CD117、CD13、CD33在鉴别诊断AML中的临床价值

一５１４一　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｄｉａｇｎ，Ｍａｒｃｈ，２０１７，Ｖｏｌ　２１，Ｎｏ．３　人Ｓｔｉｌｌ病、未分化结缔组织病，其他风湿病因样本　量过小，存在抽样偏差，无统计学意义，暂不做统计　分析，待进一步统计调查明确。　综上，临床医生对于需要长期应用激素或免疫　抑制剂、存在潜伏性结核感染高风险患者应进行结　际检验医学杂志，２０１５，３６（２４）：３５９６．　［６］Ｂａｒｏｎｎｅｔ　Ｌ，Ｂａｒｎｅｔｃｈｅ　Ｔ，Ｋａｈｎ　Ｖ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．Ａ　ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ　ｒｅ－　ｖｉｅｗ．［Ｊ３．Ｊｏｉｎｔ　Ｂｏｎｅ　Ｓｐｉｎｅ　Ｒｅｖｕｅ　Ｄｕ　Ｒｈｕｍａｔｉｓｍｅ，２０１１，７８（３）：　２７９．　［７］Ｙａｍａｄａ　Ｔ，Ｎａｋａｊｉｍａ　Ａ，Ｉｎｏｕｅ　Ｅ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｒｉｓｋ　ｏｆ　ｔｕｂｅｒｃｕ—　ｌｏｓｉｓ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ　ｉｎ　Ｊａｐａｎ．［Ｊ］．Ａｎｎａｌｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｒｈｅｕｍａｔｉｃ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ，２００６，６５（１２）：１６６１．　核筛查。即使缺乏诊断依据，结合患者的临床症状　和辅助检查，必要时亦需考虑诊断性抗结核治疗。　近年大量文献显示，Ｔ＿ｓＰＯＴ．ＴＢ和病原学检测相　结合，逐渐成为临床医生诊断结核分枝杆菌感染的　重要辅助手段。　参考文献：　［１］刘玢含，刘　钢，徐　源，等．结核菌素皮试和７干扰素释放试验　在筛查慢性关节炎患者潜伏性结核感染中的研究进展［Ｊ］．四川ｉ　医学，２０１５，３６（５）：７２９．　［８］Ａｂｅｒｒａ　Ｆ，Ｓｔｅｔｔｌｅｒ　Ｎ　Ｃ，Ｌｉｅｈｔｅｎｓｔｅｉｎ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｒｉｓｋ　ｆｏｒ　ａｃｔｉｖｅ　ｔｕ—　ｂｅｒｅｕｌｏｓｉｓ　ｉｎ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｂｏｗｅｌ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｇａｓ—　ｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ　Ｈｅｐａｔｏｌ，２００７，５（９）：１０７０．　［９］王涛，张凡，郭东阳，等．肾病患者长期使用免疫抑制剂后并　发结核的ｌ临床分析［Ｊ］．西南国防医药，２００５，１５（３）：３００．　［１０］杨华夏。张丽帆．风湿性疾病的Ｔ细胞ａ干扰素释放分析诊断　潜伏性结核分枝杆菌感染［Ｊ］．中华临床免疫和变态反应杂志，　２０１ｌ，５（２）：８３．　Ｅ２］Ｗｏｒｌｄ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ．Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　［１１３Ｈｗａｎｇ　ＬＹ，Ｇｒｉｍｅｓ　ＣＺ，Ｂｅａｓｌｅｙ　ＲＰ，ｅｔ　ａ１．Ｌａｔｅｎｔ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｈａｒｄ－ｔｏ—ｒｅａｃｈ　ｄｒｕｇ　ｕｓｉｎｇ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ—ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ，ｐｒｅ—　Ｌａｔｅｎｔ　Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｍ／ＯＬ］．Ｖｉｅｎｎａ：ＷＨＯ　Ｐｒｅｓｓ，　２０１５１２０１５－１０—０３］．　［３］盖林林，管立学，李海波，等．免疫性疾病患者Ｔ—ＳＰＯＴ．ＴＢ筛查　ｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ［Ｊ］．Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ，２００９，８９（Ｓｕｐｐｌ　１）：￥４１．　［１２］沈彦恒，桂徐蔚．Ｔ细胞斑点检测在鉴别结核分枝杆菌与非结核　结果及影响因素［Ｊ］．山东大学学报（医学版），２０１６，０６：８２．　［４］Ｇａｏ　Ｌ，Ｌｕ　Ｗ，Ｂａｉ　Ｉ　，ｅｔ　ａ１．Ｌａｔｅｎｔ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒｕｒａｌ　Ｃｈｉｎａ：ｂａｓｅｌｉｎｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ａ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ—ｂａｓｅｄ，ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｅ，ｐｒｏ—　分枝杆菌感染中的价值［Ｊ］．中国医刊，２０１６，Ｏ（４）：７８．　［１３］Ｓｈｉｍ　ＴＳ．Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎｄ　Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌａｔｅｎｔ　Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ　Ｉｎ—　ｆｅｃｔｉｏｎ　ｄｕｅ　ｔｏ　Ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｎｔｉ—ＴＮＦ　Ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｔｕｂｅｒｃ　Ｒｅ—　ｓｐｉｒ　Ｄｉｓ　２０１４，７６（６）：２６１．　ｓｐｅｃｔｉｖｅ　ｃｏｈｏｒｔ　ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｌａｎｃｅｔ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ，２０１５，１５　（３）：３１０．　（收稿日期：２０１６—０７—２２）　敏，秦明明，等．潜伏性结核感染的诊断进展ＥＪ］．国　［５］吴思涵，殷文章编号：１００７—４２８７（２０１７）０３—０５１４—０３　ＣＤ１　１　７、ＣＤ１　３、ＣＤ３　３在鉴别诊断ＡＭＬ中的临床价值　王承芯，李薇　（吉林大学第一医院肿瘤中心，吉林长春１３００２１）　急性白血病是起源于造血干细胞克隆性疾病，　临床价值，现将结果报道如下。　１资料与方法　１．１　临床资料　属于高度异质性恶性血液病，疾病正确分型对疾病　诊断、化疗方案制定、预后评估均具有重要的临床价　值ｌ１］。上世纪七十年代，法、英、美协作组提出关于　急性白血病的ＦＡＢ分型，八十年代ＭＩＣ分型标准　出现，之后世界卫生组织（ＷＴｏ）对白血病进行单独　我院肿瘤中心２０１４年１月一２０１５年６月收治的　１５１例急性白血病患者作为研究对象，所有患者均　签署知情同意书，患者经检查均符合急性白血病的　分类，急性白血病的诊断准确率不断上升＿２　］。本　研究以１５１例急性白血病患者为例，通过流式细胞　术进行白血病免疫分型检测，探讨ＣＤ１１７、ＣＤ１３、　ＣＤ３３在鉴别诊断ＡＭＬ（急性髓细胞白血病）中的　诊断标准，排除其它罹患器质性疾病（包括：急性白　血病之外的其他恶性肿瘤、严重肝肾功能不全、严重　心脑血管疾病）、自身免疫系统疾病等患者。其中男　８９例，女６２例，年龄１９—８５岁，平均年龄（５１．２±　５．１）岁；其中ＡＭＬ１０５例，急性Ｂ淋巴细胞白血病　（Ｂ—ＡＬＬ）３６例，急性Ｔ淋巴细胞白血病（Ｔ—ＡＩ　Ｉ　）　＊通讯作者　中国实验诊断学２０１７年３月　第２１卷第３期　１０例。　１．２方法　１．２．１标本采集　所有患者化疗前均采集骨髓或　外周静脉血２—５　ｍｌ，经肝素钠抗凝处理。标本涂片　后采用瑞特一姬姆萨氏染色法进行混合染色，显微镜　下进行观察。　１．２．２仪器与试剂　Ｃｙｔｏｍｉｃｓ　ＦＣ　５００流式细胞　仪（ＢＥｃＫＭＡＮ　ＣＯＵＬＴＥＲ公司生产）；藻红蛋白　（ＰＥ）标记物：ＣＤ２、ＣＤ８、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ２２、ＣＤ３３、　ＣＤ４２、ＣＤ６４、ＣＤ１１７、ＧＩｙ—Ａ、ＣＤ７９ａ；单克隆抗体异　硫氰酸荧光素标记：ＭＰＯ、ＣＤ４１、ＣＤ７１、ＣＤ３４、　ＣＤ３８、ＣＤ９、ＣＤ１５、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ１ａ、ＣＤ３；藻红蛋白　偶联物（ＰＥ—Ｇｙ５）标记：ＴＤＴ、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＨＬＡ—　ＤＲ、ｃＣＤ３、ＣＤ１４、ＣＥ１９、ＣＡ１ｌｂ、ＣＤ５６；藻红蛋白偶　联物（ＰＥ—Ｇｙ７）标记：ＣＤ４５；破膜剂（ＢＥＣＫＭＡＮ　ＣＯＵＬＴＥＲ公司生产）、溶血素（ＢＥＣＫＭＡＮ　ＣｏＵＬＴＥＲ公司生产）、鞘液（ＢＥＣＫＭＡＮ　ＣＯＵＬ—　ＴＥＲ公司生产）。　１．２．３检测方法　在各种不同标记物试管中分别　加入经肝素抗凝后骨髓或外周血标本５Ｏ“ｌ，同时根　据检测需求在各个试管中加入相应的抗体５Ｏ　ｌ，将　试管内液体充分摇匀置于正常室温中进行孵育１５　ｍｉｎ，注意避光。然后在试管中分别添加５００　ｔｄ溶　血素，摇匀后将其置于正常室温中１０　ｍｉｎ后添加磷　酸盐缓冲液５００　ｌ进行洗涤。随后应用胞浆内抗　原检测方法进行检测：在相应试管中加入破膜剂，然　后加入相应抗体标记物，之后采用磷酸盐缓冲液进　行洗涤。所有样本中最后均加入５００　ｔＡ磷酸盐缓　冲液重悬上机检测，并于每个试剂中获取１０　０００个　细胞采用ＣＸＰ分析软件进行检测。　抗体组合包括：ＣＤ７／ＣＤｌＯ／ＣＤ１９、ＣＤ４／ＣＤ６４／　ＣＤ１４、ＣＤ１５／ＣＤ１３／ＣＤ１１ｂ、　ＣＤ３／ＣＤ３３／ＣＤ５６、　ＣＤ３８／ＣＤ２２／ＣＤ２０、　ＣＤ９／ＣＤ２／ＣＤ１２３、　ｃＭＰＯ／　ｃＣＤ７９ａ／ｃＴＤＴ、ＣＤ３４／ＣＤＩ１７／ＨＬＡ－ＤＲ。所有标本　经上述试剂检测后，质疑为Ｔ—ＡＬＬ标本需加做　ＣＤ４／ＣＤ８／ｃＣＤ３、ＣＤｌａ／ＣＤ２／ＣＤ５抗体检测；质疑为　Ｍ６、Ｍ７标本需要加做ＣＤ７１／Ｇｌｙ－Ａ或者ＣＤ４１／　ＣＤ４２。分析数据的过程中，要注意观察ＣＤ４５／ＳＳＣ　双参数散点图，进行淋巴细胞、幼稚细胞、粒细胞、单　核细胞等细胞各群比率计算，分析筛选出异常细胞　群，在此基础上对幼稚细胞的免疫表型特点作进一　步分析。　１．３统计学方法　根据ＳＳＰＳ１９．０统计学应用软件对收集到的研　５１５一　究资料分析处理，计数资料（　、　）采用　。检验。Ｐ　＜Ｏ．０５表明差异有统计学意义。　２　结果　２．１　ＣＤｌｌ７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在急性白血病中的表达　水平　ＣＤ１１７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在ＡＭＬ中的表达水平分　别为９１．４　、８９，５　、９５．２　，均明显高于Ｂ＿ＡＬＬ、　Ｔ—ＡＬＬ，结果具有显著性差异（ＣＤＩ１７组问相比，　值分别为１０．３４１、８．２９６；ＣＤＩ３组间相比，　。值分别　为９．１３６、８．０７１；ＣＤ３３组问相比，　值分别为　９．８７５、８．５４７；Ｐ＜Ｏ．０５）。ＣＤ１１７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在Ｂ＿　ＡＬＬ、Ｔ—ＡＬＬ中的表达水平差异不显著（　值分别　为１．２１４、０．９２１、１＿４７５；Ｐ＞Ｏ．０５）。见表１。　表１　ＣＤ１１７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在急性白细胞中的　表达水平（ｎ。％）　２．２　ＣＤｌｌ７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在不同急性髓细胞白血　病亚型中的表达水平　ＣＤ１１７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在急性髓细胞白血病中的　共性表达率为４７．６　（５ｏ／ｌｏ５），其中Ｍ。、Ｍ　、Ｍ　亚型中表达率较高，在Ｍ。、Ｍ　、Ｍ　、Ｍ　、Ｍ　亚型中　表达率稍低。ＣＤＩ１７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在Ｍ。＋Ｍ　＋Ｍ：　亚型中的表达率为６６．７　（３８／５７），明显高于Ｍ。＋　Ｍ　＋Ｍ　＋Ｍ　＋Ｍ　亚型中的表达率２５．０　（１２／　４８），结果具有显著性差异（　。值为７．６５３，Ｐ＜　０．０５）。见表２。　表２　ＣＤｌｌ７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在不同急性髓细胞白血病亚型　中的表达水平（ｎ。％）　３讨论　近年多项研究数据表明，白血病细胞细胞膜及　细胞质分子免疫标志具有特征性异常改变，可通过　细胞免疫表型分类实现血液系统恶性肿瘤疾病精确　５１６一　诊断。应用流式细胞仪检测技术，通过对白血病细　胞多种抗原组合免疫表型分析，有助于显著提高急　性白血病诊断率　］。本研究中以１５１例急性白血病　患者为例，着重分析ＣＤ１１７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在急性髓　细胞白血病的表达情况，旨在为临床疾病诊断提供　参考。　ＣＤ１１７系髓系细胞分化抗原，主要表达于人类　造血祖细胞及不成熟粒细胞。其属于细胞膜跨膜受　体，共由９７６个氨基酸分子组成，与配体干细胞因子　（ＳＣＦ）偶联调节机体造血干／祖细胞增殖、分化及凋　亡＿５　］。生理情况下，ＣＤ１１７仅表达于正常干／祖细　胞、髓系细胞及内皮细胞。发生急性髓系白血病时，　骨髓中原始细胞也会表达较高水平的ＣＤｌ１７＿＿７］。　本研究结果显示：１０５例ＡＭＬ患者中，检出ＣＤｌ１７　表达患者９６例，表达率为９１．４　，明显高于Ｂ＿　ＡＬＬ、Ｔ—ＡＬＬ组并具有显著性统计学差异（Ｐ＜　０．０５），可见ＣＤｌ１７抗原在ＡＭＬ白血病细胞中高　表达，可用于与ＡＬＬ鉴别诊断。　ＣＤ１３属于全粒细胞分子，可表达于不同发育　阶段的所有粒系细胞，包括粒细胞及其前体细胞，单　核细胞也可检测到该抗原，多数ＡＭＬ患者及１５　的ＡＬＬ患者均可见ＣＤ１３表达，ＣＤ１３表达敏感度　较高　］。本研究结果显示ＣＤ１３在ＡＭＬ中的表达　水平为８９．５　，明显高于Ｂ—ＡＬＬ、Ｔ—ＡＬＬ且具有显　著性统计学差异（Ｐ＜Ｏ．０５），可见ＣＤ１３在ＡＭＬ疾　病诊断中具有较高临床价值，也可作为ＡＭＬ与　ＡＬＬ鉴别标准。但因其在ＡＬＬ疾病中存在较高阳　性交叉表达，故特异度较低。杨川艺等［９　人就　ＣＤ１３在ＡＭＬ疾病中表达的灵敏度及特异度进行　比较，结果发现其灵敏度及特异度分别为９８．０　，　５３．３　，特异度明显低于灵敏度。　ＣＤ３３在各种不同的ＡＭＬ亚型中均可表达，　２Ｏ　左右的ＡＬＬ患者也伴有ＣＤ３３表达。ＣＤ３３由　３６４个氨基酸残基构成，分子量为６７ＫＤ的跨膜受　体，属于免疫球蛋白超家族成员，可通过免疫酪氨酸　抑制基序（ＩＴＩＭ）途径诱导白血病细胞发生凋　亡ｎ　。本研究中，ＣＤ３３在ＡＭＬ中的表达水平为　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｄｉａｇｎ。Ｍａｒｃｈ，２０１７，Ｖｏｌ　２１，Ｎｏ．３　９５．２　，明显高于Ｂ—ＡＬＬ、Ｔ—ＡＬＬ组，统计学差异　显著（Ｐ＜Ｏ．０５），可见ＣＤ３３也可用于为ＡＭＬ与　ＡＬＬ鉴别。从灵敏度与特异度方面来进行分析，　ＣＤ３３与ＣＤ１３有一定的相似性，二者灵敏度均明显　高于ＣＤｌ１７，但ｃＤｌ１７更具有髓系特异性。　本研究中ＣＤ１１７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在ＡＭＬ中共性　表达率为４７．６　（５ｏ／ｌｏ５），其中ＣＤｌ１７、ＣＤ１３、　ＣＤ３３在Ｍ０＋Ｍ１＋Ｍ２亚型中的表达率为６６．７　，　明显高于Ｍ３＋Ｍ４＋Ｍ５＋Ｍ６＋Ｍ７亚型中的表达　率２５．Ｏ　，经分析推测主要与原始细胞数量相关，　三者联合检测，能够提高检测的灵敏度，有助于　ＡＭＬ分型判断。　综上所述，ＣＤｌｌ７、ＣＤ１３、ＣＤ３３在鉴别诊断　ＡＭＬ中的ｌ临床价值较高，可作为ＡＭＬ患者诊断分　型的重要髓系免疫表型指征，值得临床推广。　参考文献：　［１］杨璐璐，刘欣，李庆，等．急性髓系白血病免疫分型特点及与　疗效相关性分析［Ｊ］．中国实验血液学杂志，２０１４，２２（１）：１．　［２］陈龙，王湘辉，陈沽平，等．抑制ｃ—ｍｙｃ基因表达对ＨＩ　一６Ｏ细胞　表面分化抗原ＣＤ１３、ＣＤ３３的影响［Ｊ］．现代肿瘤医学，２０１１，１９　（１０）：１９４０．　［３］马丽丽，陈骞，戴海滨，等．成人急性髓细胞白血病异常免疫表　型特点及临床意义［Ｊ］．哈尔滨医科大学学报，２０１２，４６（３）：２５３．　［４］刘鹏江，邓琦，李玉明，等．急性髓系白血病ｌ１２例流式细胞术　检测免疫表型分析［Ｊ］．山东医药，２０１１，５１（１３）：８４．　［５］马瑞霞，叶芳，李国霞，等．急性髓系白血病１０８例免疫表型特　征与临床预后分析［Ｊ］．中国药物与临床，２０１３，１３（２）：１４７．　［６］郑瑞，陈葆国，干灵红，等．急性髓系白ｍ病干细胞免疫表型和　信号通路蛋白活化检测及意义［Ｊ］．医学研究杂志，２０１１，４０（１１）：　８９．　［７］杜伟娇，于津浦，李慧，等．乳腺癌患者肿瘤组织中髓源抑制性　细胞的临床意义［Ｊ］．中国肿瘤生物治疗杂志，２０１０，１７（５）：５４５．　［８］胡晓杰，陈辉树，王季石，等．急性Ｂ淋巴细胞白血病骨髓移植后　髓外复发伴ＣＤ５６阳性一例［Ｊ］．中华血液学杂志，２０１３，３４（６）：　５０６．　［９］杨川艺，倪萍，涂文瑞，等．流式细胞术在我院急性白血病免疫　分型中的应用［Ｊ］．标记免疫分析与临床，２０１３，２０（６）：４１４．　［１Ｏ］孙嘉峰，杨波，张丽，等．流式细胞术分析骨髓增生异常综合　征患者原始细胞免疫表型特点及其在诊断中的意义［Ｊ］．中国实　验血液学杂志，２０１２，２０（３）：６３２．　（收稿日期：２０１６—０４—２９）