全自动生化仪免疫比浊法检测血清白蛋白的方法学评价
目的 使用免疫比浊法对血清白蛋白(ALB)测定的方法学进行评价。 方法 根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的标准,对免疫比浊法测定血清白蛋白的精密度、线性范围、回收率及准确性等指标进行测试,同时与溴甲酚绿法进行相关性的比较。 结果 精密度批内CV55 g/L)进行比较。不同水平血清白蛋白的检测结果比较见表3。
结果表明两法差异无统计学意义(P > 0.05),直线回归方程Y =1.05X +5.56(Y:免疫比浊法;X:溴甲酚绿法),F = 103.3,r = 0.926,提示两法有良好的相关性。
2.6 干扰试验
取一份混合血清(血清白蛋白为50.7 g/L)分别加入不同浓度血红蛋白、胆红素和脂肪乳剂(以TG浓度表示),分别测定血清白蛋白值。结果显示,TG≤23.0 mmol/L,Hb≤50 g/L,TBIL≤400 μmol/L时对本法无显著干扰。
3 讨论
ALB是血浆中含量最多、功能最重要的一种蛋白质。它广泛地存在于人体的血液、淋巴、肌肉组织中,属于非专一性的运输蛋白,其含量的测定对临床疾病的诊断、治疗、预后判断都具有非常重要的意义,其测定结果的准确性也因此而受到广泛的重视[5]。长期以来,溴甲酚绿(bromcresol green,BCG)染料结合法测定ALB广泛应用于临床,目前国内大多数医院仍然沿用这一方法,但该法会因BCG与非ALB类蛋白质非特异性结合,使得其检测特异性一直以来不是很理想。因此,近年来外国某些公司开发出来的白蛋白高特异性免疫比浊法就受到了高度关注[6-7]。免疫比浊法也称浊度法,属于散射光谱分析,是在比色的基础上发展起来的,其测定理论、方法、计算等许多方面和比色法相似,但本质上又有区别[8]。
最近几年免疫比浊开始应用于临床体液中白蛋白含量检测的领域。再由于配合全自动生化分析仪的优势,白蛋白的检测基本能够实现高速、灵敏和自动化。为了评价免疫比浊法对ALB的测定效果,本文对该方法检测血清白蛋白的重复性、回收率、抗干扰性以及其检测线性范围等进行实验,实验结果表明,免疫比浊法测定血清ALB的重复性较好,回收率高,线性范围可达5~89 g/L,而且不易受溶血、黄疸和脂血等临床常见干扰因素的影响。同时用免疫比浊法与溴甲酚绿法对标本进行定量检测,分析结果显示免疫比浊法比溴甲酚绿法检测结果偏低,可能由于免疫比浊法受到的非特异性干扰较少所致,但两法有良好的相关性。因此免疫透射比浊测定白蛋白能够适合各种有全自动生化分析仪的医院开展,完全符合实验室常规检测的要求。
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