。 二、完成每次实验任务后，及时认真撰写实验报告。

三、严禁实验报告相互抄袭，一经发现按当次实验成绩为零计算，并从新

四、按各次实验成绩和综合实验成绩计算实验成绩，实验成绩占综合考评五、实验操作要认真细致、数据真实。

六、防止实验设备损坏、因粗心或操作不当造成设备损坏要赔偿。

七、每次实验结束，检查实验室设备关闭，整理放归原处，清洁实验室，

离开。

实验报告的基本内容和要求

实验报告的基本内容

按照实验指导书各次实验作业内容撰写实验报告。 实验报告格式：

实验题目

实验小组学生姓名（空格间隔）（班级） （甘肃农业大学农学院） 一、目的意义 二、材料与方法

包括材料与资料数据来源、试验方法。 三、结果 四、讨论与结论 参考文献

作者姓名，论文题目，期刊，卷（期），年份：页码

目录

实验一野生药用植物种子休眠特性的测定............................................... 实验二野生药用植物资源调查.................................................................. 实验三野生药用植物种子采集及贮藏...................................................... 实验四田间覆盖试验............................................................................... 实验五营养繁殖试验............................................................................... 实验六高原野生药用植物引种观察........................................................

实验一野生药用植物种子休眠特性的测定

一、实验目的

了解植物种子的休眠特性。 掌握打破种子休眠的方法。 二、实验内容

测量植物种子的休眠特性、打破种子的休眠。 三、实验原理 （一）休眠机理

种子休眠是种子的一种生理现象，是植物长期适应气候变化的结果。

繁衍后代具有深远意义，但对于种子繁殖栽培来说，它无疑给我们造成了

子休眠的原因主要有以下几种。 1复被结构的限制

复被结构是指胚的外围结构，包括果皮、外果皮、外稃、内稃、颖片

乳等。其中种皮是因复被结构限制而引起种子休眠的主要结构。复被结构是由于其不透性限制或机械阻碍作用而造成的。 1.1复被结构的不透性限制

不透性限制从四个方面影响种子萌发。

1）阻止水分吸收：不透水的种子也叫硬实。这类种子的种皮极为坚硬

能吸水，种子内原生质处于凝胶状态，呼吸强度很低，物质转化也很缓慢萌发。

2）阻止气体交换：不能进行气体交换，种子就得不到足够的氧气进行

子内产生的二氧化碳气体也不能及时排出，致使种子内二氧化碳不断积累代谢障碍，从而影响种子发芽。

3）阻止胚内抑制剂逸出：种子胚中含有一定量的发芽抑制剂，复被结制剂逸出的作用，从而使胚中抑制剂过多而不能萌发。

4）阻碍光线到达胚部：有些光敏感种子，由于复被结构的滤光器作用光的比例，从而决定光敏素是否活化，并最终决定种子是否休眠。 1.2复被结构的机械阻碍作用

有的种子因种皮坚硬，膨胀的胚不能冲破种皮而使种子处于不能发芽

2胚未成熟

胚未成熟主要有两种情况，一是胚未发育完全，一是胚虽发育完全但两种情况下，种子都不能正常发芽。 2.1胚未发育完全

有的种子虽然已经脱离母体，从外形上看似已成熟，但胚尚未发育完继续生长，待胚发育完全后，种子才能萌发。 2.2胚尚未完成生理后熟

有的种子在成熟时胚已发育完全，但在适宜条件下也不能萌发，需要部发生一系列生理生化反应后才能萌发。 3萌发抑制剂存在

萌发抑制剂的种类很多，有挥发油、生物碱、有机酸、酚、醛等。其可能存在于复被结构中，也可能存在于胚中，或者两者中都存在。 4综合休眠

综合休眠就是兼有种皮障碍和胚体休眠的种子。这类种子萌发时，既皮）阻碍，又要克服胚的生理休眠，所以其发芽相当困难。 （二）打破休眠的方法 1解除复被结构障碍 1.1物理处理

用手工或机械方法去除或刮破复被结构（主要是种皮），使种子可以

交换。切割种皮时应注意不要伤害到胚。 1.2化学处理

酸处理：把种子放在浓硫酸或硝酸种浸泡30min，然后用水冲洗干净酸处理可使坚硬的种皮软化，容易透气透水。

碱处理：用一定浓度的碱溶液浸泡种子，可使颖苞外的大部分蜡质脱打破种子休眠。 2解除化学抑制因素 2.1植物激素处理

某些植物激素，如赤霉素、乙烯利、激动素等有促进种子发芽的作用激素处理种子可以使休眠种子中存在的化学抑制剂钝化或失效。 2.2其它化学药剂处理

除了植物激素外，其他一些化学物质也可以打破种子休眠或促进非休

质包括酸碱、无机盐类、有机物、氰化物及其它呼吸抑制剂，某些植物的剂和氧化剂等等。 3打破胚休眠 3.1低温湿沙层积处理

低温湿沙层积处理对于打破种子休眠有综合性效果，它不但可以使胚

除化学抑制因素，并使种皮透性改善。对于打破种子休眠而言，这是一种3.2光照处理

有些种子经湿沙层积处理后仍不发芽，则可能是需要一定的光照刺激

种子浸泡在水中并用15～25瓦白色荧光灯或红色灯泡在15～25cm距4打破综合休眠

综合休眠是几种因素同时作用引起的，因此，要打破综合休眠就要综处理种子，从而打破其休眠。 四、实验仪器与材料

仪器：研钵、培养皿、镊子、生物显微镜 材料：赤霉素、滤纸、细沙、甘草种子、秦艽种子 五、实验方法与步骤

1．准备培养皿滤纸和种子。

2．将甘草种子与2倍细沙混合，在研钵中研磨至种皮磨损。

3．用0、20、40、60mg/L的赤霉素浓度浸泡秦艽种子12小时。放培养皿放100粒种子，每个处理3次重复。

4．将研磨和未研磨的甘草种子放培养皿中发芽，每个培养皿放1005．统计发芽率。 六、作业

以发芽率为结果，撰写实验报告。

实验二野生药用植物资源调查

一、实验目的

掌握野生植物资源调查的方法。 二、实验内容

调查学院内及周边地带的野生药用植物资源。 三、实验原理

中药资源调查是以植物科学（包括植物分类学、植物资源学、植物生态

动物学、动物生态学、矿物药材学为基本理论指导，通过周密的调查研究

资源的种类、用途、贮藏、生态条件、地理分布、利用现状、资源消长变

社会生产条件等，挖掘新资源，揭示中药资源利用工作中存在的问题。中

区域中药资源开发利用和保护管理计划的第一手资料。中药资源评价是在

通过对中药资源的现状和利用现状的综合分析，对区域中药资源的开发和

科学的评判，进而为制定区域中药资源的持续开发利用和保护管理计划提

中药资源调查的基本方法包括现场调查、路线调查、访问调查和野外括起来就是点、线、面、访问相结合的综合调查方法。

（一）现场调查

现场调查是中药资源调查工作的主要内容，分为踏查和详查两种方式

踏查也称概查，是对调查地区或区域进行全面概括了解的过程，目的

资源的范围、边界、气候、地形、土壤，以及中药资源种类和分布的一般

踏查应配合分析各种有关地图资料进行。如植被分布图、土壤分布图、土甚至遥感图象资料等，这样可达到事半功倍的效果。

踏查，从调查全局来讲是认识整个调查地区，选择重点取样区域的过

是认识取样区域，选择具体调查样地的过程。踏查应由有关专业人员与熟

术人员共同进行，以便更好地了解情况，少走弯路。可见踏查是贯穿整个

详查是在踏查研究的基础上，在具体调查区域和样地上完成中药资源终步骤，是中药资源调查的主要工作内容。

（二）路线调查

中药资源的调查是遵循一定的调查路线有规律地进行的，并在有代表样地，进行中药资源种类及贮量的详查。

中药资源的分布及其种群数量受区域生态环境的影响，特别是地形的

中药资源分布的重要参考依据。因为不同的植物类型分布有不同的中药资

同，因此，选择调查路线的基本原则是能够垂直穿插所有的地形和植被类地区应给予补查。

决定调查路线必须进行慎重的研究。因为中药资源种类分布的调查和

上是在调查路线上，通过选择有代表性的样地进行取样获得的。调查路线

代表性，直接影响调查结果的客观性和准确性。踏查、访问和各种参考图植被分布图等，是正确确定调查路线的必要保证。 路线的布局方法分为路线间隔法和区域控制法两种。

1.路线间隔法路线间隔法是中药资源路线调查的基本方法，是在调查

原则，布置若干条基本平行的调查路线。这种方法采用的基本条件是地形

中药资源的分布规律比较明显，穿插部位有道路可行。调查路线之间的距

被的复杂程度、中药资源分布的均匀程度以及调查精度的要求而决定（表表2-1常用不同精度调查路线间距参考数据

调查精度 中比例尺（万） （比例尺） 路线间距 7~85~62~3 （km） 1~1.50.50.2 0.10.050.02 大比例尺（万） 超大比例尺（万） 1：251：201：10 1：51：2.51：1：0.51：0.251：1 0.1 2.区域控制法当调查地区地形复杂，植被类型多样，中药资源分布不

查区域按一定间距布置调查路线时，可按地形划分区域，分别按选择调查线间隔法，进行路线调查。

在调查路线上，选择具有代表性的地段作为样地，并做一定数量的样

类的各种数量要素，主要包括密度、盖度、高度、生物量、利用部位生物

条件和土壤条件等，为定性和定量分析调查地区中药资源贮量及其变化规

表性样地的选择既要反映中药资源分布的普遍意义，又要反映其集中分布

在调查路线上，应按一定的距离，随时记录中药资源种类的分布情况植物标本和需要做实验分析的样品。

路线调查按在地图上布置好的调查路线进行，在野外首先找到路线的

路线前进，借助汽车里程表，记录前进距离，当路线有所修改时，在地图

（三）、访问调查

访问调查是向调查地区有经验的干部、生产技术人员、采集者和集贸

进行口头调查或书面调查。这是调查工作中不可忽视的重要手段，许多有的资料，是通过访问调查，收集有关部门的资料获得的。

访问调查应贯穿调查工作的始终。同时，也可以集中一批问题，组织

作为一个独立的阶段，安排在路线调查和现场调查时穿插进行。访问调查

先提供给被调查人，以便有所准备，提高访问调查的质量。无论采用座谈

都要认真做好记录，并及时整理出调查专题材料。对被调查人员的身份、

应做好记载，以便今后核实有关内容。并对一些名称上不明确或不认识的四、实验仪器与材料

仪器：卷尺、游标卡尺、放大镜、GPS、标本夹、吸水纸、标本号牌采集刀、铲具、样方调查用表格、野外记录本、铅笔等等。 材料：校园植物的野生药用植物。 五、实验方法与步骤

（一）准备工作阶段

收集和分析有关资料、准备调查工具、明确调查范围、调查内容和调划的过程。

（二）调查工作阶段

调查工作阶段是通过对中药资源的种类、分布、贮量等实际调查，掌

第一手资料的过程。本实验在校园内部及附近调查野生药用植物的种类及

（三）总结工作阶段

总结工作属于业内工作，主要工作内容是系统整理调查所得到的各种

类标本和样品等。资料应按专题分类装订成册，编出目录。并进一步分析

进行数字统计，绘制成各种成果图件，对调查地区中药资源现状、开发利

及开发利用的潜力和保护管理等，做出科学的评价，并提出意见和建议。六、作业

撰写中药资源调查报告。

实验三野生药用植物种子采集及贮藏

一、实验目的

掌握野生药用植物种子采集方法。 掌握药用植物种子的贮存方法。 二、实验内容

采集并贮藏野生药用植物种子。 三、实验原理

种子必须在适当成熟、具有发芽能力时适时采收，由于野生药用植物故必须强调适时采收。

种子成熟包括形态成熟和生理成熟。生理成熟就是种子发育到一定大

积累到一定数量，种胚已具有发芽能力。形态成熟就是种子中营养物质停

少，种皮坚硬致密，种仁饱满，具有成熟时的颜色。一般情况下，种子的

成熟再到形态成熟，但也有些种子形态成熟在先而生理成熟在后。当果实

胚发育没有完成，种子采收后，经过贮藏和处理，种胚再继续发育成熟。

杨树，它们的形态成熟与生理成熟几乎是一致的。真正的成熟种子包括生个方面。

种子成熟后种子中干物质停止积累，含水量降低，硬度和透明度提高

深，呈现出品种的固有色泽。实际采种时，还要考虑到果皮颜色的变化。

态特征也不同，浆果、核果类（多汁果）果皮软化，变色。如南酸枣、杏

由绿色变为黄色，龙葵、土麦冬、女贞、樟树成熟时，果实变为黑色。干

翅果、坚果等）果皮由绿色变为褐色，由软变硬。其中，蒴果和荚果果皮

四叶参、泡桐、甘草、黄芪等。球果类果皮一般都是由青绿色变成黄褐色

鳞片微微裂开。成熟时，油松、侧柏、马尾松等的果实变为黄褐色。种子

苗长势、种子耐藏性均有影响，应采收充分成熟的种子。但有时也例外。

采适度成熟的种子留种。老熟种子播种后容易提早抽薹。又如黄芪、油橄

硬实增多，或休眠加深，如采后即播，往往采收适度成熟（较嫩）种子。

脱落的植物可以缓采，待全株的种子完全成熟时一次采收。如朱砂根的种

批采收，或待大部分种子成熟后将果梗割下，后熟脱粒，如穿心莲、白芥补骨脂等应随熟随采，避免损失。

(1)对酸枣、颠茄等浆果类种子，可将其果实浸入水中，待其吸胀时用

子分离，然后用清水淘洗，漂选，风干；

(2)对易开裂的蒴果（桔梗、党参等）和荚果（决明、黄芪等）类种子使果皮裂开，然后用木棒敲打，使种子脱出。

(3)在种子脱粒过程中，要尽量避免损伤种子。种皮破损的种子易感染

(4)有时带果皮贮藏的种子寿命长，质量好。栝楼、丝瓜、枸杞、白芥种前才脱粒。

(5)采收清理后的种子，要进行精选，取整齐、饱满而又无病虫害的种

药用植物的种子，绝大多数种类都是自然干燥后采收的种子，发芽年

马兜铃等少数药用植物只要成熟就得采收，如果等其自然干燥，发芽率就

成熟后，不等自然干燥就霉烂失去活性，只有及时采收除去果壳并用草木晾干保存60d(自然成熟时只能存活15d左右)。

贮藏条件影响种子寿命的长短。通常情况下，低温干燥环境中贮藏的

种子自然成熟后，在室内存放30d发芽串均由98％降到30％以下，50

而放在密闭干燥容器内，于4C条件下存放的种子，300d后发芽率仍在

韭种子，一般室内干存时，寿命只保持1年左右，若改用封严的罐器存力仍很好。

这主要是低温、干燥的环境既不便吸湿提高酶的活性，又因低温低湿

故。应当指出的是少数药用植物的种子低温下仍能很快吸水，因此在贮存

必须严格管理好。如洋葱种子在1012时，吸湿很快，红花种子412就能

贮存温度要求更低。另外，像银杏、龙眼、枇杷、忙果、肾茶、细辛、马

不宜干贮，干贮就失去活力，生产上都是年年留种，采后趁鲜播种，不能

倍湿砂保存。再者，药用植物种子贮藏时，必须注意种子的组成成分，特

的种子，尤其是含挥发性成分的种子，除了低温存放外，还要限气保存，

豆蔻种子在4512条件下存放，种子内的脂肪油就会液化，使种仁变质失

用陶制坛罐与石灰存放种子，既降低了湿度，又限定了器皿内的氧气含量这也是莲子深埋古墓中，埋藏千年之久，仍能萌发成苗的原因所在。 四、实验仪器与材料

仪器：布袋、剪刀、磁盘、放大镜、镊子、标本夹、标签等。 材料：野生药用植物。 五、实验方法与步骤 1．观察种子成熟度。 2．采集具有发芽能力的种子。 3．种子脱粒加工。 4。种子贮藏。 六、作业

撰写种子采集和贮藏实验报告。

实验四田间覆盖试验

一、实验目的

掌握田间覆盖保苗的方法。 二、实验内容

进行田间覆盖保苗试验。 三、实验原理

野生药用植物发芽要求阴湿的条件。主要因为种子含营养较少，幼苗

件要求苛刻。在自然野生条件下，野生药用植物多生长在林缘草被中，种

枯枝落叶下，种子发芽出苗过程在杂草覆盖条件下完成，幼苗第一年一直

丛不抽薹，人工驯化栽培的一大技术难关是如何设置覆盖设施，达到保湿

芽出苗，并使幼苗正常生长，同时还要考虑生产成本和技术的简易可行性

苗率高，秸秆覆盖出苗率高而成本低可以就地取材，可以增加土壤有机质少杂草，但必须适时揭膜或覆盖在行间。 四、实验仪器与材料

仪器：铁锨等简易田间劳动工具。 材料：黑色地膜、遮阳网、作物秸秆等。 五、实验方法与步骤

1．进行无覆盖、黑色地膜覆盖、遮阳网覆盖、作物秸秆覆盖等不同覆处理3重复。 2．统计出苗率。 六、作业

以出苗率为结果撰写田间覆盖试验报告

实验五营养繁殖试验

一、实验目的

掌握药用植物营养繁殖方法。 二、实验内容

进行分株、扦插、压条等营养繁殖试验。 三、实验原理 (一)分离繁殖

分离繁殖是将植物的营养器官如根茎或匍匐枝切割而培育成独个体的简便，成活率高。分离繁殖的类型有： 1

分株繁殖：是利用根上的不定芽、茎或地下茎上的芽产生新梢，

切离母体，成为一个独立的新个体。如牡丹、芍药、砂仁、射干等。 2

变态器官繁殖：根据繁殖材料采用母株部位的不同，可分为根茎

天南星、半夏）、球茎（番红花等）、鳞茎（如百合、贝母等）、块根（及等）、珠芽（如卷丹、黄独、半夏等）等。

分株繁殖的时期一般在春、秋两季。春天在发芽前进行，秋天在落叶

各地气候条件而定。花木类要注意分株对开花的影响。一般夏秋开花的宜

春天开花的则在秋季落叶后进行。这样在分株后能保证有足够的时间使根

有利于生长，且不影响开花。变态器官繁殖具体时间也因各地气候条件而均可进行，而北方宜在春季进行。

分离方法：对块根和块茎材料在割下后，先晾1～2d，使伤口稍干，口愈合，减少腐烂。为提高成活率，要及时栽种。

对球茎和鳞茎类材料，芽头要朝上，分株和根茎类根系要舒展，覆土

萌芽力和根蘖力强的树种，会自然分蘖，但为了提高分蘖的数量，有

分蘖的措施。常用的方法是行间开沟，切断水平根，施肥、填平、灌水，（二）压条繁殖

压条繁殖是将母株上的一部分枝条压入土中或用其他的湿润材料包部分生根，然后与母株分离，成为独立的新植株。

压条时期可分休眠期压条和生长期压条。休眠期压条在秋季落叶后

1～2年生成熟枝条进行压条。生长期压条是在生长季节中进行，一般为月，中南为春夏多雨时节）采用当年生枝条压条。压条的方法很多。 1

弯曲压条：将母株上近地面的1～2年生枝条弯曲压入土中生根。

至地面，再挖一深约8cm、宽10cm的浅沟，距母株近的一端挖成斜面

曲，使其与土壤密贴，沟的另一端挖成垂直面，以引导枝梢垂直向上，沟

的土壤并稍踏实，在枝条入沟和沟上弯曲处分别插一木或竹钩予以固定，用支柱扶直。生根后与母体分离栽植。此法适用于杜仲、玉兰等。 2

波状压条

此法与弯曲压条相似，所不同的是被压枝条常缩成

而使各露出地面部分的芽抽生新枝，埋于地下的部分产生不定根成为新植

用繁殖材料，提高繁殖系数。此法适用于枝条长而柔软或为蔓性的植物，

子等。一般于秋冬间进行压条，次年秋季即可分离母体。在夏季生长期间使养分向下方集中，有利于生根。 3

水平压条

又称沟压、连续压或水平复压，是我国应用最早的

枝条较长而且生长较易的植物，如忍冬、连翘等。此法的优点是能在同一

其缺点是操作不如弯曲压条法简便，各枝条的生长力往往不一致，而且易常仅在早春进行，一次压条可得2～3株苗木。 4堆土压条

堆土压条又称直立压条或壅土压条。采用堆土压条，

的性能。在其平茬截干后，覆土堆盖，待覆土部分萌发枝条，并于生根后

成为一新植株，这一方法所得苗比其他方法多。适合堆土压条的植物有栀

等。堆土压条可在早春发芽前对母株进行平茬截干，截干高度距地面越短

树干基部留5～6个芽处剪断，灌木可自地际处抹头，使其萌发新枝。堆

不同而异。对于嫩枝容易生根的如贴梗海棠，可于7月间，利用当年生分离时期一般在晚秋或早春进行。

5空中压条在母株上选1～2年生枝条将其压处刻伤或环割，将松软细

外用薄膜包扎，上下两头捆紧，或用从中部剖开的竹筒套住，其内填充细

浇水保持泥土湿润，待长出新株后，便与母株分离栽植。适用此法的植物

分离压条的时间一般在早春或秋末进行。分离较粗的压条时，最好分

对与母体割离的新植株，移植后应注意灌水、施肥、遮阳和防寒等工作。（三）扦插繁殖

扦插繁殖是利用植物营养器官的均衡作用，自母体割取任何一部分（

在适当条件下插入土、砂或其他基质中，利用其分生或再生能力，产生新

新植物的一种繁殖方式。扦插时期，因植物种类、特性、扦插方法和气候

适应性较强，扦插时间要求不严，除严寒或酷暑外，其他季节均可进行。

休眠期扦插和生长期扦插。落叶树大多采用休眠期扦插，少数也可以在生物多在6～7月多雨季节进行。 1

硬枝扦插

插条为已木质化的一年生或多年生枝进行扦插就是

健壮且无病虫害的1～2年生枝条，一般于深秋落叶后至次年芽萌动前采

季扦插的，可将接穗打好捆，挖坑沙藏过冬。落叶树种一般以中下部插穗

则宜选用充分木质化的带饱满顶芽的梢作插穗为好。每个插穗保留2～3

芽的插穗外，一般树种的接穗上切口为平口，离最上面一个芽1cm为宜（常绿树种应保留部分叶片。 2

绿枝扦插

插条为尚未木质化或半木质化的新梢，随采随插的

草本植物使用较多。以开始木质化的嫩枝为最好，容易愈合生根，但过嫩

条则不宜采用。当年生幼枝或芽作插条，5～7月扦插。采下的嫩枝及时

处、保持新鲜状态，不宜放在水中。每一插条须有3～4个芽，其长度一

口应在节下，保留叶片1～2枚，大叶片可剪去部分，以减少蒸腾。枝条

成活，应当去掉。然后在整好的苗床上，用相当于插条粗度的枝条，按一

的深度为插条长的2/3，随插洞插入插条，再将插条两侧的土按实，最后盖，以保持适当的温度、湿度，促进早日生根成活。 3

根插法

根插法是切取植物的根插入或埋入土中，使之成为新

根上能形成不定芽的药用植物都可以进行根插繁殖，如杜仲、厚朴、山楂

围挖取，也可在苗木出圃时，收取修剪下来或残留在土中的根段作材料，

根插的根条，其直径应在0.5cm以上，过细的根条，不宜选用。根条长度一

为区别根条的上下端，根的上端可剪成平口，下端为斜口，随后在整好的

8～12cm，沟距25～30cm，将根条按7～10cm株距，其上端朝一个方

壁，切勿倒插，最后覆土稍压紧，使根条与土壤紧贴，浇水，并保持湿度（四）嫁接繁殖

嫁接也称接木。将一种植物的枝或芽，接到另一种植物的茎或根上

起形成一个独立的新个体，称嫁接繁殖。供嫁接用的枝或芽叫接穗，承受

由于接穗采自遗传性状比较稳定的母本树上，因此嫁接后长成的苗

持母本的优良特性。嫁接苗能促进苗木的生长发育，提早开花结果和进入

生苗需8～10年才开始开花结果，20年后方进入盛果期，但嫁接苗只需

10年后便进入盛果期。嫁接苗这种促进苗木生长发育，提早开花结果的

培，也可用于育种，从而缩短育种工作年限。通过嫁接，可利用砧木对接栽培上，高接应用具有广阔的应用前景。 四、实验仪器与材料

仪器：单面刀片、水桶、塑料盆、喷雾器、铁锨等简易田间劳动工具材料：生根粉、连翘、忍冬、射干等药用植物。 五、实验方法与步骤

1．准备苗床，高15厘米，宽50厘米，用小竹杆做成小拱架，用80

成小拱棚。

2．黄芩扦插，将生长健壮的黄芩植株茎干剪成5厘米长的段，每段带用生根粉浸泡后插在备好的苗床上，保湿。

3．射干分株繁殖，将生长健壮的射干植株挖出，剪去叶片，切成2-床上，保湿。

4．忍冬扦插，将生长健壮的忍冬植株茎干剪成15厘米长的段，每段端用生根粉浸泡后插在备好的苗床上，保湿。

5．连翘空中压条繁殖，在连翘母株上选1～2年生枝条将其压处刻伤

和苔藓混合后裹上，外用薄膜包扎，上下两头捆紧，或用从中部剖开的竹

土。要经常给压条处浇水保持泥土湿润，待长出新株后，便与母株分离栽

6．忍冬弯曲压条繁殖，在忍冬母株上近地面的1～2年生枝条弯曲压

压的枝条弯曲至地面，再挖一深约8cm、宽10cm的浅沟，距母株近的

顺应枝条的弯曲，使其与土壤密贴，沟的另一端挖成垂直面，以引导枝梢

加入松软肥沃的土壤并稍踏实，在枝条入沟和沟上弯曲处分别插一木或竹面的枝条，需用支柱扶直。 7．观察发芽情况，统计发芽率 六、作业

撰写营养繁殖实验报告。

实验六高原野生药用植物引种观察

一、实验目的

掌握高原野生药用植物向低海拔引种驯化的方法。 二、实验内容

高原野生药用植物向低海拔引种驯化。 三、实验原理

高原野生药用植物蕴藏量多分布在海拔高、人口稀少、交通不便的边

加之家种区域性强，生产规模小，所以在较长的时期不可能会发生市场需

长缓慢、繁殖困难，多货紧价扬，导致野生资源大量采挖，源蕴藏量大幅

虫夏草、独一味、红景天等多已处于濒危状态。通过人工驯化栽培，实现

显的社会效益和生态效益。生产上必须解决种子休眠、幼苗遮荫、高温季四、实验仪器与材料

仪器：电子天平、培养皿、水桶、塑料盆、铁锨等简易田间劳动工具材料：的幼苗及种子，遮阳网。 五、实验方法与步骤 1.种子处理

选取颗粒饱满、发育完善、大小均匀一致、不携带虫卵病菌、生活力大黄、甘肃贝母种子。

将种子经0.1%升汞表面消毒后，用流水冲洗至充分湿润，于0～5℃

（1周、2周、3周、4周、5周），每个处理设三次重复，每次重复供于脱脂棉滤纸的培养皿中，（24℃）恒温催芽，测定发芽率。 赤霉素破除方法

同样用0.1%升汞将种子消毒后，再分别用不同浓度的赤霉素处理10

次重复，每次重复供试种子100粒，摆放于脱脂棉滤纸的培养皿中，过2．播种

整理好苗床，独一味、唐古特大黄、甘肃贝母分别按行株距30X20、

进行播种，独一味、唐古特大黄、甘肃贝母播深分别为0.5、3、1厘米3．移栽

从本校高原实验点或野生分布区选择生长健壮的1年生幼苗，带土移4．观察出苗生长状态。 六、作业

撰写高原野生药用植物向低海拔引种驯化的实验报告。