标准溶液配置

目录

一. 标准溶液配置--------------------------------------- 2 1. 0.0588mol/L高锰酸钾标准溶液

2. 0.1N Ｎa2S2O3·5H2O标准溶液的制备,24.82g/L 3. 6N 醋酸(HAC) 4. 10％碘化钾溶液

二．指示剂 -------------------------------------------- 3 1. 甲基橙 2. 甲基红 3. 酚酞

4. 10％铬酸钾指示液 5. 0.5％淀粉指示液 6. 碘化钾淀粉试纸 7. 还原黄G试纸的制备

三．试剂的测定 ---------------------------------------- 4 1. 次氯酸钠质量浓度的测定 2. 漂白粉中有效氯的测定 3. 冰醋酸（HAC） 4. 硫化碱（Na2S）

5. 双氧水质量浓度及分解率的测定 6. 烧碱浓度测定 7. 双氧水浓度测定

四．测试方法 ------------------------------------------- 6 1. 比移值测定法（滤纸／染液上升法） 2. 缩水率测定 3. pH值的测定

4. 生物整理用纤维素酶活力的测定方法 4.1．滤纸崩溃法 4.2．CMC粘度法

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一. 标准溶液配置

1．0.0588mol/L高锰酸钾标准溶液

称取9.5g纯高锰酸钾(KMnO4)溶于1L蒸馏水中,再煮沸15min左右,待冷却后盖紧，避免与尘埃及有机物接触，同时不可与强光接触。静置数天后，用石棉过滤储存于棕色试剂瓶中，并放置暗处，然后用草酸钠标定。

2．0.1N Ｎa2S2O3·5H2O标准溶液的制备24.82g/L

制备：称取25g化学纯粹的硫代硫酸钠（Ｎa2S2O3·5H2O），溶解于1L新煮沸（煮沸以驱除水中溶解的二氧化碳和防止微生物的作用，如有二氧化碳的存在，并与水反应生成碳酸，会使硫代硫酸钠起分解作用）。而冷却的，加有0.1g无水碳酸钠的蒸馏水中，搅动使溶解，移入暗色大瓶中保存，瓶口用塞子盖紧，待校准。

制备或保存时应注意下列几点：日光能促进Ｎa2S2O3 溶液分解作用，所以Ｎa

制成的Ｎa2S2O3溶2S2O3溶液应该保存在清洁的有色瓶中,尽可能避免和空气接触．

液，它的浓度随放置时间稍有改变，在最初10～14天中，浓度常常有些增加，过此以后浓度就会慢慢减小．若在配置溶液时加入Na2CO3，使其在溶液中的浓度约为0.01～0.02%，就可以防止溶液的分解．

校准：以化学纯粹的重铬酸钾K2Cr2O7作基准物校准硫代硫酸钠溶液的规定． 原理：当加于K2Cr2O7中的KI及HCl（或Ｈ2ＳＯ4）之量为过量时，析出的碘与重铬酸钾的量相当．滴定时Ｎa2S2O3溶液的消耗量与析出的碘之量相当．因此，在滴定终了时硫代硫酸钠的耗用量与重铬酸钾的量相当．

操作：将化学纯粹的重铬酸钾放在120～125℃的烘箱内烘1小时．冷却后称取0.1g，置于300ml的定碘瓶中，加水50ml，加10％ KI溶液20ml及6N HCl溶液５ml，充分摇动混和，盖住瓶塞，在暗处静置５min，使碘充分析出，加水100ml稀释摇匀．然后由滴定管中滴下Ｎa2S2O3溶液（开始滴定时不用加指示剂），滴至溶液显现淡黄色（这时表示只有少量的碘留下）时，加入淀粉溶液3～5ml，继续用同一Ｎa2S2O3溶液滴定至蓝色消失，而变成三价铬离子Cr+++的绿色时为止（在这实验中滴定最后所得的溶液并不是无色的，因为三价铬离子使溶液当有淡绿色）．

记录Ｎa2S2O3溶液用量后，再多加一滴Ｎa2S2O3溶液，检查是否已经到达终点，如果这时颜色不再改变，表示滴定已经完成．

根据碘的挥发性，碘量法的滴定必须在定碘瓶中冷的状态下进行． 计算：

校准剂重量（纯）

ＮＮaSO＝────────────────────────

所耗用被校准液毫升数Ｘ校准剂毫升克当量

0.1

或：ＮＮaSO＝───────────

V × 0.04904

223

223

式中ＮＮaSO――要求得的硫代硫酸钠规度

223

V――所耗用确定浓度的硫代硫酸钠毫升数 0.1――校准剂重铬酸钾的称出量

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0.04904――重铬酸钾的毫克当量数.

3．6N 醋酸(HAC)：将化学纯粹的冰醋酸350ml用水稀释至1升.

4．10％碘化钾溶液：把10g碘化钾溶解于100ml水中．

二．指示剂 １．甲基橙

 为橙黄色粉末或结晶性鳞片，微溶于冷水，易溶于热水，但不溶于酒精

中．

 变色范围：pH3.1～4.4，颜色由红变至棕黄

 1％甲基橙指示液：溶解甲基橙0.1g于100ml热水中，如有必要，加以

过滤．

２．甲基红

 为暗红色的粉末，微溶于水，易溶于酒精中．  变色范围：pH4.2～6.5，颜色由红色变至黄色．

 1%甲基红指示液：溶解甲基红0.1g于100ml 80%的酒精中，如有必要，

加以过滤．

３．酚酞

 为白色的结晶粉末，微溶于水，易溶于酒精中．  变色范围：pH 8.2～10，颜色由无色至红色．

 1%酚酞指示剂：溶解酚酞1g于100ml 80%的酒精中，缓慢滴入0.1N烧

碱液到微红色．

 酚酞指示剂加入烧碱的原因：由于酒精放置时间久暂的不同，受到外界

所引起的氧化性也不一样，因此呈现不同程度的酸性，若不预先用稀淡的烧碱加以中和，则酚酞指示剂本身势必要消耗一定的碱，这对指示剂的要求是不恰当的，所以必须要用稀碱液中和全部酒精经氧化后生成的酸．

４．１０％铬酸钾指示液

 溶解１０g化学纯粹的铬酸钾K2CrO4于１００ml水中． ５．０.５％淀粉指示液

 将０.５g氯化锌（或水杨酸）溶解于１００ml水中，过滤煮沸．另取

２.５g 可溶性淀粉，置于小研钵中，加少量水研匀使成细糊，倒入正在煮沸的氯化锌（或氯化汞）溶液中，继续煮沸３－５min，并时加搅拌，冷却后加水稀释到５００ml，搁置片刻，然后倾取基澄清液应用．  氯化锌的作用：作淀粉指示液保藏时的防腐剂，以防分解． ６．碘化钾淀粉试纸

 取１０％碘化钾溶液５ml，加到５００ml的0.5%淀粉指示液中．然后

将滤纸在碘化钾淀粉溶液里浸渍片刻，取出烘干即成．

７．还原黄G试纸的制备

用还原染料浸染色时(如卷染),需要测试染液中保险粉的用量是否足够!染液中保险粉用量可用还原黄G试纸进行检验:将试纸浸入染液，3min之内应由黄变蓝,如试纸变蓝缓慢,即表明保险粉含量不足,必须增加用量.

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取还原黄G 2.5g，用太古油(润湿剂)调成浆状，加入100ml热水，加入36°Bé烧碱20ml，调匀后，加入50℃热水(蒸馏水)1000ml，加保险粉10g，还原10～15min。以白色滤纸浸入蓝色隐色体中3～5min，然后取出，在空气中氧化、变成黄色、晾干即成。

三．试剂的测定

1．次氯酸钠质量浓度的测定

1>.次氯酸钠溶液中的有效成分以有效氯表示．有效氯含量的测定可用碘量法或亚砷酸钠法．这里采用碘量法． 2>.主要化学品：

硫代硫酸钠（Ｃ．Ｐ．）、碘化钾（Ｃ．Ｐ．）、冰醋酸（Ｃ．Ｐ．）、淀粉指示剂

3>.试剂配制：

硫代硫酸钠C(Na2S2O3)=0.1mol/L溶液、醋酸Ｃ(HAC)=6mol/L溶液、10％碘化钾溶液

4>.步骤：

准确移取次氯酸钠漂液10ml，置于500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀．然后准确移取25ml，放入250mL三角瓶中，加入50mL蒸馏水，10mL 10%碘化钾溶液，10mL 6mol/L的醋酸溶液，放置暗处5min．然后用0.1mol/L硫代硫酸钠溶液滴定析出的碘，在溶液中变成微黄色时，加入3mL 0.5%淀粉指示剂，继续滴至蓝色褪去即为终点（半分钟内不再呈现蓝色）．记录所耗用的硫代硫酸钠的量．作３个平行试验，取平均值． 5>.计算：

NaClO + 2KI +H2O  NaCl + I2 +2KOH

I2 + 2Na2S2O3  2NaCl + Na2S4O6

C(Na2S2O3) × V(Na2S2O3)

有效氯（g/L）＝ ──────────────× 35.5

V漂液 V漂液=(10/500) ×25

有效氯（g/L）＝71 × C(Na2S2O3) × V(Na2S2O3)

２．漂白粉中有效氯的测定

一般优良的漂白粉含有效氯约30-50%。高浓度的漂白粉称漂白精，含有效氯一倍于普通漂白粉。有效氯是指漂白粉的有效成份，即一定量的漂白粉与酸作用后所生成的氯量，用百分率表示。

用称量瓶精确称取试品约5g，移置瓷研钵中,加少量水（约20ml）研磨成匀和的糊状,再加水搅拌,静放数分钟待粗粒沉降,倾出上层清液,经漏斗注入500ml的容量瓶中,研钵中残存的试品仍加少许水研磨后注入容量瓶中,如此反复数次,最后将研钵洗净,亦注入量瓶中,继加水稀释至刻度,摇匀.用50ml的单标移液管移取此匀和的试品溶液50ml于300ml锥形瓶中,再加水100ml,漂白粉的水解作用而放出少量的氯 ,加入20ml 10%KI溶液,试品即变成淡黄色.加6N HAC 1

4

5ml,试品即变成深黄色,用0.1N 硫代硫酸钠滴定,愈速愈好.滴至溶液成淡黄色时,加入淀粉溶液数滴,继用0.1N硫代硫酸钠溶液滴定,滴至试品蓝色消失为止. 计算公式:

硫代硫酸钠当量浓度×体积毫升数×35.457×(100/1000)

有效氯(Cl2)%＝ ──────────────────────────

试品重量×(50/500)

0.1N硫代硫酸钠毫升数×0.003547

有效氯(Cl2)%＝ ────────────────-×100

试品重量×50/500

３．冰醋酸（HAC）

测定百分含量 操作：

吸10ml冰醋酸于1000ml的容置瓶中，加入蒸馏水搅匀。 吸稀释后的冰醋酸10ml入三角瓶加蒸馏水100ml酚酞2滴。

用0.1N NaOH滴定至红色，另吸10ml浓冰醋酸称重W(冰醋酸)。

计算：

0.1×VNaOH(ml)×60.4×100

X ％＝ ────────────────×100％

W(冰醋酸)×100

合格：HAC含量98＋1％。

４．硫化碱（Na2S）

测定百分含量： 操作：

用称量瓶精确称取试品5g，溶于100毫升的水中，用水洗入500毫升的量瓶中，加水至标记,用单标移管吸取试品溶液50毫升，使呈酸性，以淀粉溶液作指示剂，立即以0.1N碘溶液滴定，滴至试品溶液呈蓝色时为止。 计算：

N(I2) × V(I2) ×（ 78.05／2000）

Na2S％＝ ────────────────-×100

试品重量×（50／500）

合格：Na2S含量60＋3％。

５．双氧水质量浓度及分解率的测定 1>.主要化学品：

硫酸（C.P.）、高锰酸钾（C.P.） 2>.试液：

0.1mol/L高锰酸钾标准溶液、６mol/L硫酸溶液 3>.步骤：

取５ml过氧化氢漂液置于100mL三角瓶中，加入10mL 6mol/L硫酸溶液，然后用0.1mol/L高锰酸钾标准溶液滴定，当溶液自无色变成微红色时（半分钟红色不消失）即为终点。记下消耗的高锰酸钾毫升数。重复３次，取平均值。 4>.计算：

ＫMnO4+5H2O2+3H2SO42MnSO4+K2SO4+8H2O+5O2

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C(ＫMnO4)×V(ＫMnO4)

H2O2 (g/L)＝─────────────-×17

V (H2O2)

漂前漂液双氧水浓度-漂后漂液双氧水浓度

分解率＝────────────────────-×100%

漂前漂液双氧水浓度

６．烧碱浓度测定

用250ml三角锥瓶加入水50ml,再加入待测液5ml和2到3滴酚酞。 用1.25N硫酸滴定至红色消失。 NaOH浓度（g/L）=硫酸用量(ml)X10 ７．双氧水浓度测定

用250ml三角锥瓶加入水50ml,再加入待测液5ml和6N硫酸10ml。 用0.294N高锰酸钾标准液滴至微红。 如果30秒不褪色则：

双氧水浓度（g/L）=高锰酸钾用量(ml) 四．测试方法

１．比移值测定法（滤纸／染液上升法）

净染料配成一定浓度的水溶液，取3X15cm的滤纸条，在一端距纸边1cm处用铅笔划一横线，然后浸入染液中，使横线触及液面５min后取出，垂直悬挂，晾干后分别测量水及染料上升高度，按下式求出染料的比移值．

染料上升的高度

比移值＝───────────

水上升的高度 ２．缩水率测定

取全幅布样长55cm，放置10h以上，使其形变稳定。分别在织物经向三处相距50cm处，以及沿纬相距50cm三处做幅宽度量的标记，精确至0.1cm。

先在M988型缩水试验机（电动转速500±20r/min）水箱内放好60±2℃热水至规定标记，投入试样（一般每次放置3～4块），加盖封闭保温，启动电动机，搅拌15min后取出布样，方在水池中平整，沿经向叠成四折，用手压去水分。然后将布样平摊在金属网上，在60±5℃的条件下烘干，取出，冷却半小时，放置4小时。测量并记录下各标记间的距离，与水洗前比较。

缩水率以各个经向（纬向）标记测得的算术平均值为准。

３．pH值的测定

测定纺织品表面的pH值采用国际《GB/T7573-1987纺织品水萃取液pH值的测定》。以下介绍选择几组有代表性的样品进行pH值测定。 1>.试剂：

蒸馏水、缓冲溶液 2>.试样：

称取2±0.05g试样（涤纶、棉、真丝）三份，剪成1cm大小以便能迅速浸润。

3>.仪器：

具塞三角烧瓶、振荡器、pH计、天平、烧杯、量筒

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4>.测定方法：

室温下，把试样放入具塞三角烧瓶中，加入100ml蒸馏水，在振荡器上振荡1h，用缓冲溶液标定酸度计的pH值（定位）。将三份萃取液分别倒入烧杯中，用pH计测定其pH值，以第二，第三份水萃取液所得的pH值的平均值作为试样数据，精确至0.05。

４．生物整理用纤维素酶活力的测定方法 ４.１．滤纸崩溃法 1> 原理

纤维素酶能分解滤纸，产生葡萄糖等还原糖，与3，5-二硝基水杨酸显色剂作用，可生成橙黄色络合物，用比色法能够定量测定还原糖的生成量。本方法在最适条件下，以单位时间内一定量的酶制剂释放出的葡萄糖量，来表示纤维素酶制剂的活力。 2> 试剂

2.1> 3，5-二硝基水杨酸显色剂

称取10g 3，5-二硝基水杨酸（熔点168-169℃，若熔点偏低，则应重结晶，方法是称取10g 3，5-二硝基水杨酸，加50mL水，加热溶解，冷却析出结晶，过滤，用冷水洗涤，干燥后得白色结晶），溶于蒸馏水中，加入20 g氢氧化钠，200 g酒石酸钾钠，加水500 mL，加热溶解后，加入重蒸酚2g、无水亚硫酸钠0.5 g，加热搅拌，待全部溶解后，冷却，移到1000 mL容量瓶中，稀到刻度，放置一周后过滤备用。此显色剂应贮存于棕色瓶中。 2.2> 缓冲溶液

0.04M，pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液。 3> 方法

3.1> 酶液制备

按工艺要求的浓度、pH值等配制酶处理液。 3.2> 酶解

分别吸取酶处理液0、0.5、1.0、1.5、2.0mL，置于试管中，用pH值为4.5 的醋酸-醋酸钠缓冲溶液补足到2.0 mL。置于40℃水浴中保温数分钟后，在每管

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酶液中加入1×1cm的新华1号层析滤纸6片，立即记时，准确反应60min，然后立即在沸水浴中加热10min，使酶失活。 3.3> 显色

在上述每管酶解液中，加入3 mL 3，5-二硝基水杨酸显色剂，在沸水中加热15 min，冷却，加蒸馏水10 mL，摇匀，用分光光度计在550 nm波长下，用1 cm比色皿，以空白为对照，测定其光密度。以光密度为纵坐标，各管酶浓度为横坐标作图，应成一通过原点的直线。取直线上任意一点计算即可。如成曲线关系（直线弯曲），应将酶液进一步稀释后再进行测定。 3.4> 葡萄糖标准曲线绘制

准确配制1000μg/ mL葡萄糖标准溶液。分别取0、0.10、0.20、0.30┄┄0.70 mL葡萄糖标准溶液，用蒸馏水补足到2.0 mL，加3 mL 3，5-二硝基水杨酸显色剂，同上进行显色、比色，以光密度（O.D.550nm）为纵坐标，葡萄糖微克数为横坐标作图，应得一直线。 3.5> 计算

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在上述酶浓度和光密度对应的直线上取酶量W，对应O.D.550nm在葡萄糖标准曲线上查得葡萄糖的微克数A，按下列公式进行计算：

A

纤维素酶活力（单位/g）= ────

t×W

式中：A —由标准曲线查出释放葡萄糖的量，μg； t —酶解所用的时间，min；

W —反应中含酶量，g（若原酶制剂为液体，则以mL计，同时酶活力单位以单位/ mL计）。

单位定义：在上述条件下（pH值为4.5，温度为40℃），每分钟分解滤纸产生1μg葡萄糖的酶量，为1单位的酶。

摘自《印染》1994年第3期 ４.２．CMC粘度法 1> 测试仪器与方法

仪器：NDJ-1 ROTATIONAL VISCOMETER 上海天平仪器厂 计算公式：(1/V1―1/V0)×10000/10

相对活力含义：在30℃水溶液中，1g酶作用于20g CMC，反应10分钟，相当于有10g CMC水解时，其相对活力为100。 2> 操作：

醚化度为85%的CMC，加水制糊配成1%的溶液；取纤维素酶加水配成1g/L的溶液；0.2M HAc溶液。三者按2∶1∶1混合（即15∶7.5∶7.5。中性酶则不加醋酸液，以水代之），在30℃条件下反应10分钟，在回转式粘度计上，用0#转子，转速6 rpm，注入混合液20 ml。 3> CMC的浓度—粘度混合液粘度： CMC粘度（%） 0.5 0.4 0.33 0.25 0.2 0 粘度（mPa.s） 30 15 9 7.5 5.5 0.2 4> 计算

酶活力= (1/V1―1/V0)×10000/10

V0 = 不加酶的CMC混合液粘度 V1 = 加酶后的CMC混合液粘度

粘度7.5时，活力 = (1/7.5―1/30)×10000/10 = 100

当样品混合液的粘度与浓度减半时的数值相同时，活力指标即为100。

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