4.
建议: 在每次测量完毕后,用蒸馏水清洁样品平台,这样可以保证下一次测量的准确性。 每次测量的样品量建议不少于2微升
Nanodrop分光光度计操作说明
双击电脑屏幕上的Nanodrop图标,启动软件.
选择所需的测量模式,屏幕上会弹出初始化仪器的提示.往仪器的加样孔中加入2微升的蒸馏水,合上上盖使形成液柱,然后点击确定以开始初始化,可以听见电磁阀开合的声音. 五六秒后屏幕上的提示信息消失,表示初始化完成.用擦镜纸将蒸馏水擦干净,加入2-3微升的Buffer,合上上盖并点击Blank.
Blank完成后,用擦镜纸将Buffer擦干净即可以开始上样,点击Measure开始测量.
图一 图二
图三 图四
5. 测量完成后,点击Show Report查看结果,选择Save进行保存. 6. 保存的数据对应地保存在C:\\Nanodrop Data文件夹.
注: 具体的实验方法如BCA,Bradford等以及标准曲线的建立请参阅生物学资料和说明书
名词介绍:
Nuclear Acid Measurement: 核酸测量
Protein 280: 用280nm波长测量蛋白,选择适当的蛋白类型(如BSA,IgG等),软件将在
测量后给出吸光度值并自动计算其浓度
MicroArray Measurement: 使用不同的荧光染料来测定核酸浓度
UV-vis Measurement: 连续波谱扫描,可用于寻找最大吸收峰
Cell Cultures: 用600nm波长测量菌密度
Protein BCA: BCA法测蛋白
Protein Bradford: Bradford法测蛋白
Protein Lowry: Lowry法测蛋白
User Preference: 用户对于软件的默认设置做一些修改
Utility & Diagnostics: 性能诊断
Sample Type: 选择样品的类型
Abs: 吸光度值
A260 10mm Path : 常规的分光光度计使用的比色杯宽度约为10mm,即测量光程为
10mm,与常规分光光度计不同的是,Nanodrop的测量光程是1mm和0.2mm.但是软件会自动将所测得的吸光度值转换成10mm光程对应的值. A260 10mm Path就是指10mm测量光程时样品在260nm波长时的OD值
A280 10mm Path: 10mm测量光程时,样品在280nm波长时的OD值
Dye: 染料
Max Absorbance: 使用者自己输入纵轴的最大量程
Hi Abs: 点击此钮用于测量高浓度样品(最高至10mm测量光程的75A ),仪器将采
用0.2mm光程测量
Replicate#: 测量重复样品或重复的标准品时的计数器
Reset This Std: 清除所选标准品的所有重复样品
: 使用者自己输入波长,并查看样品在此波长的OD值
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