β-连环蛋白与细胞周期素D1在CIN及宫颈鳞癌中的表达

广东医学２０１０年１１月第３ｌ卷第２ｌ期　Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　Ｎｏｖ．２０１０，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．２１　ｐ一连环蛋白与细胞周期素Ｄ１在ＣＩＮ及　宫颈鳞癌中的表达　史慧星‘，韩彩丽　河北医科大学病理生理教研室（石家庄０６１０００）　【摘要】　目的通过观察宫颈鳞癌组织中Ｂ一连环蛋白（Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ）与细胞周期蛋白Ｄ１（ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１）的表　达，探讨它们在宫颈癌发生、发展过程中的作用。方法应用免疫组织化学法观察宫颈鳞癌、官颈上皮内瘤样病　变（ＣＩＮ）、正常宫颈组织中　—ｃａｔｅｎｉｎ与ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的表达特点，结合临床病理资料进行统计学分析。结果　（１）　ｐ—ｃａｔｅｎｉｎ在正常宫颈组织（ｎ＝８）、宫颈上皮内瘤样病变（ｎ＝２０）及宫颈鳞癌（ｎ＝４２）中的异常表达率分别是０、　３５．Ｏ％及６４．３％，三组问比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；１３一ｃａｔｅｎｉｎ在宫颈鳞癌不同组织分级中异位阳性表　达分别为：Ｉ级２５．０％；ＩＩ级６３．６％；Ⅲ级９１．７％（Ｐ＜０．Ｏ１）。在宫颈鳞癌淋巴结阳性组，Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ异位阳性表　达率高于淋巴结阴性组（Ｐ＞０．０５）。（２）ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１在三组中的阳性表达率则分别是０、３０．０％和６１．９％，三组间比　较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的过度表达也与宫颈癌组织分级相关，Ｉ级：３７．５％；Ⅱ级：５４．６％；ｍ：　９１．７％，三组间相比差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），ｃｙｃｌｉｎ　ＤＩ在宫颈鳞癌淋巴结阳性组与阴性组的阳性表达率分　别为７０．Ｏ％和５９．４％，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。（３）１３一ｃａｔｅｎｉｎ异常表达与ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的阳性表达呈正相关　（ｒ＝７．８８５）。结论　（１）宫颈癌中存在８一ｃａｔｅｎｉｎ和ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的异常表达，随着正常宫颈组织一ｃＩＮ一宫颈鳞癌　的进展，１３一ｃａｔｅｎｉｎ及ｃｙｃｌｉｎＤ１的异常表达呈递增趋势且两者存在明显的相关性。提示Ｗｎｔ／１３一ｃａｔｅｎｉｎ信号通路　在宫颈鳞癌的发生发展中可能起重要的作用。（２）Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ异位表达及ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１阳性表达均与宫颈鳞癌分化　相关，但均与淋巴结是否转移无关。　【关键词】　宫颈鳞癌；宫颈上皮内瘤样病变；Ｂ一连环蛋白；细胞周期蛋白ＤＩ；Ｗｎｔ信号传导通路　宫颈癌是女性常见恶性肿瘤，近年来有年轻化趋　势。研究表明，宫颈癌的发生发展是多因素多阶段演　变的结果，多种癌基因及抑癌基因参与了癌变过程。　研究表明Ｗｎｔ信号传导通路不恰当的激活参与了多种　人类肿瘤的发生和发展。Ｗｎｔ通路致癌的关键是Ｂ一　转移者１Ｏ例，无淋巴结转移３２例。患者平均年龄　４８．９岁（３１～６８岁）。ＣＩＮ　２０例（ＣＩＮ　ＩＩ　９例，ＣＩＮⅢ１１　例），正常宫颈组织８例作为对照。　１．２　实验材料　１３一ｃａｔｅｎｉｎ鼠抗人单克隆抗体为　ＺＹＭＥＤ公司产品。ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１兔抗人多克隆抗体为Ｌａｂ—　ｖｉｓｉｏｎ公司产品。羊抗鼠二步法通用型试剂盒。羊抗兔　连环蛋白（ｐ—ｃａｔｅｎｉｎ）降解障碍致使胞质内游离的　Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ聚集并与Ｔｃｆ／ｌｅｆ结合进人胞核，激活下游　靶基因ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的转录，导致肿瘤的发生。Ｗｎｔ信号　通路途径的改变在大肠癌发生中的作用已较明确，在　其他恶性肿瘤中的改变也显示出重要意义，深入了解　二步法通用型试剂盒。ＥＤＴＡ抗原修复液。封闭用正常　山羊血清工作液。显色底物：３，３一二氨基联苯胺　（ＤＡＢ）。以上试剂均购自北京中山生物技术有限公司。　１．３方法（１）采用Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ免疫组化染色：二甲　该途径的特点及其在宫颈癌中的变化对于宫颈癌的早　期诊断、预后判断及靶向治疗研究具有重要的意义。　本研究应用免疫组化方法检测正常官颈鳞状上皮组　织、宫颈上皮内瘤样病变（ｃｅｒｖｉｃａｌ　ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　ｎｅｏｐｌａ—　ｓｉａ，ＣＩＮ）、宫颈鳞癌组织中Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ与ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的　表达情况，分析其表达率的变化，探讨它们在Ｗｎｔ信号　通路中对宫颈鳞癌发生、发展的作用。　１资料与方法　苯脱蜡１０　ｍｉｎ×２，梯度酒精入水（１００％×１、９０％×１、　８０％ｘ　１）各１０　ｍｉｎ，ＰＢＳ缓冲液５　ｍｉｎ×１，在３％甲醇一　过氧化氢混合液室温１５　ｍｉｎ，灭活内源性过氧化物酶，　ＰＢＳ缓冲液５　ｍｉｎ×３，ＥＤＴＡ抗原修复液，微波炉高火　２．５　ｍｉｎ，解冻档１０　ｍｉｎ，室温冷却３０　ｍｉｎ，ＰＢＳ缓冲液５　ｍｉｎ×３，１０％山羊血清封闭，湿盒内室温３０　ｒａｉｎ，ｐ—ｃａｔ　鼠抗人单克隆抗体（工作液１：１００），湿盒内４℃过夜，　ＰＢＳ缓冲液５　ｍｉｎ×３，羊抗鼠二步法工作液湿盒内室　温３０　ｍｉｎ，ＰＢＳ缓冲液５　ｍｉｎ×３，ＤＡＢ显色液，组织显　１．１　一般资料标本来源于２００７年４月至２００８年　１２月期间河北省邢台市人民医院及邢台矿业集团总　医院病理科宫颈癌手术和活检的存档蜡块。术前均未　色后用自来水中止反应，Ｍａｙｅｒ苏木素染液２０　Ｓ，自来　水冲洗，酒精脱水（８０％×１、９０％×１、１００％×１）各１０　ｍｉｎ，二甲苯透明，中性树脂封片。（２）ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１免疫　组化染色。方法同上，以ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１兔抗人多克隆抗体　和羊抗鼠二步法工作液代替Ｂ—ｃａｔ鼠抗人单克隆抗　体和羊抗鼠二步法工作液。　１．４　结果判定　１３一ｃａｔｅｎｉｎ：正常表达定位于细胞　行放疗或化疗。宫颈鳞状细胞癌４２例，按组织学分　级：Ｉ级８例；１Ｉ级２２例；Ｉｉｉ级１２例。其中有淋巴结　▲现工作单位：河北邢台矿业集团总医院妇产科（河北邢台　０５４０００）　△通信作者　膜，细胞膜上有均匀的棕黄色着色，而胞浆中无染色或　广东医学２０１０年１１月第３１卷第２ｌ期　Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　Ｎｏｖ．２０１０，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．２１　・２８２５・　仅有微弱着色。细胞膜染色明显减弱或消失同时胞浆　或细胞核着色则判定为异常表达。ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１：ｃｙｃｌｉｎ　进一步增强，但本组未发现有明显的细胞核内表达（图　２、３）。随着宫颈癌的组织分级增高，Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ异位　阳性表达逐渐增强；ＣＩＮ组因例数较少未再行不同分　级问比较。宫颈鳞癌淋巴结转移组Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ异位阳　Ｄｌ染色后棕黄色颗粒位于细胞核为阳性，以阳性细胞　计数。染色细胞＜５％为阴性，≥５％为阳性。　１．５　统计学方法用ＳＰＳＳ　１１．５统计软件，采用　检　性表达率高于无淋巴结转移组，两组间比较差异无统　计学意义（Ｐ＞０．０５）（表１、２）。　验，四格表确切概率法和Ｓｐｅａｒｍａｎ相关分析。　２　结果　２．２　ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１在正常宫颈组织、ＣＩＮ及宫颈癌中的表　达ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１在正常宫颈上皮细胞中（８例）均未见阳　性表达，ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１阳性表达定位于细胞核（图４、５）。　２．１　Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ在正常宫颈组织、ＣＩＮ及宫颈癌中的　表达１３一ｃａｔｅｎｉｎ在８例正常宫颈鳞状上皮组织中均　未见异位表达（图１），在ＣＩＮ、宫颈鳞癌的异位阳性表　达率分别为３５．０％（７／２０）、６４．３％（２７／４２），两者差异　有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。正常宫颈组织中８一ｃａｔｅ—　ｎｉｎ主要为胞膜表达，在ＣＩＮ和宫颈鳞癌中Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ　胞膜表达明显减弱或缺失，随着病变的发展，Ｂ—ｃａｔｅ—　ｎｉｎ逐渐呈现细胞浆内表达，而宫颈鳞癌中胞质的表达　ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１在ＣＩＮ、宫颈鳞癌组阳性表达率分别为　３０．０％（６／２０）和６１．９％（２６／４２），两组问比较差异有　统计学意义（Ｐ＜０．０５）（表１）；随宫颈鳞癌分级增高　ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１阳性表达率也明显增加，差异有统计学意义　（Ｐ＜０．０５）。ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的阳性表达是否出现与淋巴结　转移无关联（Ｐ＞０．０５）（表１、２）。　例　表１　Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ、ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１在宫颈癌、ＣＩＮ及正常对照组中的表达　ｉ　ｌ　ｌ　ｍ图ｌ　１３－ｃａｔｅｎｉｎ细胞膜正常　表达（×４００）　图２　１３－ｃａｔｅｎｉｎ在Ｃ１Ｎ　的表达（×４００）　图３　３－ｃａｔｅｎｉｎ在宫颈鳞癌　表达（×４００）　图４　ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１在ＣＩＮ　的表达（×４００）　图５　ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１在宫颈鳞癌　表达（×４００）　２．３宫颈癌组织中８一ｃａｔｅｎｉｎ与ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１表达之间的　关系在宫颈癌组织中Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ与ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１共阳性　３讨论　表达有２ｌ例，共阴性表达有ｌ０例，Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的异常表　达与ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的阳性表达呈正相关（ｒ＝７．８８５），见表３。　表３　１３一ｃａｔｅｎｉｎ与ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１在宫颈鳞癌中表达的相关性例　宫颈癌是全球妇女中仅次于乳腺癌的第二大常见　恶性肿瘤，在发展中国家女性中其发病率居第一。据　世界范围内的统计，每年有５０万左右宫颈癌新发病　例，占所有癌症新发病例的ｌ５％，因此研究多种肿瘤　相关因子与宫颈癌发生发展的关系尤为重要。　恶性肿瘤的发生、浸润和转移涉及癌细胞与细胞　外基质相互作用的一系列复杂过程，其中细胞黏附是　一个重要环节。Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ是一种多功能的胞浆蛋　白，既能与Ｅ一钙粘素（Ｅ—ｃａｄｈｅｆｉｎ）组成复合体，又是　・２８２６・　广东医学２０１０年Ｉ　１月第３１卷第２１期　Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　Ｎｏｖ．２０１０，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．２１　Ｗｎｔ信号传导通路的重要调控因子，参与细胞的生长　分化、黏附、组织修复，肿瘤发生及转移。正常情况下，　ｐ—ｃａｔｅｎｉｎ与Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ的胞浆部分形成ｐ—ｃａｒｅ—　ｎｉｎ／Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ复合体，定位于细胞膜，维持上皮细胞　的极性和完整性。在胞浆中Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的水平通过两　ｎｉｎ信号通路异常激活　圳。　综上所述，Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ及ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１在宫颈鳞癌中　的异位表达及过表达分别达６４．３％及６１．９％，且随着　正常宫颈组织一ＣＩＮ一鳞癌的转化，Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ及ｃｙｃ—　ｌｉｎ　Ｄ１的异常表达呈递增趋势，１３一ｃａｔｅｎｉｎ异位表达及　ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１阳性表达均与宫颈鳞癌分化相关（Ｐ＜０．０１，　Ｐ＜０．０５），随着宫颈癌的组织分级增高，Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ异　组蛋白质的功能竞争来调节：一组为破坏复合体，是由　ＧＳＫ３、Ａｘｉｎ及ＡＰＣ组成的一种较大的蛋白复合体，起　破坏Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的作用，使它保持低水平，从而关闭　Ｗｎｔ信号传导通路；另一组为拮抗蛋白类，在对Ｗｎｔ信　号反应时被活化，起拮抗破坏复合体的作用，使Ｂ—　位表达、ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１阳性表达逐渐增强，但两者均与淋巴　结转移无关（Ｐ＞０．０５）。以上结果表明Ｗｎｔ信号通路　可能在宫颈发生发展中起着重要的作用。　ｃａｔｅｎｉｎ的水平升高，开启Ｗｎｔ信号传导通路　。正　常情况下，Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ在细胞内保持低水平，Ｗｎｔ信号　传导通路处于关闭状态。ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１是Ｗｎｔ信号传导通　路的下游靶基因之一　。当Ｗｎｔ／１３一ｃａｔｅｎｉｎ途径处于　激活状态时，Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ蛋白在细胞浆及胞核中累积，　作用于ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１启动子中ＬＥＦ—ｌ结合位点而激活其　转录，ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１与细胞周期蛋白依赖性激酶（ｃｙｃｌｉｎ　ｄｅ—　ｐｅｎｄｅｎｔ　ｋｉｎａｓｅｓ，ＣＤＫｓ）结合并激活后者，诱导成人视　网膜细胞瘤易感基因（Ｒｂ）产物的磷酸化，使Ｒｂ与转　录因子ＥｍＦ解离，游离的Ｅ２Ｆ进入细胞核内促进基因　转录，使细胞完成由Ｇ　期到ｓ期的转换进入增殖阶　段　。目前已知人类多种恶性肿瘤中存在Ｗｎｔ／１３一　ｃａｔｅｎｉｎ通路激活。免疫组织化学研究已表明在宫颈鳞　状细胞癌中发现Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ和ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的异常表达及　高表达　，但在Ｗｎｔ信号通路中，ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１作为Ｂ—　ｃａｔｅｎｉｎ主要调节的靶基因，两者在官颈癌中表达的相　关性尚不明确，未见相关报道。本文对４２例宫颈鳞癌　Ｇ—ｃａｔｅｎｉｎ和ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１蛋白表达的相关性进行了研　究，以进一步观察Ｗｎｔ信号通路在该肿瘤发生发展中　的作用。　本研究结果显示：Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ及ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１在宫颈　鳞癌中的异位表达及过表达分别达６４．３％及６１．９％，　与其他文献报道相似　。相关分析显示两者存在明　显相关性（ｒ＝７．８８５），且随着正常宫颈组织一ＣＩＮ一鳞　癌的转化，Ｄ—ｃａｔｅｎｉｎ及ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１的异常表达呈递增　趋势，说明Ｗｎｔ／１３一ｃａｔｅｎｉｎ通路的激活与宫颈鳞癌的　发生密切相关。本结果还显示了Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ异位表达　及ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１过表达与宫颈癌的组织分级成正相关，淋　巴结转移阳性组的异常表达高于淋巴结转移阴性组，　表明Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的异常表达可能与肿瘤的恶性行为和　去分化有一定的关系，是肿瘤细胞获得高增殖活性和　侵袭性的原因之一。由于本组随访不全，未能做相关　预后方面的统计分析。但有文献显示Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的异　常表达与宫颈癌患者预后无关　』。　但目前对Ｗｎｔ／１３一ｃａｔｅｎｉｎ通路在宫颈癌中异常激　活的具体环节尚不完全清楚。Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ基因在宫颈　癌中突变率并不高，有报道为１７％甚至更低　“　，说　明ｐ—ｃａｔｅｎｉｎ基因突变可能仅在少数宫颈癌发生及发　展中起作用。另有人研究发现ＡＰＣ启动子甲基化在　宫颈癌中是一个频繁事件，可能参与了Ｗｎｔ／１３一ｃａｔｅ．　参考文献　［１］ＭＩＬＬＥＲ　Ｊ　Ｒ．Ｗｎｔ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇＴｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ［Ｍ］／／ＡＬＩＳＯＮ　Ｍ．Ｔｈｅ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｈａｎｄｂｏｏｋ．Ｌｏｎｄｏｎ：Ｎａｔｕｒｅ　ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｇｒｏｕｐ，２００２：１９５—　２０８．　［２］ＭＩＬＬＥＲ　Ｊ　Ｒ，ＨＯＣＫＩＮＧ　Ａ　Ｍ，ＢＲＯＷＮ　Ｊ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｉｇｎａｌ　ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ｔｈｅ　Ｗｎｔ／ｂｅｔａ—ｃａｔｅｎｉｎ　ａｎｄ　Ｗｎｔ／Ｃａ“ｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，１９９９，１８（５５）：７８６０—　７８７２．　［３］ＴＥＴＳＵ　０，ＭＣＣＯＲＭＩＣＫ　Ｆ．Ｂｅｔａ—ｃａｔｅｎｉｎ　ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１　ｉｎ　ｃｏｌｏｎ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１　９９９，３９８　（６７２６）：４２２—４２６．　［４］ＪＡＲＥＳ　Ｐ，ＦＥＲＮＡＮＤＥＺ　Ｐ　Ｌ，ＣＡＭＰＯ　Ｅ，ｅｔ　ａ１．ＰＲＡＤ一１／ｃｙｃ－　ｌ　Ｄ１　ｇｅｎｅ　ａｍｐｌｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ　ｗｉｔｈ　ｍｅｓｓｅｎｇｅｒ　ＲＮＡ　ｏｖｅｒ—ｅｘ—　ｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｕｍｏｒ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｌａｒｙｎｇｅａｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ［Ｊ］．　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，１９９４，５４（１７）：４８１３—４８１７．　［５］古丽娜．库尔班，李小文，等．ｐ—ｃａｔ，ｃｙｃｌｉｎ　ＤＩ和Ｃ—ｍｙｃ在　宫颈鳞癌中的表达及其意义［Ｊ］．新疆医科大学学报，２００８，　３１（６）：６４１—６４４．　［６］　何凯，田雪红，张国杰，等．ｃｙｃｌｉｎ　Ｄ１和Ｐ２７在宫颈鳞癌中的　表达及临床意义［Ｊ］．中国实验诊断学，２００５，９（４），５４９—　５５２．　［７］　张丽颖，李福琴，艾丽敏，等．Ｂ一连环素与上皮型钙粘蛋白　在宫颈鳞癌中的表达及意义［Ｊ］．哈尔滨医科大学学报，　２００３，３７（６），５００—５０２．　［８］李东辉，李明众，张薛榜．Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ和Ｋｉ一６７在人宫颈癌组　织中的表达及其意义［Ｊ］．实用癌症杂志，２００７，２２（１），２８—　３０．　［９］　ＦＡＤＡＲＥ　Ｏ，ＲＥＤＤＹ　Ｈ，ＷＡＮＧ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｅ—ｃａｄｈｅｆｉｎ　ａｎｄ　ｂｅｔａ—ｅａｔｅｎｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｅａｒｌｙ　ｓｔａｇｅ　ｃｅｒｖｉｃａｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ：ａ　ｔｉｓｓｕｅ　ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　１４７　ｃａｓｅ８［Ｊ］．Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｓｕｒｇ　Ｏｎｃｏｌ，２００５，２１　（３）：３８—４８．　［１０］ＴＥＮＧ　Ｙ，ＷＡＮＧ　Ｘ，ＷＡＮＧ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｗｎｔ／ｂｅｔａ—ｃａｔｅｎｉｎ　ｓｉｇｎａ—　ｌｉｎｇ　ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　Ａ５４９　ｃｅｌｌｓ［Ｊ　ｊ．　Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ｒｅｓ　Ｃｏｎｎｎｕｎ，２０１０，３９２（３）：３７３—３７９．　［１１］ＫＨＡＬＩＤＡ　Ｍ　Ｙ，ＨＵＩＬＧＯＬ　Ｎ　Ｇ，ＨＯＮＧＹＯ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｃｅｒｖｉｃａｌ　ｃｎａｃｅｒ　ａｓ　ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｆｏｒ　ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒ－　ｎａｔｏｎａｌ　Ｃｏｎｇｒｅｓｓ　Ｓｅｒｉｅｓ，２００２，１２３６：４５９—４６１．　［１２］ＤＯＮＧ　Ｓ　Ｍ，ＫＩＭ　Ｈ　Ｓ，ＲＨＡ　Ｓ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｈｙｐｅｒｍｅｔｈｙｌａ－　ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｕｔｅｒｉｎｅ　ｃｅｒｖｉｘ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００１，７（７）：１９８２—１９８６．　［１３］ＺＡＭＢＲＡＮＯ　Ｐ，ＳＥＧＵＲＡ　ＰＡＣＨＥＣＯ　Ｂ．ＰＥＲＥＺ　ＣＡＲＤＥＮＡＳ　Ｅ。　ｅｔ　ａ１．Ａ　ｐｈａｓｅ　Ｉ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｈｙｄｒｌａａｚｉｎｅ　ｔｏ　ｄｅｍｅｔｈｙｌａｔｅ　ａｎｄ　ｒｅａｃｔｉｖａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　ｇｅｎｅｓ［Ｊ］．ＢＭＣ　Ｃａｎｃｅｒ，２００５，　２９（５）：４４—５５．　（收稿日期：２０１０—０６—２８编辑：王冰）