鱼腥草的炮制工艺与质量标准研究

维普资讯 http://www.cqvip.com 时珍国医国药２００７年第１８卷第１期３讨论　ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤｉＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２００７ＶＯＬ．１８　ＮＯ．Ｉ　方法。　ｒ　３．１　作者首先比较了甲醇、乙醚、醋酸乙酯对样品中熊果酸含　　量的影响，结果测得样品含量分别为０．４２，０．２１，０．２３　ｍｇ／ｇ，结果　参考文献：表明乙醚，醋酸乙酯提取不完全，故选择甲醇为提取溶媒。　［１］　国家药典委员会．中国药典，Ｉ部［ｓ］．北京：化学工业出版　３．２　随后比较了超声时间对熊果酸提取的影响，分别选择的超　社。２００５．　声时间为ｌ５，３０，４５，６０　ｒｎｉｎ，结果测得样品含量为０．３６，０．４１，　｜１　０．４０，０．４１　ｍｇ／ｇ，说明超声提取　斡ｍｉｎ后熊果酸不再增加，故选　择超声３０　ｍｉｎ。　［２］王旭，关晶．大山楂口嚼片定性定量的研究［Ｊ］．中国中药杂　志。１９９９。２４（１１）：６７５．　［３］　郝润喜，孙晓飞．山楂中熊果酸的高效液相分析［Ｊ］．药物分析杂　３．３　熊果酸与齐墩果酸在紫外末端吸收很难分离较好¨“Ｊ，选　志。１９９４。１４（２）：３０．　用紫外检测器，操作条件十分严格，噪音对结果影响很大，而采用　［４］　赵宇新，李曼玲．高效液相色谱一蒸发光散射检测法测定中药及制　剂中齐墩果酸和熊果酸的含量［Ｊ］．药物分析杂志，２００４，２４　ＥＬｓＤ检测器检测，不受外部环境干扰，分离较好，且简便、灵敏，　故本方法为复方利咽润喉颗粒中熊果酸含量测定的有效分析　（２）：１６７．　鱼腥草的炮制工艺与质量标准研究　胡馨，赵华良　（上海市中药研究所２００１２７）　摘要：目的优选鱼腥草药材确定炮制工艺；ＧＣ法测定甲基正壬酮的含量。方法以甲基正壬酮的含量对鱼腥草药材进　行优选研究，ＧＣ法检测鱼腥草饮片中的甲基正壬酮的含量。结果鱼腥草饮片中甲基正壬酮的含量不得少于０．００２％。　结论该法可以作为鱼腥草饮片炮制推荐标准。　关键词：鱼腥草；　甲基正壬酮；　气相色谱；炮制研究　中图分类号：Ｒ２８３．３；Ｒ２８４．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８－０８０５（２００７）０１－０１５０－０２　Ｓｔｕｄｉｅｓ　ＯＨ　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｑｕａｌｉｔｙ　Ｓｔａｎｄａｒｄ　ｏｆ　Ｈｅｒｂａ　Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａｅ　ＨＵ　Ｘｉｎ．ＺＨＡＯ　Ｈｕａ－ｌｉａｎｇ　（Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａｔｅｒｉａ　Ｍｅｄｉｃａ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２００１２７，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｌｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ｈｅｒｂａ　Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａｅ，ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　２－Ｕｎｄｅｃａｎ－　ｏｎｅ　ｂｙ　ＧＣ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｒｅｆｅｒｒｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　２－Ｕｎｄｅｅａｎｏｎｅ，ｗｅ　ｈａｖｅ　ｓｃｒｅｅｎｅｄ　ｏｕｔ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｔｉｍｅ　ｆｏｒ　Ｈｅｒｂａ　Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａｅ　ｂｙ　ＧＣ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　２一Ｕｎｄｅｃａｎｏｎｅ　ｏｆ　Ｈｅｒｂａ　Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａｅ　ｓｈｏｕｌｄ　ｎｏｔ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　０．００２％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｃａｌｌ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｏｆ　Ｈｅｒｂａ　Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａｅ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｈｅｒｂａ　Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａｅ；２－Ｕｎｄｅｃａｎｏｎｅ；ＧＣ；Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　鱼腥草早在宋年间就已经作为药材饮片使用，是一种常用中　好地规范、提高中药饮片的生产技术、质量标准，为了更好地规　药。其性辛，微寒。归肺经。具有清热解毒，消痈排脓，利尿通　范、提高中药饮片的生产技术、质量标准，根据《药品管理法》的　淋。用于肺痈吐脓，痰热喘咳，热痢，热淋，痈肿疮毒。据现代药　规定，药品监督管理部门将对中药材、中药饮片逐步实行批准文　理、药化研究，鱼腥草的有效成分有挥发油中的鱼腥草素、甲基正　号管理，对促进中药现代化事业的健康发展，具有重要意义，我们　壬酮等，有机酸及脂肪酸，黄酮类，包括槲皮素、槲皮苷、金丝桃　从众多中药饮片品种中挑选出产量大、疗效好、工艺成熟、稳定的　苷、芦丁等具有对免疫系统作用，可增强白细胞的吞噬能力以及　鱼腥草作为研究品种。通过对鱼腥草饮片工艺、炮制质量标准进　提高血清白细胞介素水平，具有抗菌作用，对各种微生物，各种细　行系列研究，为鱼腥草饮片的研究、生产提供科学依据。　菌，包括金黄色葡萄球菌，流感杆菌，肺炎球菌等均有明显的抑制　依据《中国药典》《全国中药炮制规范》１９８８年版和《上海市　作用。现代制剂有鱼腥草注射剂、片剂等。入复方的成药就更多　中药炮制规范》１９９４年版，结合生产实际，进行工艺研究试验（其　了。但目前各地对鱼腥草的炮制方法各有不同，上海地方标准收　中建立了鱼腥草中甲基正壬酮含量测定方法，建立了鱼腥草饮片　载了净制，饮片的炮制规范中的质量标准均没有定性鉴别与有效　检查项目与浸出物等质量标准项目），建立了饮片炮制方法，根　成分含量测定项目，因此有必要制定相应的标准提高炮制规范中　据中试结果表明该工艺稳定、饮片质量可靠。　的质量标准。　１仪器与材料　长期以来，由于鱼腥草类饮片来源复杂，鉴别方法简单，质量　仪器：Ａｇｉｌｅｎｔ６８９０Ｎ气相色谱仪。　上无法评价，给鱼腥草的临床用药带来许多困难。尽管各地已经　试药：甲基正壬酮对照品（Ｓｉｇｍａ公司）。　相继颁布了《中药炮制规范》，可因为产地、品种、生产工艺等不　试剂：正己烷（色谱纯）；丙酮（色谱纯）。　同，没有统一的炮制标准，给临床用药，成药生产带来许多不便，　药材：鱼腥草由上海余天成药业有限公司提供。经鉴定为　质量得不到保证，因此有必要建立统一规范的炮制标准。为了更　三白草科植物蕺菜Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ　ｅｏｒｄａｔａ　Ｔｈｕｎｂ的干燥地上部分。　２方法与结果　收藕日期：２００６－０６—１２；　修订日期；２００６－０９－２５　２．１色谱条件与系统适应性试验弹性石英毛细管柱（３０　ｍ×　作者简介：胡馨（１９６３－）。女（满族）。上海人，现任上海市中药研究所高　０．３２　ｍ×０．２５　ｍ）ＰＥＧ－２０　Ｍ，ＳＧＥ公司生产。ＦＩＤ检测器。进　级工程师，学士学位，主要从事中药新药研发、中药分析工作．　样口温度２５０％和检测器温度３００￣Ｃ分流比５０：１程序升温；初始　・１５０・　维普资讯 http://www.cqvip.com ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２００７　ＶＯＬ．１８　ＮＯ．１　时珍国医国药２００７年第ｌ８卷第１期　８０℃。保持１　ｍｉｎ以每分钟２．５℃升至１２０℃，然后以每分钟　２．１０炮制饮片鉴别取本品２５　ｇ，切碎，置圆底烧瓶中，加水　４ｏ℃快速升温至２３５℃保持７　ｍｉｎ；氮气流速：１５５　ｍｌ／ｍｉｎ尾吹：２５　２５０　ｍｌ，连接挥发油测定器。自测定器上端加水使充满刻度部　ｍｌ／ｍｉｎ氢气流速：３０　ｍＬ／ｍｉｎ，空气流速：４００　ｍｌ／ｍｉｎ。进样１．０　分，再加醋酸乙酯１　ｍｌ，连接回流冷凝管，加热回流４　ｈ，停止加　理论塔板数按甲基正壬酮峰计算为３６４２１（３．６×１０　）。　热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液。另取甲基正壬　２．２对照品溶液的制备精密称取甲基正壬酮对照品适量，加正　酮对照品，加醋酸乙酯制成每毫升含１０　ｇ的溶液。照薄层色谱　己烷制成每毫升含４ｏ　ｇ的溶液。精密吸取储备液ｌ　Ｉｎ１置于１Ｏ　法（附录ⅥＢ）试验，吸取上述供试品溶液５　，对照品溶液２　ｌ，　ｍｌ容量瓶中，加正己烷至刻度，即得。　分别点于同一以羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，　醋酸乙酯（９：１）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝　２．３供试品溶液的制备取本品粉碎，取２Ｏ　ｇ，置圆底烧瓶中，加　以正己烷－水５００　，连接挥发油测定器。自测定器上端加水使充满刻度部　基苯肼试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，　分，再加正己烷２　ｍｌ，连接回流冷凝管，加热回流５　ｈ，停止加热，　显相同的黄色斑点。见图ｌ。　放置片刻，分取正己烷层，用正己烷定容至１０　ｍｌ，作为供试品　溶液。　２．４　线性关系考察精密称取甲基正壬酮对照品适量，加水制　成每ｌ　Ｔｎ１含０．３４　ｍｇ的溶液，即得储备液。分别精密吸取储备液　１，２，３，４和５　ｍｌ置于ｌ０　ｎｌｌ量瓶中，加正己烷至刻度，Ｂｐ得。然　后精密吸取对照品溶液１　，注入气相色谱仪，测定，以甲基正壬　酮浓度为横坐标，峰面积（Ａ）为纵坐标，绘制甲基正壬酮的标准　曲线。标准曲线：Ａ＝２８７．５３Ｘ＋０．５７（ｒ＝０．９９９　８）表明甲基正　壬酮在０．０３４～０．１７　ｍｇ／ｍｌ之间具有良好的线性关系。　２．５精密度测定同一供试溶液，以相同进样量依法测定５次，　２　２　２　２　２　２　２　２　２，结果ＲＳｏ为ｏ．４９％。　２．６重复性实验取取同一批样品，依法重复提取并测定６次，　结果ＲＳｏ为ｏ．８３％。　２．７　回收率的测定采用加样回收法，在已知含量样品中加入　定量对照品，按“质量标准草案”含测项下测定，按下式计算回收　率。结果见表５。加样回收率＝（Ｃ－Ａ）／Ｂ×１００％式中Ａ为样品　中被测成分含量，Ｂ为加入对照品量，Ｃ为实际测出成分含量。　见表１。　表１回收率实验结果　６　７　８　Ｏ　Ｏ　∞　∞舯∞　∞∞∞Ｏ　９　Ｏ　１　２　３　４Ｏ　似　Ｏ　１．供试品溶液１（批号２００４０９０￣）２．供试品溶液２（批号２００４０９０７）　３．供试品溶液３（批号２００４０９０８）４．供试品溶液４（批号２００４０９０９）　５．供试品溶液５（批号２００４０９１０）６．对照品６　７．供试品溶液７（批号２００４ｏ９０ｌ１）８．供试品溶液８（批号２００４０９１２）　９．供试品溶液９（批号２００４０９１３）ｌ０．供试品溶液ｌ０（批号２００４０９０１４）　１１．供试品溶液１１（批号２００４０９１５）　围１薄层色谱图　２．１１炮制饮片样品测定分别精密吸取对照品溶液与供试品　溶液各ｌ　ｌ，注入气相色谱仪，测定，即得。结果见表３。　裹３样品测定结果　样品　甲基正壬酮（％）　Ｏ．ｏｏ３　５　Ｏ．ｏｏ３　４　Ｏ．ｏｏ３　１　Ｏ．Ｏｏ４　５　测定结果表明：本方法回收率较好，方法可行。　０．Ｏｏ４　ｌ　Ｏ．００３　２　２．８不同产地、采收季节药材质量的比较本资料收集不同地区　的样品进行鉴定检验。根据结果确定原料产地。检测方法按　《中国药典＞２０００年版Ｉ部１８１页鱼腥草项下有关规定。结果见　表２。　表２不同产地鱼腥草样品测定结果　Ｏ．ｏｏ３　４　Ｏ．ｏｏ３　７　Ｏ．ｏｏ３　３　Ｏ．ｏｏ３　９　根据结果，暂定甲基正壬酮的含量不得少于０．００２％。此标　准还有待于继续扩大样品范围。　３讨论　用ＧＣ法测定鱼腥草中的甲基正壬酮含量的准确度和灵敏　度较高，我们运用毛细管柱程序升温，色谱峰型好，分离佳，结　果更加准确，可行性高。我们用最佳工艺扩大中试，放样ｌＯ批，　结果稳定，我们还对鱼腥草原药材进行了筛选，对其原药材与炮　结果分析，１，２，３，４，５批样品根据其甲基正壬酮含量，检查　制品进行了各项理化测定对比，制定了质量标准，本文可作为制　项及产量、价格、运输等因素考虑，本实验最终确定四川雅安为较　定鱼腥草炮制品质量标准参考。　佳产地。　．　参考文献：　２．９饮片炮制加工工艺研究炮制工艺流程：原药材除去杂质，　［１］　李秀珍。高海。刘海静．鱼腥草注射液指纹图谱分析方法的研究　整理，喷潮，切制，干燥，检验合格，包装。其中干燥部分的温度控　［Ｊ］．西北药学杂志，２００２，１７（８）：１５４．　制尤其重要。经过研究测定以自然阴干为佳，超过４Ｏ度则挥发　［２］国家药典委员会，中国药典，Ｉ部［Ｓ］．北京：化学工业出版社，　油含量下降，甲基正壬酮含量下降。　２００５：１５５．　・１５１・