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肽基脯氨酰顺反异构酶和β-连接素在宫颈鳞癌中的表达及意义

2020-04-24 来源:步旅网
健康天地 2010年10月第4卷第1O期 论著 肽基脯氨酰顺反异构酶和B一连接素在 宫颈鳞癌中的表达及意义 刘丽英李莲芳李海生 【摘要】 目的:观察宫颈鳞癌组织中肽基脯氨酰顺反异构酶(Pin1)、p一连接素(B—catenin)蛋白的表达情况,探讨其关系及临 床意义。方法:收集140例宫颈鳞癌标本作为实验组,80例正常官颈组织作为对照组,应用免疫组织化学技术检测二组中Pinl和13 catenin的表达,探讨其关系及临床意义。结果:官颈鳞癌中Pinl和B—catenin表达的阳性率明显高于正常官颈组织,Pinl和p— catcnin的表达与肿物大小及淋巴结转移密切相关,宫颈鳞癌中Pinl和p—catenin的表达与患者的生存密切相关。结论:Pinl和B— catenin在宫颈鳞癌的发生发展中具有重要作用,联合检测Pinl和p—eatenin对判断官颈鳞癌的预后有重要价值。 一【关键词】 官颈鳞癌;Pinl;p—catenin;免疫组织化学 The expressions and signiifcance of Pinl and I3}一catenin in cervical squamous cell carcin0ma Liu Li ying,Li Lianfang,LiHai sheng Dept.ofObstetric and Gynecology,Maternal and C Health ofGaozhou Hospital,Guangdong Provincial,C-aozhou 525200,China 【Abstract】 Objective:To observe the expressions of Pin1 and —catenin in cevircal squamous cell carcinoma,and investigate their clinical signiicance ifn neoplasm,for accumulating clinical experience,directing clinical work.Methods:The study included 140 cases of ccr- vical squamous cell carcinoma as observation group,80 cases of normal cervical tissues as control group.The expressions of Pinl and B—cate— nin were analyzed in different pathological character by IHC methods.Results:The expressions of Pinl and B—catenin were obviously higher in the observation group than in the control group.The expressions of Pinl and B—catenin were associated wih itnvasion and lymph node me— tastasis.The expressions of Pinl and B一 ̄atenin were correlated with prognosis in cervical squamous cell carcinoma.Conclusions:The expres— sions of Pinl and p—catenin may promote the occurrence in cervical squamous cell carcinoma.The combined detection of Pinl and —catenin may be signiicant prfognostic indicator in cervical squamous cell carcinoma. 【Key Words】cervical carcinoma;Pin1;B—eatenin;IHC 宫颈鳞癌是最常见的恶性肿瘤之一,其发生与发展是多因 素综合作用的结果。近年来的相关研究表明Pinl具有催化剂样 的作用 J,Pin—l可通过8一catenin信号转导通路作用于cy— clinD1启动子的T细胞因子位点,调节磷酸化蛋白质的活性,并 可促进肿瘤的发展 J。本实验探讨宫颈鳞癌组织中Pin1和B catenin表达在临床中的作用,关注其对预后的判断价值,以期 为研究肿瘤的生物学行为及宫颈鳞癌的预防治疗提供理论 —性染色。每张切片在400倍镜下观察5个视野,每个视野计数 100个肿瘤细胞,共计500个细胞,阳性细胞数分级:≤25%为O, 26%一50%为1,51%一74%为2,≥75%为3;染色强度分级:无 着色为0,淡黄色为1,棕黄色为2,棕褐色为3;最后判断标准为 上述两项相乘 J,以得分≥2为阳性,计算阳性率。 1.4统计学方法 实验数据经Excel表格整理,应用SPSS13.0统计软件进行 帮助。 1材料与方法 1.1临床材料 相关性检验,定性资料比较采用卡方检验,P<0.05为差异有统 计学意义。 2结果 收集我院2003年1月一2004年12月存档的宫颈鳞癌标本 2.1 Pinl和B—catenin在实验组与对照组中的表达 蜡块140例作为实验组,年龄25—61岁,平均46.5岁。所有病 例均参照(WHO乳腺及女性生殖器官肿瘤病理学和遗传学》,由 二位病理主治以上病理医师复核确诊。本组病例术前均未进行 任何治疗,排除不能随访或不配合的患者。同时选取同期病理 由表l可见,Pin1和B—catenin在实验组与对照组中的表 达差别有统计学意义,即实验组中的阳性率明显高于对照组。 衰l F/m!翻即枷曲l在彦爱ll厦芷嚣鲁囊赶舡中前衰选 证实为正常宫颈组织80例作为对照组。 1.2方法 Pinl和B—catenin均购自北京中杉金桥生物技术有限公 2.2 Pinl和0一catenin在实验组中不同临床特征中的 表达 司。检测应用免疫组织化学技术sP法,均由同一病理技师完成 检测,操作中严格质控。具体步骤:脱蜡,水化组织切片,3% }l2o2去离子水孵育1O分钟,以阻断内源性过氧化物酶;抗原修 复后分别滴加一抗,室温37度孵育l一2小时或过夜,PBS冲洗, 5分钟×3次;滴加生物素标记的二抗,室温37度孵育2O分钟, PBS冲洗,5分钟×3次;滴加辣根酶标记链霉卵白素,室温37度 孵育2O一3O分钟,PBS冲洗,5分钟×3次;应用DAB显色剂显 色;自来水充分冲洗、复染、脱水、透明、封片。 I.3结果判定标准 实验组中Pin1和p—catenin的表达与宫颈鳞癌的体积及浸 润宫颈管的深度密切相关,即在肿瘤体积大、浸润深的癌组织 中,二者的表达阳性率高。见表2。 曩2 l和 _£‘‘-茬嘉雌中 B 肿髫俸鞔 i ———— : 一 30 田呻搴, 彝农 ’, 21“) ‘l蛳 l t 每 量 2 ¨a哟1 (1,J H) tS) ̄t6< ̄0001 1蛐d, 畸4dI z神O∞ 134f ̄7 0。0O2  I i ㈣!l ,1 59 ' 'I ) 斌∞矧砧 H z 叼 ” 0 t2j∞ O.Ot ̄ 耵 =3踟 私0 0l蛐 2啦¨8呦l,∞帆】 5∞竹 n0 2 Pin1和6一catcnin表达为细胞内呈棕黄色细小颗粒者为阳 作者单位:525200广东省高州市妇幼保健院妇产科 2.3 宫颈鳞癌组织中Pinl和B—catenin的表达与患者生 存的关系 本组术后随访,时间最短15个月,最长96个月,平均54.3 ・7・ 论著 2010年1O月第4卷第10期 健康天地 个月,经生存分析,宫颈鳞癌中Pinl和13一catenin蛋白表达与患 者预后相关(P<0.05)。 3讨论 活c—myc、Cyclin D1等致癌基因转录,促进细胞增殖。还有学 者认为p—catenin具有双重功能:①p—eatenin是E—cad/cat复 合体的重要组成部分,其异常表达可以促进肿瘤浸润、转移。② p—catenin也是WNT信号转导通路的下游元件。由于wnt信号 使p—catenin磷酸化后进人胞质或细胞核内,并与转录调控因 宫颈鳞癌临床常见,其发生发展机制尚不清楚。有研究显 示蛋白质序列中Ser/Thr—Pro基序的磷酸化是一个重要的细胞 内信号机制,主要关系到细胞增殖和转化,而磷酸化仅是引起信 号转导分子构象改变的第一步,这种磷酸化的Ser/Thr—Pro还 需要被Pinl特异识别催化,依赖Pinl的构型转变是磷酸化后的 子结合形成复合体,该复合体与C—myc、cyclin D1等靶基因结 合,启动基因转录,使细胞过度增殖,促使肿瘤发生发展。 综上所述,Pinl和p—eatenin在宫颈鳞癌的发生发展中具 有重要作用,术后联合检测Pinl和B—eatcnin可能对判断宫颈 鳞癌的预后有重要价值。 参考文献 重要调节机制,对某些底物而言,正是依赖Pinl的构型改变而不 是原始的磷酸化本身在调节蛋白功能。这种复杂信号机制的失 调可导致细胞转化和肿瘤发生。研究表明,Pinl在多种人类肿 瘤中过表达,是多个致癌信号通路的关键效应分子,可加强和催 化多种致癌信号,使其无限放大。最终引起细胞转化和增殖失 控,因此,pinl也被称为肿瘤发生发展的“催化分子”。E—cad— f 1]Pang R,Yuen J,Yuen MF,et a1.PIN1 overexpression and beta—eatenin gene mutations are distinct oncogenie even ̄in herin/13一catenins复合体在介导同型细胞间粘附,维持正常上皮 的极性和完整性中起重要的作用。有研究显示8一catenin的异 常表达是肿瘤浸润和转移过程中的关键事件。B—catenin是一 human hepatoeellular carcinoma[J].Oncogene,2004,23 (23):4182—4186. [2]Zhou CX,Gao Y.Aberrnta expression ofbeta—catenin,Pinl and cylin D1 in sMivary adenoid cystic carcinoma:relation to 组与钙粘素细胞内区起作用的相关蛋白之一,B—catenin作为一 个分子信号,具有细胞间黏附连接及信号传导、调节黏附、生长 分化及组织修复等重要作用。 本实验应用免疫组织化学技术检测宫颈鳞癌中Pinl和B— catenin的表达,结果显示宫颈鳞癌中Pinl和B—eatenin表达的 tumor proliferation nda metastasis[J].Oncol Rep,2006,16 (3):505—511. [3] 宋晓昕.Fascin、B—catenin、E—eadherin在大肠腺瘤癌变 过程中的表达及意义[J].河北医药,2010,32(6):2178 —阳性率明显高于正常宫颈组织,Pin1和B—eatenin的表达与宫 颈鳞癌组织的体积及淋巴结转移密切相关,宫颈鳞癌中Pinl和 p—catenin的表达与患者的生存率相关,提示Pinl和p—catenin 与宫颈鳞癌的发生发展及预后有关。pinl与磷酸化的p—cate— 218O. [4] 曹薇,张道荣,乔菊久,等.Pinl与B—catenin在肺鳞癌 和肺腺癌中的表达及意义[J].中国肺癌杂志,2006,9 (5):418-422. nin结合,使其结构异构化,B—catenin作用于cyclinD1启动子的 T细胞因子位点,使转录增强。pin1可特异性地与B~catenin中 邻近APC结合位点的磷酸化Ser246一Pro基序结合,阻碍B— eatenin—APC复合物形成,使p—catenin不被Gsk一3D降解而 异常蓄积于细胞浆和细胞核,并与转录因子TCF、LEF结合,激 (上接第6页) 高达31%以上 』。对于这类型的PDA采取体外循环下经肺动 [5] 周传香,高岩.涎腺腺样囊性癌Pin1、p一连接素和细胞 周期素D1的表达及意义[J].中华口腔医学杂志,2006, 41(10):623—625. 使用硝酸甘油、硝普钠降压,重度肺动脉高压使用前列腺素E1 治疗,效果满意。 脉闭合导管内口则相对较为安全,可避免导管破裂出血。 长期以来,体外循环下PDA闭合术通常采用深低温低流量 技术,缺点是体外循环时间长,降温、复温均费时,心肌缺血时间 长,可造成心肌缺血/再灌注损伤,尤其对肺动脉高压和心肌肥 厚的患者,术后容易发生心功能不全和肺部严重感染;而且这种 方法即使采用低流量,也不能确定手术视野清晰无血,影响操作 因此,我们认为常温体外循环心脏不停跳直视下动脉导管 缝闭术治疗粗大型动脉导管未闭是一种安全、可靠的手术方法。 参考文献 [1] Ghani SA,Hashim R.Surgical management of patent duetus a ̄eifosus:A review of413 cases[J].J R Coil Surg Edinb, 1989,34(1):33. r 2] Sutherland JL.Treatment of patent ductus arteriosus.Heart 的准确性及手术效果,恢复流量后渗漏情况较多;易发生灌注 肺:低流量影响心肌组织灌注,还有发生气栓的报道;深低温对 心脏和机体的冷损害亦是严重的问题 ;虽然深低温低流量灌 注有脑保护措施(同时头部冰袋降温),但清醒晚,并发昏迷 、 醒后躁动等并发症。 Dis ̄oke,1994,3(2):338—344. [3] 孙道华,张宝仁,郝家华,等。复杂动脉导管未闭的外科治 疗。中华外科杂志,1996,34(4):273—275. [4] Kirklin JW,Barrat Boyes BG,Cardiac Surgery[M],New York:Churchill Living Stone,1993,841—859. 我们采用常温体外循环心脏不停跳直视下动脉导管缝闭 术,流出道探子堵住PDA开口后再行修补,使手术视野清晰无 血,便于手术操作,易于缝合;不需降温和进行复苏,操作简化; 主动脉肺动脉存在压力顺差不易发生气栓;心脏搏动下灌注肺 [5] 高百顺,张天龄,姚忠喜,等。深低温低流量体外循环下动 脉导管未闭术后昏迷3例。中华胸心血管外科杂志, 1992,2:97. 也不易发生。 此方法体外循环时间短,心肌保持供血跳动,减少了长时间 体外循环对心肌和肺的损伤,也减轻了体外循环对全身的损害; 术中不阻断心肌血流,避免了心肌缺血/再灌注损伤 ;病人术 后心肺功能恢复快,缩短呼吸机的使用时间 ;出血量远低于低 [6] 白育庭,涂仲凡,鲁世千,等。体外循环下低温室颤性停搏 心肌损伤程度的评估[J]。中华胸心血管外科杂志,2002, 18(1):53—54. [7]Lichtenstein SV,Abel JG,Slutsky AS.Warm heart surgery [J].Lancet,1992,339:1304—1305. 温体外循环下进行手术者_8 J。术后治疗重点是加强呼吸道管理 和维持好心功能,防止发生肺动脉高压危象,对术后高血压常规 ・8・ 

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