上皮跨膜电阻仪EVOM使用手册

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使用手册 目录 手册说明 1 简介 1 快速参考指南 2 电阻测量 2 电压测量 2 产品概述 3 配置清单 3 启封 3 调试 3 校准电阻仪 3 STX2 电极 4 仪表 4 设备诊断 5 测试 EVOM2 仪表 5 电压测量前的电极调整 5 操作说明 7 设备维护 11 电极 11 抛光/清洗STX2电极 11 STX2电极消毒 12 典型消毒方案 12 电极储存 12 EVOM2 充电器及电池 13 电池充电 13 附件 16 故障诊断 18 EVOM2 仪表 18 STX2 电极 18 断开与记录仪的链接进行诊断 19 规格 22 附录 A: 电阻计算 23 电阻 23 插入“blank”电阻 23 单位面积电阻 23 附录 B: 直径24 mm(6孔)插入皿和STX电极 25 附录 C: 精度及可重复性性能提升 26 索引 27 符合说明 29 质量保证 30 退换货 30 手册说明 本手册中的以下标志: 小心！操作可能导致仪器损坏。请仔细阅读相关说明 警告！操作可能导致人身伤害或者威胁人身安全。请仔细阅读相关说明。 注释或提示包含帮助信息。 简介 EVOM是第一代专门测量常规组织培养跨上皮电阻的设备。 EVOM2是其新一代产品，新的设计更易于操作。EVOM2不仅可以定量测量细胞单层的健康，而且可以定量测量细胞汇合。独创的电路及STX2电极探测细胞单层的汇合。当结合使用WPI的endohm腔室，EVOM2还可以用来更精确地测量跨内皮电阻。 EVOM2产生交流电流，这样可以避免由直流电流产生的电极金属沉积和对组织的副作用，另外，阻抗的测量不受膜电容和膜电压的影响。 EVOM2内置可充电的镍-氢电池，电流为2200毫安时。电池由外源电池充电器充电，完全充满电后可以使用8小时。当电池电量低于正常工作水平时，仪器会自动关闭。当插入交流电源时要使仪器安全工作，WPI建议在测量时将仪器与充电器断开。之所以这样做，是为了提供最大的电子隔离以避免干扰，同时降低噪音以确保读数的精准。 关于TEER自动测量，请考虑WPI’s REMS 自动进样器(WPI# REMS),它包括机械取样器，数据获取板，底座，基于windows的软件和24孔或者96孔用电极。 快速参考指南 关于使用EVOM2具体测量步骤请参阅第7页”操作说明” 电阻测量 1. 将EVOM2与充电器断开并且打开电源(I) 2. 将功能开关调至OHMs 3. 连接电极. 4. 测量. 电压测量 1. 将电极连接至EVOM2 2. 关闭电源，平衡电极 注意：电极必须浸入在溶液中进行平衡。 3. 将EVOM2与充电器断开并且打开电源(I)。. 4. 将功能开关调至MILLIVOLTS 。 5. 测量 安装 校准电阻器 图1为 1000电阻器（WPI #91750）请阅读以下EVOM2检测说明STX2 电极 STX2电极（如图2）只能用于电阻测量， 可以直接从干燥的储存环境拿来使用而不需要预处理。STX2电极由一对宽4毫米厚1毫米的电极组成。每个电极包括一个外电极和一个内电极。（第8页图4）外 电极是小的银板，用来传递样品膜 上的电流，它们被称为电流电极。 内电极是小的银/氯化银成分构成的电压传感器，它们被称为电压电极。 仪表 在利用一个螺丝起子（需自购）校准R ADJ 螺口之后，EVOM2就可以使用了。 注意：要延长仪器的使用寿命，请勿长时间将仪器置于阳光下，否则屏幕会变黑导致无法读数。 1. LCD显示屏 2. 电源开关 3. 功能开关 4. 模拟输出 5. R ADJ 校准 6. 输入 7. 充电接口 Fig. 3—EVOM2 meter ①数字液晶显示屏：数字液晶显示屏上可以显示4位半数值，在测量电压时，它显示两个电极之间电势差，以毫伏表示最高999.9毫伏；在测量电阻时，它显示两电极之间的阻抗即欧姆。尽管仪器可以显示13000，但额定精度只到②电源开关 I/O:棒状开关可以将仪器打开（I）或者关闭（O） ③功能开关 (Ohms/Millivolts): 调拨到 Ohms 档, 仪器处于电阻测量模式；调拨到Millivolts 档, 仪器则处于电压测量模式. ④模拟输出:标准BNC连接允许将模拟数据输出到记录仪器. ⑤R ADJ 校准旋钮: 将1000 电阻器接入到输入接口时，在电阻测量模式下，旋钮可以用来校准仪器显示到1000的量程. ⑥输入: 将测试电阻器、STX2、STX3 或者Endohm腔室的电话线插头（RJ-11）插入到该口以连接到测量仪器. ⑦充电接口: 接入充电器的插头，并且将充电器的另一头接电源插座可以为EVOM2电池充电。但在充电时请勿测量电阻或者电压. 设备诊断 建议第一次使用EVOM2时先对设备进行测试，并且在后续要进行周期性的检查。如果担心仪器或者电极不能正常工作，可以参考以下的内容来判断EVOM2的工作状态： 测试EVOM2仪表 1. 将测试电阻器的RJ-11插头插入仪器的输入接口 2. 将功能开关置于欧姆档 3. 将EVOM2与充电器断开并打开电源。仪器将显示1000 如果不是，用螺丝起子调节R-ADJ旋钮直到仪器显示1000. 调节电极进行电压测量 1. 根据第7页“操作说明2-准备电极”操作提示平衡电极. 注意：在测量电压前，必须先将电极浸入溶液中至少12小时进行平衡. 2. 将电极头部浸入到实验用培养基或者0.1-0.15M的KCl或者NaCl电解质溶液中. 3. 将功能开关置于毫伏. 4. 将EVOM2与充电器断开,并打开电源 (I). 注意: 在一段时期内多次电压测量后会产生电压漂移. 5. 当仪器显示读数为0时，电极可以用来测量电压,如果仪器读数不为0，参考 “故障诊断”. 操作说明 EVOM2 用来测量电阻时，电极在使用前不需要被平衡或者预处理。如果测量结果出现不一致的情况，可以对设备进行调整来补偿。 测量阻抗或者电压时，请遵循以下步骤: 1. 将EVOM2 与充电器断开. 2. 电极与仪器相连，将RJ插头接入到输入接口。. 3. 准备STX2 电极. A. 电极预处理. 测量电阻时：不需要进行任何预处理，可以直接从干储存环境中取出使用。 测量电压时：电极使用前则需要平衡。为了确保电压稳定性和较低的电极间电势差，关闭EVOM2电源（O），并且在电极连接到EVOM2时，将电极浸入到电解液中(0.1 – 0.15M KCl)。当STX2 电压电极连接到设备且关闭电源时，在内部会形成短路。当电压电极回路短路几小时后，电极间的不对称电势差就会减小，内部电极直流电势差只有几毫伏甚至更少，同时十分稳定，表1列出了平衡电极所需要的时间。 表 1: STX2 电极平衡时间 电极所处环境 达到平衡的时间 在干燥环境 24 小时 在溶液中 2 小时 B. 如果希望消毒的话，可以参阅操作说明中的“STX2消毒” 4. 将电极置于样杯中. STX2 电极设计用来测量组织培养孔中表皮细胞的膜电压和电阻。由于电极之间的长度有差异，允许外部长的电极接触到含有外部培养基盘子底部，这样可以防止内部短的电极接触组织培养杯的底部。 (图4). 这种结构确保电极和细胞层之间的合适位置。另外，长电极 每次都接触到容器底部，大 大提高了重复测量的准确性。 将电极置于溶液中时，头部刚 好接触到容器的底部而不会 使电极变形。见图5。 备注：电极浸入角度不正确（图6）或者浸入深度不够（图7）会影响到阻 抗测量. 注意:要对同一个样品杯中获得可复制性的结果，电极位置必须保持不变。要提高可重复性结果和测量的稳定性，在测量过程中必须保证电极的稳定性。 当心: 当把电极从一个样杯移动到另外一个量杯时，最好不要用蒸馏水冲洗银/氯化银电极。如果使用蒸馏水冲洗银/氯化银电极，在从一个样杯移动到另外一个量杯时，会需要几分钟时间进行复位，而在这个过程中会出现电压几个毫伏的漂移。如果必须要清洗以避免将一种样本带入到另外一个样本中，电极请用实验用培养基冲洗。 提示: 由Corning Costar生产的Transwell 培养皿, 通常在过滤杯底部和培养板之间有较大的距离。同时这个距离会由于每批产品的不同而不同，而这个差异可能会导致短的电极接触到细胞层而长的电极也接触到培养杯的底部。这种情况下，Transwell用户可以使用STX3电极代替STX2。STX3电极是一种可调节的电极，或者可以用砂纸将短电极上磨掉0.5毫米。见右图。将600级砂纸放置在桌子边缘，垂直握住电极使短电极接触砂纸而长电极 悬空，拖动电极在砂纸上轻轻滑动， 直到得到合适的长度。 图 8—打磨 STX2 电极 警告: 只有STX2电极的绿色部分才能被打磨。 请勿打磨或损坏电极的任何金属部位 5. 电阻测量. A. 功能开关置于欧姆档. B. 断开EVOM2 充电器，打开电源开关(I). C. 将电解液倒入空的杯子中。 (例如, 不含细胞的细胞培养皿) D. 将电极置于空白培养杯中. 这时会显示溶液的电阻读数。这个空白电阻值应该加入到测量的组织培养的跨膜电阻里进行计算。详细内容参见附录A中电阻的计算。 注意：空白电阻必须测量，然后从测得的跨膜电阻减去，这样可以得到真实的跨膜电阻。 6. 电压测量 A. 将功能开关置于毫伏档 B. 断开EVOM2充电器，打开电源开关(I). C. 将平衡好的电极插入到细胞培养皿，仪器会显示稳定的膜间电压读数。 注意：内部短电极将连接到设备地线作为参照电极。如果仪器读数为正，则细胞组织的基底面（黏在插入杯底部）相对于顶层（暴露的部分）的电压为正；相反的，如果读数为负，则细胞组织的底层对顶层的电压为负。 注意：操作步骤参考第2页的“快速参考指南”。 设备维护 备件订购请参考表2中的零件号。 其他附件参考13页表3。 表2: 备件 WPI 零件号 说明 STX2 电极 91750 1,000 电阻器 电极 电极必须正确清洗、消毒和储存。 注意: 请勿灼烧电极，否则会引起金属融化，并使电极的质量保证无法保证。 清洁STX2电极表面 在使用中，电极表面可能被蛋白质或其他物质覆盖。这种堆积或污染，会导致系统效率的降低，引起10-20mV电压误差，或者读数不稳（电阻测量不受影响）。如果需要解决这个问题，可以按以下步骤重新氯化电极或者清洁电极表面。 重新氯化 – 将电极浸入未经稀释的家用漂白水3分钟，浸泡后用清水立即冲洗，尽管这将重新氯化电极表面，但是不能纠正误差。 当心！确保只有电极尖端置于漂白液中，不能将漂白液 接触电极上部。 电极表面抛光--用600级砂纸轻轻打磨STX2的电压电极顶端内侧的银质小球(图9)，轻轻除去银质小球的表层即可。 当心：多次重复打磨最终会除去所有的 Ag/AgCl 小球，如果打磨不再改善电压读数时，则需要更换电极。 提示：如果没有600级砂纸，可用橡皮擦代替。 对STX2电极消毒 STX2 电极是未经消毒的。可以用酒精、环氧乙烷、紫外线或者杀菌剂如Cidex Plus (WPI #7364) 或者 Sporicidin. 当心：电极不能用高压灭菌器消毒。 典型消毒方案 在层流净化罩中: 1. 将电极在Cidex Plus (wPI #7364) 浸泡15分钟，然后用15秒风干。 当心：电极每次在酒精中的浸泡时间不能超过30分钟。 在酒精里长时间的浸泡，会破坏电极表面的保护层，从 而缩短电极使用寿命。 2. 用类似实验细胞培养液的消过毒的电解液或者0.1-0.15M KCl 或者 NaCl 溶液冲洗电极。 3. 现在电极可以用来测量电阻。 4. 测量电压时，在无菌电解质溶液中平衡电极。 提示：电极可以存储在一个UV罩保持无菌状态。 注意：当电极暴露在强光或者紫外线中时，电极表面会形成一层黑色氧化膜，通常，氧化膜不会影响电极性能。为了避免氧化膜的行成，应该避光储存。 电极存储 短期存储（两周以内）：浸泡电极尖端在电解液中。确保电极线缆插头连接到EVOM2设备，以便保证系统内部短路并且保证电极对称性。 长期存储（两周以上）：长期存储时，电极要用蒸馏水清洗并且放置在干燥、黑暗处。 EVOM2 充电器和电池 注意: 电池充电时确认EVOM2 电源开关已关闭。 EVOM2 充电器接交流电源可以给电池充电。配备的通用电源可在多个国家使用。EVOM2 包含有6V 2200mAH 可充电镍氢电池。 电池充电 电池可进行500次的充放电，可以在任何时候，且可以进行连续充电。 图 10–镍氢电池 警告：请使用EVOM2 充电器。 使用其他充电器能会损坏电池。 根据使用情况，电池寿命约1-2年。 镍氢电池在不使用情况下也会放电，放电速度和温度有关，温度越低，放电速度越低。如果电池长期处于放电状态可能会损坏电池。为防止电池损坏，至少每两个月对电池充电一次。如果EVOM2中的电池失效，可使用备用电池(WPI #91736)。见16页“附件” 更换电池： 1.使用螺丝起子取下 EVOM2外箱上的4个螺丝钉。

图 11–电池固定在EVOM2的地盘上 2.电池安置在基板的底部，使用飞利浦1号螺丝起子卸下固定电池的两个螺丝钉。 3. 竖直地拔出连接在电路板上的塑料连接头（图12）。注意连接头及不同颜色电线的位置。 4. 妥善地处理使用过的电池。. 5. 电池连接头只能用单向安装。如果连接头不能很轻松地安装到位，不要强行压入。要安装电池，将锁扣立在连接头带有凸舌的电路板上。锁扣装置必须紧靠锁紧架。（图13）。轻轻将连接头划过电路板上的芯针，垂直向下推接头压到底。 警告：安装电池时请勿颠倒电池极性,否则可能会导致人身安全或者对设备造成损害。 图 12–电池连接器安装到位 6. 安装电池固定板； 7. 安装外壳； 8. 对新电池充电24小时以上。 附件 表3列出了附件及其相关信息。大部分零件描述见后面。 表 3: 附件清单 WPI 料号 说明 仪表附件 3993 电极适配器 (2毫米针芯用) 2851 标准BNC电缆线, 6英尺 91736 镍氢可充电电池 91750 1000Ω电阻仪 表皮细胞测量用电极 STX2 替换电极盒 STX3 可调电极盒 表皮/内皮细胞测量用电极 ENDOHM-6 用于6毫米培养杯（24孔/板）和12毫米Millcell-CM杯 ENDOHM-12 用于12毫米培养杯（12孔/板） ENDOHM-24SNAP 用于24毫米和Costar Snapwell培养杯（6孔/板） HTS (高通量)内皮细胞测量用电极 STX100C STX100用于Costar Snapwell HTS 24孔板 STX100M STX100用于MilliporeCaCo96孔板 96STX100C96 STX100用于Corning HTS 96孔板 带有合成膜的细胞培养杯 CALICELL-12 用于Endohm6/12的12毫米标准池 CALICELL-24 用于Endohm-24的24毫米标准池 其它配件 7364 戊二醛溶剂（夸脱） LAb-TRAX-4 4-通道数据采集系统 电极适配器 (WPI# 3993)能将以RJ-11形式的4个接触点转换为4个独立的2毫米针芯插孔。这样可以使用户将EVOM2连接到USSING系统或者其它4电极系统。 STX2 可供EVOM2 使用，可用来测量培养的表皮组织膜间电阻(TEER)和电压。电极上带有一对4毫米宽1毫米厚的电极尖，每个电极尖含有一个外面（电压）电极和一个内面（电流）电极。 STX3可以用在EVOM2上来代替STX2电极。 与STX2电极不同的是STX3电极间的距离是可调节的。 STX100C 和 STX100F 是使用EVOM2的可选电极。特别是用在高通量药物筛选上，它们结合了STX2和Endohm的优点，可很好的重复直接测量培养皿中的跨膜电阻。 Endohm 作为EVOM2可选电极室用来测量低电阻培养细胞或者高精度测量用，也可以用来研究化学物和其他因素引起的紧密连接的改变。插入膜上下的同心电极对大大提高了测量的稳定性和可重复性。与STX2不同的是，培养皿必须从培养板转运至Endohm进行测量。 CaliCell是一种由合成膜制作的细胞培养皿，该膜模拟溶液中融合的表皮细胞膜电阻。每个CaliCell培养皿在生产时就已经确定电阻值，据此系统电阻具有可比性。CaliCell 当用于产生低电阻的融合细胞时尤其有用，甚至让人担心EVOM2没有正常工作。CaliCell 获取的高电阻读数肯定EVOM2 处于工作状态。尽管电阻随时间变化会有所变化，但在室温下CaliCell 在几年之内都会保持在一个合理的常数。同时它也可以用各种电极配置来检测EVOM2(或USSING) 系统。 故障排除 EVOM2 仪器 大部分时间，系统故障都与电极有关而非是仪表本身。至少一半的仪表失效是由于开关被腐蚀而导致的，典型原因是盐溶液的泄露或者仪器上的培养基造成的腐蚀。如果仪器远离盐溶液，则可以减少上述情况的发生，仪表也工作正常。 STX2 电极 尽管STX2电极质保期只有30天，但根据其使用情况一般寿命是1-2年。使用过程中可能会碰到以下问题： 读数不稳定或者电压读数偏高：如果电极失效，最普遍的现象是读数不稳定或者电压读数偏高。 电阻过低：如果仪器显示低于预期电阻值，但是读数稳定并且可重现，最可能是因为细胞培养，而不是电极或者仪器。如果没有定量测试方法进行就地测试或者湿试法测量电极。两个定性测试方法可以用来判断电极是否正常工作，并且会对电阻的增加有所反应。 使用WPI的CaliCell测试电极，CaliCell是一种由合成膜制作的细胞培养皿，该膜模拟溶液中融合的表皮细胞膜电阻。每个CaliCell培养皿在生产时就已经确定电阻值，据此系统电阻具有可比性。 测量充满电解液的培养皿和空白培养插之间的电阻差值，如 果电极保持静止，单独的电解液的电阻值应该低于50并且稳 定。空白培养插正常情况下电阻值在80-200Ω之间，品牌和 大小不同会有差异。 提示：正常使用时，记录使用每个不同种类培养插或使用不同培养基的电阻值非常有用，一旦担心电极有问题，可以比较当前读数和以前记录的差异，从而可以用来判断电极是否工作正常。 故障 设备短暂 运行后关 可能原解决方案 重新充电至少12小时 充电不足 注意：充电时确认EVOM2电源已关闭。 仪器电源检查电源连接器是否与仪器电源输入接口正确连接。 输入接口 无法充电 连接失效 充电器失用电压表校验电源输出电压是否正常，如果没有12V的直流输出，效 换充电器 电池电量不足时设备会自动关机。关机并且连接充电器进行至少 电池充电12小时的充电。完全充电需要24小时。为保证操作可靠性，仪器设备无法不足 最好在使用前一天进行充电（充电时关闭电源）。 启动 替换电池或者联系WPI客服。 电池失效 参阅13页“电池更换” 确保充电器连接在带电的插座上，1分钟后再次测量。如果电压 输出不为0 (普通培养基)并且电池已充好电，仪器还有故障.在联 电池电量系WPI技术支持前，重新对设备进行24小时充电并且重复操作。 不足 故障 可能原因 电极附近解决方案 将系统从电磁辐射区域移开。电磁辐射源包括：计算机，MPI设有强电磁 探针上面的银/氯化银接触点可能由于电极对之间离子电荷分布不 备，磁力搅拌器，等。 辐射源 没有对电极 均匀而极化。可以先将探针电极浸入0.1MKCl溶液24小时让电路短电压读数 不稳定 进行平衡 路来中和这种离子电荷。当连接到仪器并将电源关闭，且把功能开电源线或 关置于欧姆档时探针间形成短路。 者输出接 电极污染 清洗电极（参考11页“抛光/清洗STX2电极”）。 电压 口连接到断开与记录仪的连接然后再检查读数 电极间存在 检查电极间的表面区域是否存有连接内面和外面电极的导电桥。如记录仪上读数 而造成影可导电污染物 果不能清除则需要更换电极。 不为零 响 在连接每个电极与手柄导线的铜导体上涂有起保护作用的透明绝缘 物质。当探针使用过久时这种图层会损失而导致溶液中的盐分依附 线路存在腐蚀物 在铜导体上，这时可以在铜导体上观察到有黑色物质，需要更换电 极。 电阻读 在使用中，电极探针的接触部位吸附并累积蛋白质或者其他外部材 数异 常电极接触 料，这使得电极的基础阻抗增加。可以用各种方法对电极进行清洗偏高 部位污染 （参考11页“抛光/清洗STX2电极”）。 电阻 如果有足够时间让培养细胞进行融合，读数稳定但跟预期相比很低，读数 细胞培养或培养问题可能出在细胞培养。电极失效通常不会有很低且稳定的读数。 异常 基问题 使用电阻器验证仪器是否工作正常，仪器的读数应该是1000Ω。 偏低 使用1000Ω测试电阻验证仪器是否工作正常，如果负的读数仅在使 电阻 电极间存在 用电极时出现，检查电极上是否有外源物质在电压电极和电流电极为负 可导电污染物 之间形成的导电桥，清理这些物体并复位。. 故障 可能原因 解决方案 使用电阻器验证仪器是否工作正常，仪器的读数应该是1000。 电极没有浸入如果电极和仪器断开或者电极没有浸入到培养液中仪器的读数 注意：如果EVOM2碰到的故障不在故障排除列表中，可以致电到培养液中 就会不稳定。 WPI(中国)400全国免费电话：400-688-5517， 规格 测量过程中电使用电阻器验证仪器是否工作正常，仪器的读数应该是1000。 极晃动 过多的晃动会导致测量结果膜电压量程. 测量过程中尽可能的保持电极不动， ±200.0 mV 发生波动。电阻 精度 0.1mV 充电器与仪器当充电器与仪器连通且充电器连接到交流电源时，由于没有电子读数 电阻量程 0 to 9999Ω 隔离会导致读数不稳定。不稳定 连通 电阻精度 1Ω 为保证读数稳定，测量时将充电器与仪器断开。 在12.5Hz 时实际电流为±10µA 交流方波电流 电源 使用电阻器并通过调整前面板上的 内置可充电6V2200毫安时镍氢电池 R ADJ校正螺钉使阻抗读数外接12V直流充电器 校准仪器 显示1000（参考第页测试EVOM2仪器） 充电时间 12小时 电池供电时间 ~8小时* 使用电阻器验证仪器是否工作正常，仪器的读数应该是1000。模拟输出 1-10V (1mV/ohm) 电极探针太旧正常使用情况下电极寿命为年。 外形尺寸 7.25”w x 4.25”H x 2.30”D (19cm x11cm x 6cm) 重量 3 lb (1.4 kg) 电极连接 RJ-11连接器 (电话线接头) 校验电阻器 外置 工作环境 50-100℉ (10-38℃) 相对湿度0-90% * 当电池电量低于最小工作电量时，仪器将自动关闭。电池充电后可以支持设备使用约8个小时。充电时请确认EVOM2 仪器处于关闭状态。 附录A：电阻计算 电阻 测得的组织培养膜的总电阻包含了空白电阻（如下）。必须测量空白电阻并且在总电阻中减去空白电阻以获得实际膜电阻。 例如，假设测得0.15M KCl 溶液和12孔细胞培养插上的膜电阻为130Ω，这就是该细胞培养插的空白电阻（电阻会因培养皿的制造商不同会有差异）在这个例子中假设样本的电阻测量值为800Ω，则膜实际电阻的计算为： R总= 800Ω R空=130Ω R空 + R膜 = R总 R膜 = R总 – R空 R膜 = 800Ω – 130Ω = 670Ω “空白”培养插的电阻值 当使用带有STX2的EVOM2 测量空白培养插时，电阻值一般在120 to 180Ω（取决于培养插的品牌），这不是由于空白过滤膜的阻力形成的背景电阻。然而，移除培养插中的过滤膜，测得的培养插电阻将保持不变，因为背景电阻主要取决于细胞培养插底部与细胞培养板底部之间的间隙。 一般这个间隙大小为1mm，有些其他品牌培养皿的间隙会稍微偏大。这个差异导致不同品牌测得的空白电阻也不同。间隙越小，电阻就越高。过滤膜的电阻实际上可以忽略。如果使用Endohm-24SNAP 或者 Endohm-12 ，空白电阻接近零，因为外部电极位于过滤膜的下面，基本没有间隙存在。 单位面积电阻 由于电阻和组织面积成反比，这里的单位面积电阻是不同于使用的膜面积和可以被用于比较的从不同尺寸培养插中获得的数据。 注意：使用带有 STX2电极的EVOM2 测量直径24毫米及以上的培养皿时，测得电阻不应该转换成单位面积电阻。推荐使用Endohm用于较大尺寸的培养插（见第25页附录B：直径24毫米（6孔）培养皿和STX电极）。 单位面积电阻可由仪器测得的电阻乘以过滤膜的有效面积来计算，单位为Ωcm2。电阻和表面积成反比，因此，膜的面积越大，电阻越小。 单位面积电阻=电阻(Ω) x膜的有效面积* (cm2)  对于特殊培养插参见参考相关制造参数  单位面积 = 1cm2 回到之前的例子，当 R膜 = 670Ω时，如果有效膜面积直径（d）为1.05 cm，则单位面积电阻为： 单位面积电阻=电阻 x 膜的有效面积=670Ωxd2/4 = 670x (3.14)*(1.05cm)2/4 580为每1 cm2的电阻值。 膜面积越大，电阻越小，单位是Ωcm2，而不是/cm2。这可能会让尝试用除法方式计算单位面积电阻的新用户感到迷惑。更详细的说明可以加强对这个概念的理解：假设 1cm2 膜的电阻为500，那么5cm2 膜的电阻为100，而不是2,500，因为电阻与面积成反比，相应地，如果5cm2的膜的电阻为100，那么1cm2膜的电阻是100 x 5cm2 = 500cm2，因为膜面积为1/5时电阻将增加5倍。 = 580cm2 附录B：直径24 mm(6孔)培养皿和STX电极 注意：用WPI 的STX系列电极测得的直径24毫米(配6孔板)培养插的电阻将比用Endohm-24测得的电阻高1.8到2.2倍，由于STX电极无法将均匀一致的电流密度在较大的膜上通过过滤膜和培养板之间较窄的间隙传递。因此, STX 电极通过24毫米培养插中获取的电阻读数不能用于计算单位面积电阻。STX 电极只是用于定性测量单层细胞的健康状态和定量测量细胞的融合程度。相对于较小的培养插如12毫米和6毫米而言，这不是一个问题。当Endohm配合EVOM2使用时，它提供了可重复的和准确的膜电阻值，这些电阻值与采用精心设计的USSING系统获取的数据一致。同时也与STX2的电极从12毫米和6毫米培养插中获取的数据一致。 注意: 单位面积的阻力与膜的面积无关，获得的数据会由于培养插的大小不同而不同。 附录C：提升系统精度和可重复测量性 无论何时，在确保EVOM2 仪与电池充电器断开的情况下进行操作，这样通过隔离电子干扰确保精确测量。如果测量过程中保持仪器与电池充电器相连，电子噪音将会干扰系统。为在测量中测量的结果更精确，WPI建议将仪器与交流电源断开。 对于测量低电阻值的细胞培养或者想得到更精确的测量结果，用户应该考虑采用Endohm代替STX2电极。尽管测量中细胞要从培养孔中转移到 Endohm腔内，但可以获得精度更好的膜电阻测量结果。 通过在膜上下使用同心结构的电极，Endohm 可以将背景电阻由150降低到5甚至更少（Endohm会较高）。电流电极的结构可以使膜间的电流密度更均匀一致，见图Figures 13和14。 图13阐述了STX2电极的测量TEER的原理。图14阐述了Endohm测量TEER的原理。 Endohm搭配EVOM2进行膜电阻测量是一种精确、方便、经济的方案。