吉林化工学院
食品分析实验报告
实验名称 肉制品中亚硝酸盐的测定 指导教师 陈 萍 班 级 食 品0901 学 号 ******** 姓 名 黄 锡 红 日 期 2012。10.30
肉制品中亚硝酸盐的测定
一、目的与要求:
1、明确亚硝酸盐的测定与控制成品质量的关系。 2、明确与掌握盐酸萘乙二胺法的基本原理与操作方法。
二、原理:
样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,生成的重氮化合物,再与萘基盐酸二氨乙烯偶联成紫红色的重氮染料,产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比,可以比色测定。反应式如下:
三、试剂与仪器:
1、亚铁氰化钾溶液:称取106克亚铁氰化钾[K4Fe9(CN)5.3H2O],溶于水后,稀释至1000毫升。
2、乙酸锌溶液:称取220克乙酸锌[Zn(CH2C00)2·2H20],加30毫升冰乙酸溶于水,并稀释至1000毫升。
3、饱和硼砂溶液:称取5克硼酸钠(Na2B07·10H20),溶于100毫升热水中,冷却后备用。
4、0.4%对氨基苯磺酸溶液:称取0.4克对氨基苯磺酸,溶于100毫升20%的
盐酸中,避光保存。
5、0.2%盐酸萘乙二胺溶液:称取0.2克盐酸萘乙二胺,溶于100毫升水中,避光保存。
6、亚硝酸钠标准溶液:精密称取0.1000克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠,加水溶解移入500毫升容量瓶中,并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于200微克亚硝酸钠。
7、亚硝酸钠标准使用液:临用前,吸取亚硝酸钠标准溶液5.00毫升,置于200毫升容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。 8,小型绞肉机。 9、分光光度计。
四、操作方法:
1、样品处理:称取5.0克经绞碎混匀的样品,置于50毫升烧杯中,加工2.5毫升饱和溶液,搅拌均匀,以70℃左右的水约30毫升将样品全部洗入500毫升容量瓶中,置沸水浴中加热15分钟,取出后冷至室温,然后一面转动一面加入5毫升亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5毫升乙酸锌溶液以沉淀蛋白质,加水至刻度,混匀,放置0.5小时,除去上层脂肪,清液用滤纸过滤弃去初滤液30毫升,滤液备用。 2、测定
吸取40毫升上述滤液于50毫升比色管中,另吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50毫升亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1、2、3、5、7、10、12.5微克亚硝酸钠),分别置于50毫升比色管中,于标准与样品管中分别加入2毫升0.4%对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3-5分钟后各加入1毫升0.2%盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15分钟,用2厘米比色杯,以零管调节零点,于波长538nm处测吸光度,绘制标准曲线比较。
五、数据处理:
1、检验待测样品的最大吸光度:
最大吸光度区域测试图1-1
最大吸光度区域测试图0.30.250.20.150.10.0500100200300400500600700波长 nm吸光度系列1系列2
待测样品最大吸光度测试图1-2
最大吸光度测试图0.30.250.20.150.10.050525530535540545550555560系列1系列2
吸光度波长 nm
2、 标准曲线绘制 :
样品吸光度数据表1-1
标准溶液浓度(ug/ml) 标准溶液吸光度 样品吸光度
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5
0.115 0.137 0.170
0.278 0.348
样品吸光度与亚硝酸盐标准曲线图1-3
吸光度与亚硝酸盐标准曲线0.40.350.30.250.20.150.10.0500102030 C (ug/ml)405060系列1线性 (系列1)y = 0.0066x + 0.0174A
计算: 将样品吸光度带入上图标准曲线公式中得到: 0.170=0.0066x+0.0174 x=23.12ug
x即为测定样液中亚硝酸盐的含量A,将其带入下列公式有:
XA1000
40m10001000250 X=
23.121000 =0.0578 g/kg
402.510001000250X:样品中亚硝酸盐的含量,g/kg; m:样品质量,g;
A:测定用样液中亚硝酸盐的含量,ug.
即样品中亚硝酸盐含量为0.0578g/kg
六、实验讨论:
1、在样品前处理后,在滤液中的某些成分影响被测组分吸光度时,将构成
干扰,影响测量结果的准确性。某些干扰离子与试剂生成有色配合物,使测定结果偏高;某些干扰离子与试剂反应,生成的配合物虽然无色,但消耗大量的显色剂,使被测离子的显色反应不完全,使测定结果偏低;某些干扰离子与被测离子结合成离解度小的另一种化合物,使被测离子与显色剂不反应,使测定结果偏低。
2、吸光度测定时,应该先用蒸馏水洗干净比色皿,再用待测样液润洗三次。用滤纸擦干净两侧水滴,注意用手轻轻粘,而不是用力擦。还要注意调准测试仪。反之,会对测试结果造成很大影响。
七、思考题
1、 肉制品中亚硝酸盐的测定,为什么要用试剂空白作参照溶液?为什么用
试剂空白调吸光度为零
答:空白样,是为了考虑外界因素 对实验的影响,而做的对比样。主要是为了消除其它试剂对吸光值的影响。空白样吸光值置零以后,测得亚硝酸盐样品的吸光值才是正确的。
八、评语和成绩:
成绩: 指导教师:
因篇幅问题不能全部显示,请点此查看更多更全内容