肢体缺血预处理对兔肾急性缺血再灌注损伤的保护作用

维普资讯 http://www.cqvip.com 重庆医学２００８年４月第３７卷第７期　７４３　・论　著・　肢体缺血预处理对兔肾急性缺血再灌注损伤的保护作用　方针强，叶　钢△，刘永亮，贾维胜，肖　亚　（第三军医大学新桥医院泌尿外科，全军肾脏病中心，重庆４０００３７）　摘要：目的观察肢体缺血预处理对肾脏急性缺血再灌注损伤（ＩＲＩ）能否产生保护作用，并通过肾功能、组织病理学等检测　评估其效果。方法　（１）建模：４Ｏ只新西兰大白兔随机分为３个组，假手术（ｓ）组８只，缺血再灌注（ＩＲ）组和预处理（ＬＩＰ）组各１６　只，后２个组兔采用右肾切除、左肾动静脉阻断１ｈ开放法建立肾脏缺血再灌注模型，ｓ组仅切除右肾，游离左肾动静脉但不阻断。　（２）肢体缺血预处理方法：ＬＩＰ组在阻断前，先以止血带在双下肢根部绑扎，阻断血流５ｍｉｎ，完全开放１０ｍｉｎ，反复４次。（３）评估　指标：对比各组兔在再灌注后８、２４ｈ和３、７ｄ时肾功能、肾组织ＭＤＡ含量和ｓＯＤ活性以及组织病理学差异。结果ＬＩＰ组再灌　注后血清Ｓｃｒ和ＢｕＮ升高幅度要明显低于ＩＲ组（Ｐ＜０．０５），在再灌注后３ｄ内血Ｓｃｒ和ＢｕＮ明显低于ＩＲ组（Ｐ＜０．６５）；ＬＩＰ组　再灌注后２４ｈ内ＳＯＤ活性和ＭＤＡ含量的变化幅度明显低于ＩＲ组（Ｐ＜Ｏ．０５），且在各时间点ｓＯＤ活性均明显高于ＩＲ组（Ｐ＜　０．０５），ＭＤＡ含量均明显低于ＩＲ组（Ｐ＜Ｏ．０５）；ＬＩＰ组光镜下病理改变轻于ＩＲ组。结论　肢体缺血预处理能减轻肾脏缺血再灌　注引起的组织病理改变，降低肾组织ＭＤＡ含量并增加Ｓ０Ｄ活性，改善肾功能，对急性肾脏ＩＲＩ起到明显的保护作用。　关键词：肾脏；肢体缺血预处理；缺血再灌注损伤　中图分类号：Ｒ３６５．６９２　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７１－８３４８（２００８）０７—０７４３—０３　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｌｉｍｂ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅｃ０ｎｄｉｔｉ０ｎｉｎｇ　ｏｎ　ｒａｂｂｉｔ　ｋｉｄｎｅｙ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ａｃｕｔｅ　ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ＦＡＮＧ　Ｚｈｅｎ　ｑｉａｎｇ，ＹＥ　Ｇａｎｇ　，Ｌ儿，Ｙｏｎｇ—ｌｉａｎｇ，ｅｔ　ａ１．　（Ｒｅｎａｌ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ，Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｕｒｉｎａｒｙ　Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｘｉｎｑｉａｏ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，　Ｔｈｉｒｄ　Ｍｉｌｉｔａｒｙ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ　４０００３７，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｌｉｍｂ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ　ｏｎ　ｋｉｄｎｅｙ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ａｃｕｔｅ　ｉｓｃｈｅｍｉａ／　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊ　ｕｒｙ，ａｎｄ　ａｓｓｅｓｓ　ｉｔｓ　ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｂｙ　ｒｅｎａｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏ１ｏｇｉｃａ１　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　（１）Ｍｏｄｅｌｉｎｇ：Ｆｏｒｔｙ　Ｎｅｗ　Ｚｅａ—　ｌａｎｄ　ｒａｂｂｉｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｓｈａｍ－ｏｐｅｒａｔｅｄ　ｇｒｏｕｐ（Ｓ，ｎ一８），ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ（ＩＲ，ｎ一１６），ｌｉｍｂ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅ—　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ　ｇｒｏｕｐ（ＬＩＰ，ｎ一１６）．Ｔｈｅ　ａｃｕｔｅ　ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｍｏｄｅｌｓ　ｏｆ　ｋｉｄｎｅｙ　ｗｅｒｅ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌａｔｔｅｒ　ｔｗｏ　ｇｒｏｕｐｓ　ｂｙ　ｅｘｃｉ—　ｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｒｉｇｈｔ　ｋｉｄｎｅｙ　ａｎｄ　ｏｃｃｌｕｄｉｎｇ　ｔｈｅ　ｌｅｆｔ　ｒｅｎａｌ　ａｒｔｅｒｙ　ａｎｄ　ｖｅｉｎ　ｆｏｒ　１　ｈｏｕｒ，ｗｈｉｌｅ　Ｓ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｏｎｌｙ　ｓｕｂｊ　ｅｃｔｅｄ　ｔｏ　ｒｉｇｈｔ　ｎｅｐｈｒｅｃｔｏｍｙ　ａｎｄ　１ｉｂｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　１ｅｆｔ　ｒｅｎａ１　ａｒｔｅｒｙ　ａｎｄ　ｖｅｉｎ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｂｌｏｏｄｓｔｒｅａｍ．（２）Ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ＬＩＰ：Ｂｅｆｏｒｅ　ｏｃｃｕｓｉｏｎ，ｂｏｔｈ　１ｏｗｅｒ　ｌｉｍｂｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒａｂｂｉｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＬＩＰ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅ　ｏｃｃｌｕｄｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｏｕｒｎｉｑｕｅｔ　ｆｏｒ　５　ｍｉｎｕｔｅｓ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｂｙ　１０　ｍｉｎｕｔｅｓ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｆｏｒ　４　ｔｉｍｅｓ．　（３）Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ：Ｔｈｅ　ｒｅｎａｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ＭＤＡ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ａｎｄ　ＳＯＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｋｉｄｎｅｙ，ａｎｄ　ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏ１ｏｇｙ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ａｆｔｅｒ　８　ａｎｄ　２４　ｈｏｕｒｓ，３　ａｎｄ　７　ｄａｙｓ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｈｅｉｇｈｔｅｎｉｎｇ　ｅｘｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｓｃｒ　ａｎｄ　ＢＵＮ　ｏｆ　ＬＩＰ　ｇｒｏｕｐ　ａｆｔｅｒ　ｒｅｐｅｒ—　ｆｕｓｉｏｎ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ＩＲ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ　Ｓｃｒ　ａｎｄ　ＢＵＮ　ｏｆ　ＬＩＰ　ｇｒｏｕｐ　ｗｉｔｈｉｎ　３　ｄａｙｓ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ＩＲ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ％０．０５）．Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｄ　ｅｘｔｅｎｔ　ｏｆ　ＳＯＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ＭＤＡ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ＬＩＰ　ｇｒｏｕｐ　ａｆｔｅｒ　２４　ｈｏｕｒｓ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ＩＲ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ％０．０５）．Ｔｈｅ　ＳＯＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ＬＩＰ　ｇｒｏｕｐ　ａｔ　ｅａｃｈ　ｔｉｍｅ　ｐｏｉｎｔ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ＩＲ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ％０．０５），ａｎｄ　ｔｈｅ　ＭＤＡ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ＬＩＰ　ｇｒｏｕｐ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ＩＲ　ｇｒｏｕｐ　（Ｐ％０．０５）．Ｔｈｅ　ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏ１ｏｇｉｃ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｋｉｄｎｅｙ　ｏｆ　ＬＩＰ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｓｌｉｇｈｔｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ＩＲ　ｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｌｉｍｂ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ　ｃｏｕｌｄ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ　ｐｒｅｖｅｎｔ　ｔｈｅ　ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏ１ｏｇｉｃａ１　ｃｈａｎｇｅｓ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　ｒｅｎａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊ　ｕｒｙ，　ｃｕｔ　ｄｏｗｎ　ｔｈｅ　ＭＤＡ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ，ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ＳＯＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｒｅｎａ１　ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ｗｈｉｃｈ　ｓｈｏｗｓ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｋｉｄｎｅｙ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ａｃｕｔｅ　ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊ　ｕｒｙ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｋｉｄｎｅｙ；ｌｉｍｂ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ；ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊ　ｕｒｙ　临床手术过程中，缺血再灌注损伤（ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕｒｙ，ＩＲＩ）引起的急性肾功能衰竭（ａｃｕｔｅ　ｒｅｎａｌ　ｆａｉｌｕｒｅ，ＡＲＦ）　是临床上常见且严重的并发症，因为其治疗措施有限，死亡率　大约为３Ｏ　～５Ｏ　Ｉｌｌ。针对这一问题，本文采用肢体缺血预　物中心提供），雌雄不拘，体质量２．１～３．５ｋｇ，兔龄３～５个月。　１．２主要仪器和试剂　光学显微镜（Ｏｌｙｍｐｕｓ，ＢＨ２，Ｊａｐａｎ）；　７２１分光光度计（四川１分析仪器厂）；３　戊巴比妥钠（德国进口　分装）；１０　甲醛（新桥医院实验中心）；丙二醛（ＭＤＡ）和超氧　化物岐化酶（ｓＯＤ）试剂盒（南京建成生物工程研究所）。　１．３方法　处理（１ｉｍｂ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ，ＬＩＰ），旨在通过对兔下肢　预先反复短暂缺血及再灌注来激发机体内源性保护机制，达到　减轻肾急性ＩＲＩ的目的。　１材料与方法　１．３．１　肾脏缺血再灌注模型的建立　（１）麻醉：术前３　戊巴　比妥钠溶液按３０ｍｇ／ｋｇ体重经兔耳缘静脉注射；以静脉穿刺套　健康新西兰大白兔４Ｏ只（由新桥医院实验动　管针行耳缘静脉穿刺，固定后建立静脉通路，依照１００ｕ／１００ｇ体　１．１实验动物／ｘ通讯作者　维普资讯 http://www.cqvip.com ７４４　表１　重庆医学２００８年４月第３７卷第７期　各组兔缺血再灌注后不同时间点血Ｓｃｒ和ＢＵＮ值（　±Ｓ）　与Ｓ组比较，　；Ｐ＜０、０５，△：Ｐ＜０．０１；与ＬＩＰ组比较，＃：Ｐ＜０．０５，　：Ｐ＜０、０１。　表２　各组兔缺血再灌注后不同时间点肾脏ＳＯＤ活性和ＭＤＡ含量（　±Ｓ）　与Ｓ组比较，　Ｐ＜０．０５，△　Ｐ＜０、０１；与Ｉ　ＩＰ组比较，＃：Ｐ＜０．０５，▲｛Ｐ＜０、０１。　重的用量静脉注射肝素，术中生理盐水（０．８ｍＬ／ｌＯＯｇ体重）匀　速（Ｏ．８ｍＬ／ｈ）输入。（２）游离肾脏：腹部纵行切口，游离右肾至　虽然再灌注２４ｈ内ＳＯＤ活性也降低，ＭＤＡ含量也升高（Ｐ＜　０．０５），但其变化幅度明显低于ＩＲ组（Ｐ％０．０５），且在各时间　’肾蒂，１号丝线绕过’肾蒂，待结扎。以同法游离左肾，暴露腹主　动脉，完全游离左肾动脉、静脉至起始部。（３）采用无创伤动脉　夹从肾动静脉起始部夹闭动静脉，１ｈ后，开放左肾动脉及静　脉，使左肾血流复灌。左肾复灌前切除右肾。　１．３．２实验分组４Ｏ只兔随机分为３个组：假手术组（Ｓ组）８　只，开腹后切除右肾，分离左肾动脉但不夹闭；缺血再灌注组　（ＩＲ组）和预处理组（ＬＩＰ组）均为１６只，处理见动物模型，但　ＬＩＰ组在夹闭左肾动静脉前，先对双下肢进行预处理，以止血　点ｓ０Ｄ活性均明显高于ＩＲ组（Ｐ％０．０５），ＭＤＡ含量均明显　低于ＩＲ组（Ｐ％０．０５），再灌注３ｄ后其水平已经接近ｓ组，见　表２。　２．３肾脏组织病理学观察ＨＥ染色切片光镜下观察可见：Ｓ　组兔肾组织结构基本正常（封３图３）；ＩＲ组兔肾可见肾小管上　皮细胞出现程度较重的肿胀及溶解，肾小管刷状缘脱落或部分　脱落，以近区小管为甚，并见管型，肾问质局部出血水肿及炎性　细胞浸润，再灌注２４ｈ内随着再灌注时间的延长，这种改变逐　渐变明显（封３图４）；ＬＩＰ组可见肾组织病理改变以肾小管上　带在大腿根部绑扎，以手触摸股动脉搏动消失时开始计时，持　续５ｍｉｎ，完全开放ｌＯｍｉｎ，反复４次。　１．４标本采集制作　于再灌注后８、２４ｈ和３、７ｄ　４个时间点　采集静脉血并处死，切取左肾（假手术组各２只，ＩＲ组和ＬＩＰ　组各４只）。静脉血以生化分析仪常规生化分析法测定血肌酐　（Ｓｃｒ）和尿素氮（ＢＵＮ）；左肾标本用４℃冷生理盐水冲洗去血　液，剪下部分组织滤纸吸干，称取０．５ｇ，用玻璃匀浆器制成２　的组织匀浆，采用黄嘌呤氧化酶法测定ＳＯＤ活性，以ＴＢＡ比　皮细胞颗粒样变性为主，部分管腔扩张，偶见肾小管刷状缘脱　落或部分脱落及管型，肾间质局部轻度出血水肿及炎性细胞浸　润，病变明显轻于ＩＲ组（封３图５）。各组于再灌注后２４ｈ和　３ｄ时肾小管评分见表３。　表３　各组兔缺血再灌注后２４ｈ和３ｄ时肾小管评分（　±Ｓ）　色法测定ＭＤＡ含量；其余左肾组织甲醛固定，常规脱水，石蜡　包埋，制成５“ｍ切片，进行ＨＥ染色和肾小管评分。肾小管损　伤评分按照Ｓｏｌｅｚ等＿２　的方法，参照Ｐａｌｌｅｒ氏法：无损伤为０　分，轻度损伤为１分，中度损伤为２分，重度损伤为３分，极重　度损伤为４分。　与Ｓ组比较，　：Ｐ＜０．０１；与ＬＩＰ组比较，＃：Ｐ＜０．０１。　１．５　主要观察指标　血Ｓｃｒ和ＢＵＮ，肾脏ｓ０Ｄ活性和ＭＤＡ　含量，肾脏病理学改变。　３讨　论　缺血预处理是利用组织或器官短暂的缺血再灌注来激发　机体内源性保护机制，进而使该组织或器官对随后较长时间的　缺血产生耐受，又称为“经典预处理（ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ，　ＩＰＣ），，［　。１．６统计方法测定数据以ｉ士５表示，采用ＳＰＳＳＩＯ．０软件　进行统计学分析，对结果比较采用ｔ检验或方差分析，Ｐ％０．０５　为差异有统计学意义。　２　结　果　Ｔｏｏｓｙ等＿５　对实验鼠左肾动脉阻断４０ｍｉｎ前，预先　进行４个周期的ＩＰＣ（阻断４ｍｉｎ／开放１ｌｍｉｎ）可显著改善左肾　兔’肾脏ＩＲＩ后，血Ｓｃｒ和ＢＵＮ进行性　功能。进一步研究发现，对一个器官进行缺血预处理，会使远　隔器官产生缺血耐受，此预处理称为“远程预处理（ｒｅｍｏｔｅ　ｉｓ—　ｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ，ＲＩＰＣ）”¨６］。例如对肾脏进行缺血预处　２．１肾脏功能的测定升高，在ＩＲ组２４ｈ后Ｓｃｒ达到（２２４．３±２６．７）ｕｍｏｌ／Ｌ，ＢＵＮ达　到（１５．６±４．２）ｍｍｏｌ／Ｉ　。而在ＬＩＰ组，虽然血Ｓｃｒ和ＢＵＮ也　升高，但其升高幅度要明显低于ＩＲ组（Ｐ％０．０５），在再灌注后　７ｄ内各时问点血Ｓｃｒ和ＢＵＮ都要低于ＩＲ，以３ｄ内更明显（Ｐ　＜０．０５），见表１。　理后，长时间缺血对心脏、肺等器官的损害明显减轻Ⅲ。刘秀　华＿８　总结上述现象后提出：缺血预处理具有普遍性意义。本实　验基于此理论，同时为了避免肾脏缺血预处理的创伤，提出采　２．２肾脏ＳＯＤ活性和ＭＤＡ含量的测定ＩＲ组再灌注７ｄ内　用ＬＩＰ作为ＲＩＰＣ的方式之一，观察兔ＬＩＰ对肾脏急性ＩＲＩ的　保护作用。　ＳＯＤ活性均降低，ＭＤＡ含量均升高（Ｐ％０．０５）；而在ＬＩＰ组，　维普资讯 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重庆医学２００８年４月第３７卷第７期　实验初步结果显示：ＬＩＰ组肾脏缺血再灌注后血Ｓｃｒ和　ＢＵＮ升高幅度要明显低于ＩＲ组（Ｐ＜Ｏ．０５），在再灌注后３ｄ内　血Ｓｃｒ和ＢＵＮ明显低于ＩＲ组（Ｐ＜０．０５），光镜下病理改变轻　于ＩＲ组，肾小管评分优于ＩＲ组。上述实验结果说明ＬＩＰ组产　生了明显的缺血耐受，因此可以推知，Ｉ　ＩＰ后激发的内源性保　护机制使肾脏得到了有效的保护。其具体保护机制推测可能　与减轻氧化应激程度，并增加机体清除自由基的能力有关。　人体内的自由基主要是活性氧簇（ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｏｘｙｇｅｎ　ｓｐｅｃｉａｌ，　ＲＯＳ），包括超氧阴离子（０ｚ一），羟自由基（０Ｈ一）、单线态氧、一　７４５　要的临床应用前景。　参考文献：　［１］Ｒａｂｂ　Ｈ，Ｏ　Ｍｅａｒａ　ＹＭ，Ｍａｄｅｒｎａ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ，ｃｅｌｌ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ａｎｄ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ａｃｕｔｅ　ｒｅｎａｌ　ｆａｉｌｕｒｅ［Ｊ］．　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔ，１９９７，５１（５）：１４６３．　［２］Ｓｏｌｅｚ　Ｋ，Ｋｒａｍｅｒ　ＥＣ，Ｆｏｘ　ＪＡ，ｅｔ　ａ１．Ｍｅｄｕｌｌａｒｙ　ｐｌａｓｍａ　ｆｌｏｗ　ａｎｄ　ｉｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ａｃｕｔｅ　ｒｅｎａｌ　ｆａｉｌｕｒｅ［Ｊ］．Ｋｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔ，１９７４，６：２４．　［３］Ｐｅｒｄｒｉｚｅｔ—Ｇｅｏｒｇｅ　Ａ，Ｌｅｎａ—Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ　Ｊ，Ｓｈａｐｉｒｏ—Ｄａｖｉｄ　Ｓ，　ｅｔ　ａ１．Ｐｒｅｏｐｅｒａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ　ｐｒｅｖｅｎｔｓ　ｐａｒａｌｙｓｉｓ　氧化氮自由基（ＮＯ）、烷自由基、烷氧基和烷过氧基、脂质过氧　化物自由基等。生理条件下，这些自由基参与药物的降解，杀　灭细菌，调节机体免疫力，同时体内存在许多抗氧化系列可将　体内不断生成的自由基清除，机体维持一稳态。但在某些病理　ａｆｔｅｒ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ａｏｒｔｉｃ　ｓｕｒｇｅｒｙ：ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｈｅａｔ　ｓｈｏｃｋ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｔｏｌｅｒａｎｃｅ　ｏｆ　条件下，如肾脏缺血时，自由基的生成超过了机体清除能力时，　就造成了机体组织损伤。当肾脏缺血特别是再灌注期，自由基　生成和代谢的动态平衡被打破，氧化应激反应发生，ＲＯＳ生成　增多，消耗大量的抗氧化剂和自由基代谢酶，从而导致组织内　ｔｈｅ　ｓｐｉｎａｌ　ｃｏｒｄ［Ｊ］．Ｊ　Ｔｈｏｒａｃ　Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ　Ｓｕｒｇ，２００２，１２４　（１）：１６２．　［４］Ｋｈａｒｂａｎｄａ　ＲＫ，Ｍｏｒｔｅｎｓｅｎ　ＵＭ，ｗｈｉｔｅ　ＰＡ，ｅｔ　ａ１．Ｔｒａｎｓｉ—　ｅｎｔ　ｌｉｍｂ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｉｎｄｕｃｅｓ　ｒｅｍｏｔｅ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ　细胞凋亡或坏死，功能丧失。ＭＤＡ是脂质过氧化反应的代谢　产物，其含量可作为体内Ｅｌ由基水平的间接反映指标，代表细　胞受Ｅｌ由基损伤所涉及的脂质过氧化反应的程度　］。ＳＯＤ能　够清除超氧阴离子自由基，保护细胞免受损伤，其活性间接反　ｉｎ　ｖｉｖｏ［Ｊ］．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００２，１０６（２３）：２８８１．　［５］Ｔｏｏｓｙ　Ｎ，ＭｃＭｏｒｒｉｓ　ＥＬ，Ｍａｔｈｉｅ　ＲＴ，ｅｔ　ａ１．Ｉｓｃｈｅｍｉｃ　ｐｒｅ—　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｃｔｓ　ｔｈｅ　ｒａｔ　ｋｉｄｎｅｙ　ｆｒｏｍ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕ—　ｒｙＥＪ］．ＢＪＵ　Ｉｎｔ，１９９９，８４：４８９．　映了机体清除自由基的能力ｌ１　。　本实验观察到，ＩＲ组肾脏缺血再灌注后肾脏组织中氧化　［６］熊利泽，雷毅，董海龙，等．远程预处理对兔脊髓缺血再　灌注损伤的保护作用［Ｊ］．中国临床康复，２００３，７（２６）：　３５６５．　性指标ＭＤＡ含量明显增加，而抗氧化酶ＳＯＤ活性明显下降；　而在ＬＩＰ组再灌注后２４ｈ内ＳＯＤ活性和ＭＤＡ含量的变化幅　度明显低于ＩＲ组（Ｐ＜０．０５），且在各时间点ＳＯＤ活性均明显　高于ＩＲ组（Ｐ＜０．０５），ＭＤＡ含量均明显低于ＩＲ组（Ｐ＜　［７］　Ｋｉｎ　Ｈ，Ｚｈａｏ　ＺＱ，Ｓｕｎ　ＨＹ，ｅｔ　ａ１．Ｐｏｓｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ　ａｔｔｅｎｕ—　ａｔｅｓ　ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｂｙ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ｅｖｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅａｒｌｙ　ｍｉｎｕｔｅｓ　ｏｆ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ　Ｒｅｓ，２００４，６２：７４．　０．０５）。因此作者推测Ｉ　ＩＰ能降低肾脏缺血再灌注所造成的氧　化应激程度，减少体内自由基的形成，并能增加机体清除自由　基的能力。减轻肾脏损害，保护肾脏功能。　［８］刘秀华．预处理的普遍性及其机制探讨［Ｊ］．生理科学进　展，１９９８，２９（１）：３９．　当然，Ｉ　ＩＰ的保护机制是非常复杂的，可以肯定的是，多种　［９］李洪，杨天德，陶军，等．自由基在心肌细胞缺氧性ＤＮＡ　保护机制在共同起作用，深入研究其保护机制，尤其是分子机　制，有着重要的临床和科研意义。　另外，应用Ｉ　ＩＰ法时所需设备简单（一个止血带即可），不　影响手术时间和手术进程。　损伤和凋亡中的作用［Ｊ］．重庆医学，２００３，３２（８）：９６３．　［１Ｏ］龚华渠，杨天德，陶军．高渗盐水对缺血再灌注损伤肾组　织髓质过氧化酶活性的影响［Ｊ］．重庆医学，２００６，３５（６）：　５】９．　总之，Ｉ　ＩＰ法能有效防止肾脏急性ＩＲＩ，也可能防止其他组　织器官的ＩＲＩ，是一个安全、便捷而有效的方法，有着潜在而重　（上接第７４２页）　［４］Ｐａｔｉｌ　Ｓ，Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ　Ｒ．Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｔｉｂｉａｌ　ａｎｄ　ｆｅｍｏｒａｌ　ｎｏｎｕｎｉｏｎ　ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　Ｉｌｉｚａｒｏｖ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，ａｎｄ　ｉｔｓ　（收稿日期：２００７一ｌＯ一１５）　限元分析一（Ｉ）有限元分析模型及股骨失效准则的建立　［Ｊ］．生物医学工程学杂志，２００６，２３（５）：１０２８．　［９］胡勇，谢辉，杨述华．三维有限元分析在脊柱生物力学中　ｃｏｓｔ　ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｂｏｎｅ　Ｊｏｉｎｔ　Ｓｕｒｇ　Ｂｒ，２００６，８８（７）：　９２８．　应用研究［Ｊ］．医用生物力学，２００６，２１（３）：２４６．　［１Ｏ］王志杰，丁自海，钟世镇．有限元法在骨应力分析及骨科　内外固定系统研究中的应用［Ｊ］．中国临床解剖学杂志，　２００６，２４（１）：１０７．　［５］黄雷，张建立，王慎东，等．三种不同器械固定胫骨骨折　的生物力学评价及临床意义［Ｊ］．中华创伤骨科杂志，　２００６。８（７）：６６８．　ｒ１１］Ｒｏｂｅｒｔｓ　ＣＳ，Ａｎｔｏｃｉ　Ｖ，Ａｎｔｏｃｉ　ＪＶ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｆｉｘｉｏｎ　ｗｉｒｅ　ｃｒｏｓｓｉｎｇ　ａｎｇｌｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｔｉｆｆｎｅｓｓ　ｏｆ　ｆｉｎｅ　ｒ６］　Ｓｈｏｒｔｔ　Ｎ，Ｋｅｅｎａｎ　ＧＦ．Ｉｌｉｚａｒｏｖ　ａｎｄ　ｔｒａｕｍａ　ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ　［Ｊ］．Ｃｕｒｒ　Ｏｒｔｈｏｐ，２００６，２０（１）：５９．　ｒ７］Ｇａｒｃｉａ—Ｃｉｍｂｒｅｌｏ　Ｅ，Ｍａｒｔｉ－Ｇｏｎｚａｌｅｚ　ＪＣ．Ｃｉｒｃｕｌａｒ　ｅｘｔｅｒｎａｌ　ｗｉｒｅ　ｅｘｔｅｒｎａｌ　ｆｉｘａｔｉｏｎ：ａ　ｂｉｏｍｅｃｈａｎｉｃａｌ　ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｉｎｊｕｒｙ，　２００５，３６（９）：１１０７．　ｆｉｘａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｉｂｉａｌ　ｎｏｎｕｎｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｏｒｔｈｏｐ　Ｒｅｌａｔ　Ｒｅｓ，　２００４，４１９：６５．　（收稿日期：２００７—０９—１５）　［８］樊黎霞，Ｅｒｉｃ　Ｗａｎｇ．人在摔倒时股骨上端承载能力的有