产品简介:本试剂盒结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂的稳定性好、 无基因组DNA污染和离心柱方便、快捷、纯度高的优点,适用于从细 菌、血液、动植物组织和培养细胞中分离总RNA。每个离心柱每次可处 理50-100mg组织或5×106个细胞,也可同时处理大量不同样品。本试 剂盒独创的裂解液能有效地消除基因组和蛋白污染,使获得的RNA纯度
高、稳定性好,可用于RT-PCR、Northern blot、Dot Blot、mRNA提取、cDNA 合成、polyA 筛选、体外翻译和RNase保护分析等试验。
总RNA提取试剂盒产品包装:
试剂盒组成 R1200-50 R1200-100 储存条件 裂解液 50ml 100ml 2-8℃ 漂洗液 15ml 15ml×2 RT
RNase-free ddH2O 25ml 50ml RT RNase-free吸附柱 50个 100个 RT
RNase-free收集管(1.5ml) 50个 100个 RT RNase-free收集管(2.0ml) 50个 100个 RT 说明书 1份 1份 RT
总RNA提取试剂盒操作步骤:
1. 样品处理:
植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg 组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml 裂解液中混匀。
动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg 组织加1ml 裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
.细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml 裂解液混匀。
血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3 倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10 分钟,10000rpm离心1 分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2 倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml 裂解液混匀。
2 将处理后的样品在室温放置5 分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。
4. 2-8℃ 12000 rpm 离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。 5. 吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室温放置2分钟,2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min,弃废液。
6. 第4 步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2 分钟,2-8 12000rpm ℃ 离心2min,弃废液。
7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),2-8 12,000 rpm ℃
离心2min,弃废液。
8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min,弃废液。
9. 12000rpm离心2min,弃掉收集管,将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。
10. 将吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O ,室温放置5min,12000rpm室温离心2min即得到RNA 总RNA提取试剂盒注意事项:
1、常更换新手套,防止皮肤表面含有的RNase导致污染。
2、操作过程中使用的无RNase的塑料制品和枪头以避免交叉污染。 3、配制溶液应使用无RNase的水。
4、裂解液有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品 相关产品
高效RIPA组织/细胞快速裂解液 RIPA组织/细胞裂解液 非变性组织/细胞裂解液 核蛋白抽提试剂盒 红细胞裂解液(无菌) 红细胞保存液(阿氏液) 酵母破壁酶溶液 RNAse A溶液(10mg/ml ) 5×RNA Loading Buffer(非变性) 2×RNA Loading Buffer(变性) 总RNA提取试剂盒 DEPC处理水 RNA病毒基因组提取试剂盒 剥离硅烷 通用RT-PCR试剂盒(M-MLV) 通用RT-PCR试剂盒(AMV) 20ml/100ml 100ml 100ml 50T/100T 100ml/500ml 100ml/500ml 1.25ml 1ml 1ml/1ml*5 1ml/1ml*5 50T/100T 100ml/500ml 50T/100T 200ml 25T/50T/100T 50T/100T
因篇幅问题不能全部显示,请点此查看更多更全内容