药学中的药物分析

药品检验工作的基本程序一般为取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告。 2、药品鉴别试验的意义是什么？药物的鉴别包括哪些项目？

根据药物的分子结构、理化性质，采用化学、物理化学或生物学方法来判断药物的真伪，是药品质量检验工作的首项任务。鉴别试验的方法均为用来证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，而不是对未知物进行定性分析。 鉴别试验项目有性状（外观、溶解度、物理常数（熔点、比旋度、吸收系数）），有机氟化物，有机酸盐（水杨酸盐、酒石酸盐），芳香第一胺类，托烷生物碱类、无机金属盐（钠盐、钾盐、钙盐、钡盐、铵盐），无机酸根（氯化物、硫酸盐、硝酸盐）。

3、药物纯度的综合评定包含哪些方面？药物杂质检查的意义是什么？药物中杂质的主要来源是什么？

药物的纯度需要将药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定等方面作为一个有联系的整体进行综合评定。 药物杂质检查以保证药品质量和临床用药的安全、有效，同时也为生产和流通过程的药品质量管理提供依据。 药物中杂质的来源主要有生产过程中引入、贮藏过程中引入。

4、什么是杂质限量？杂质限量检查的意义和主要做法。杂质限量检查的有关计算。

对于药物中所存在的杂质，在不影响疗效、不产生毒性和保证药物质量的原则下，综合考虑杂质的安全性、生产的可行性和产品的稳定性，允许药物中含有一定量的杂质，药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量，通产用百分之几或百万分之几来表示。

杂质限量检查的方法主要分为两种：一是限量检查法，另一种是对杂质进行定量检查。限量检查通常不要求测定其准确含量，只需检查杂质是否超过限量。进行限量检查多采用对照法、灵敏度法和比较法。 5、干燥失重测定有哪些主要方法？分别适用何种情况？何谓“恒重”？ 干燥失重常用方法有常压恒温干燥法（适用于受热较稳定的药物）、减压干燥法与恒温减压干燥法（熔点低或受热不稳定或难以去除水分的药物）、干燥剂干燥法（受热分解或易升华的药物）、热分析法（）。供试品连续两次干燥或炽灼后称重的差异在0.3mg以下即为恒重。

6、简述凯氏定氮法、氧瓶燃烧法的原理。

凯氏定氮法将含氮药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热,药物分子中有机结构被氧化分解成二氧化碳和水,有机结合的氮则变为无机氨，并与过量的硫酸结合为硫酸氢铵和硫酸铵，经氢氧化钠碱化后释放出氨气，并随水蒸气馏出，用硼酸溶液或定量的酸滴定液吸收后，再用酸或碱滴定液滴定。

氧瓶燃烧法将含有待测元素的有机药物置于充满氧气的密闭燃烧瓶中充分燃烧，使有机结构部分彻底分解为二氧化碳和水，而待测元素根据电负性的不同转化为不同价态的氧化物（或无氧酸），被吸收于适当的吸收液中，再根据其性质和存在形式采用适宜的方法进行分析。

7、容量分析法、紫外-可见分光光度法、色谱分析法的特点及其适用对象。

容量分析法：所用仪器价廉易得，操作方便、快速，方法耐用性高，测定结果准确，通常情况下其相对误差在0.2%以下。但专属性较差，一般适用于含量较高的试样的分析。广泛用于化学原料药的含量测定。

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紫外-可见分光光度法：灵敏度高，可达10~10g/ml；准确度高，相对误差为2%~5%；仪器价格较低廉，操作简单，易于普及；应用广泛。许多化合物均可采用本法测定，同时还可以应用计算分光光度法不经分离直接测定混合物中各组分的含量。

色谱分析法：根据混合物中各组分的色谱行为差异（如在吸附剂上的吸附能力的不同或在两相中的分配系数不同等），现行分离后再在线对各组分逐一进行分析的方法。是分析混合物最有力的手段。

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色谱法中的高效液相色谱法具有高灵敏度10~10g/ml、高选择性、高效能、高速度及应用广泛的特点。 8、高效液相色谱法、气相色谱法的系统适用性试验的内容及其意义。 高效液相色谱法系统适用性试验有色谱柱的理论板数（n）；分离度（R）—定量分析时分离度应大于1.5；重复性—峰面积测量值相对标准偏差应不大于2.0%；拖尾因子（T）—保证分离效果和测量精度，峰高测定法时T应在0.95~1.05之间，峰面积法测定时，T值偏离过大时也会影响小峰的检测和定量的准确性。 气相色谱法系统适用性试验的内容同高效液相色谱法。

9、鉴别试验、含量测定、杂质或降解产物的限度检查和定量测定方法，应分别选取哪些指标对其进行方法的验证？ 鉴别试验：专属性、耐用性

原料药中主成分或制剂中有效成分的含量测定及溶出度：准确度、精密度、专属性、线性、范围、耐用性。

杂质或降解物的测定：鉴别试验、专属性、耐用性。 限度检查：专属性、检测限、耐用性。

定量测定：准确度、精密度、专属性、定量限、线性、范围、耐用性。 10、巴比妥类药物的紫外吸收光谱特征。

巴比妥类药物的紫外吸收光谱随着其电离级数不同，发生显著变化。

在酸性溶液中，5,5-二取代和1,5,5-三取代巴比妥类药物不电离，无明显紫外吸收峰。在PH10的碱性溶液中发生一级电离，形成共轭体系结构，在240nm波长处有最大吸收峰。在PH13强碱溶液中5,5-二取代巴比妥类药物发生二级电离，引起共轭体系延长，导致吸收峰红移至255nm，1,5,5-三取代巴比妥类药物，因1位取代基的存在，不发生二级电离，最大吸收峰仍为240nm。

硫代巴比妥类药物在酸性或碱性溶液中均有较明显的紫外吸收。硫喷妥在盐酸（0.1mol/L）中两个吸收峰为278nm和238nm，在氢氧化钠（0.1mol/L）中吸收峰为304nm和255nm。在强碱PH13处硫代巴比妥类药物在255nm处的吸收峰消失，只存在304nm的吸收峰。

11、亚硝酸钠滴定法的主要条件和指示终点的方法。 亚硝酸钠滴定法的主要条件有：

1）加入适量溴化钾加快反应速度。整个反应速度取决于第一步，第一步反应的快慢与含芳伯氨基化合物中芳伯氨基的游离程度有密切关系，如芳伯氨基的碱性较弱，则在一定强度酸性溶液中成盐的比例较小，即游离芳伯氨基多，重氮化反应速度就快。

2）加过量盐酸加速反应。胺类药物的盐酸盐较其硫酸盐的溶解度大，反应速度也较快，所以多采用盐酸。加过量盐酸有利于重氮化反应速度加快，重氮盐在酸性溶液中稳定，防止生成偶氮氨基化合物而影响测定结果。加入盐酸的量一般按芳胺类药物与酸的摩尔比约为1：2.5~6。

12、酸性染料比色法测定硫酸阿托品片和注射液的原理及主要影响因素。

酸性染料比色法利用碱性药物在一定的PH条件下，可与某些酸性染料结合显色，而进行分光光度法测定含量的方法。碱性药物在适当的PH水溶液中可与氢离子结合成阳离子，酸性染料可解离成阴离子，两种离子定量结合，生成就具有吸收光谱明显红移的有色离子对可定量地被有机溶剂萃取，在特征波长处测定有机相中的有色离子对的吸光度。 主要影响因素有水相PH、酸性染料的种类、有机溶剂的种类和性质、有机相中的水分及酸性染料中的有色杂质。 13、盐酸氯丙嗪原料药及其片剂、注射液含量测定方法的区别和原因。

氯丙嗪原料药用非水溶液滴定法；片剂和注射液用紫外分光光度法，两者吸收波长不同，吸收系数不同；注射液还可用萃取-双波长分光光度法。片剂中有硬酯酸镁等辅助剂的干扰，注射液中有水和氧化剂的干扰。 14、反相高效液相色谱法的原理及地西泮含量测定的应用。

反相高效液相色谱法是指流动相的极性大于固定相的极性的色谱方法。常用烷基硅烷键合硅胶化学键合相作为固定相，如十八烷基、辛烷基、肼丙基等烷基硅烷键合硅胶；流动相多用甲醇或乙腈等有机溶剂与水或缓冲液混合组成的溶剂系统，极性强。化学键合固定相允许的流动相PH范围通常为2~8，经特别峰端处理的固定相允许PH的范围达1.5~11。 反相高效液相色谱分析时，极性强的组分先被洗脱。适用于共存组分的极性等化学性质有差异的样品分析。 地西泮含量测定用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，乙腈-甲醇-水为流动相。 15、离子对高效液相色谱法的原理及其应用。

离子对高效液相色谱法是在流动相中加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，形成离子对化合物后，使待测组分在非极性固定相中的分配与溶解度增加，从而改善其色谱保留与分离行为的色谱法。

分析碱性物质时常用离子对试剂为烷基磺酸盐阴离子对试剂；分析酸性药物时常用季铵盐阳离子对试剂。 适用于在反相液相色谱法中呈离子状态的药物，如有机酸、有机碱类。（异丙嗪、阿托品） 6、抗生素中高分子杂质的定义、来源及主要分析方法。

抗生素中的高分子杂质是对药品中分子量大于药物本身的杂质的总称，其分子量一般在1000~5000，个别可至约10000。 高分子杂质来源分为外源性和内源性杂质，前者来源于发酵工艺，后者来源于生产和贮存过程中，甚至是使用不当而产生。

分析方法为Sephadex G-10凝胶色谱系统，分为HPLC系统和简单测定系统。 16．片剂的含量均匀度、溶出度和释放度测定的意义。

片剂含量均匀度指小剂量或单剂量的固体制剂、半固体制剂和非均相液体制剂等每片（个）含量符合标示量的程度。片

剂、胶囊剂或注射用无菌粉末每片标示量不大于10mg或主药含量小于每片重量5%，其他制剂中每个标示量小于2mg或主要含量小于每个重量2%，透皮贴剂均应检查含量均匀度。凡检查含量均匀度的制剂不再检查重量差异。（药物的均一性）

溶出度是指药物从片剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速率和程度。溶出度是片剂质量控制的一个重要指标，对难溶性的药物一般应作溶出度检查，凡检查溶出度的制剂，不再进行崩解时限的检查。 释放度取样的三个时间点中，第一点一般在开始的半小时~2小时内，用于考察是否有突释；第二点为中间的取样时间点，用于确定释药的特性；最后的取样时间点用于考察释药是否基本完全，最后一个时间点的积累释放率一般为75%以上。 17．片剂和注射剂中药物含量测定时常见干扰及排除（糖类、硬脂酸镁、抗氧剂）。

糖类：乳糖本身具有还原性，淀粉、糊精、蔗糖虽然本身无明显还原性，但水解产生的葡萄糖具有还原性。糖类可能干扰氧化还原滴定，特别是使用具有较强氧化性的滴定剂，如高锰酸钾、溴酸钾法、碘量法、溴量法。含糖类附加剂片剂含量测定是应避免使用氧化性强的滴定剂，做对照试验，若阴性对照品消耗滴定剂，应改换其他方法测定。铈量法不受糖类干扰。

硬脂酸镁：镁离子可干扰配位滴定法；硬脂酸根离子可干扰非水滴定法（非水碱量法）。镁离子干扰配位滴定时可加入掩蔽剂掩蔽，在PH6~7.5环境下酒石酸可以和镁离子形成稳定的配位化合物而将其掩蔽。硬脂酸根离子可被高氯酸滴定，可采用适当有机溶剂提取药物后再测定，也可采用草酸作为掩蔽剂消除硬脂酸根的干扰。当硬脂酸镁对测定有干扰时可改换其他方法，如有机碱性药物，其原料药采用非水溶液滴定法，片剂采用紫外分光光度法测定含量。

抗氧剂：具有还原性的注射剂常加入抗氧剂增加药物稳定性。如亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠及维生素C。这些物质都具有较强的还原性，当用氧化还原法测定时会产生干扰。1）加入掩蔽剂，亚硫酸钠、亚硫酸氢钠或焦亚硫酸钠可加入丙酮或甲醛消除干扰。选用时注意甲醛的还原性，若采用的滴定液为较强的氧化剂，有可能氧化甲醛。2）加酸分解，亚硫酸钠、亚硫酸氢钠及焦亚硫酸钠均可被强酸分解，产生二氧化硫气体。注意主药是否能耐酸。3）加入弱氧化剂氧化。4）利用主药和抗氧化剂的紫外吸收光谱差异进行测定。 18、药品质量标准的定义及药品质量标准制订应遵循的原则。

药品质量标准是国家对药品质量、规格和检验方法所作的技术规定，是药品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的法定依据。

制定遵循的原则有安全有效、先进性、针对性、规范性。

19、选择鉴别方法的基本原则、确定杂质检查及其限量的基本原理和选择含量测定方法的基本原则。

选择鉴别方法的基本原则有1）方法要有一定的专属性、灵敏性，且便于推广；2）化学法与仪器法相结合；3）尽可能采用药典中收载的方法。

确定杂质检查及其限量的基本原则有1）针对性；2）合理性。

选择含量测定方法的基本原则有1）原料药（西药）的含量测定应首选容量分析法；2）制剂的含量测定应首选色谱法；3）对于酶类药品首选酶分析法，抗生素类药品应首选HPLC法及微生物检定法，放射性药品应首选放射性药品检定法；4）在上述方法均不合适时，可考虑使用计算分光光度法；5）对于新药的研制。其含量测定应选用原理不同的两种方法进行对照性测定。